一、抗乙肝特异胎盘因子的制备（论文文献综述）
张尚卫[1]（2018）在《猪胎盘粉对哺乳母猪繁殖性能、免疫指标和生殖激素以及乳成分的影响》文中认为为研究猪胎盘中生物活性物质的含量以及猪胎盘粉对哺乳母猪繁殖性能、免疫指标、生殖激素和乳成分的影响。本试验首先采用Tricine-SDS-PAGE电泳法、考马斯亮蓝G-250法和ELISA法,分别测定6副刚娩出新鲜猪胎盘中胎盘肽含量、相对分子质量和生殖激素含量;然后选取36头预产期、体重相近的经产大×长二元母猪,将其随机分为4组,每组9个重复,每个重复1头猪。对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组在基础饲粮中分别添加1%、3%、5%的猪胎盘粉。试验于妊娠104天开始,至产后21天结束。试验结果表明:1.猪胎盘中胎盘肽相对分子质量平均水平约为12.31±1.51KD;胎盘肽相对含量平均水平为0.77±0.03 mg/g;胎盘中催产素、前列腺素E2、催乳素、绒毛膜促性腺素平均含量分别为16.34±1.6 pg/ml、521.73±75.5 pg/ml、536.07±66.95 ml U/ml、6.98±0.59 ml U/ml。2.与对照组相比,饲粮中添加猪胎盘粉剂能够显着增加母猪平均日采食量、21日龄仔猪窝重、仔猪断奶个体均重和断奶窝重（P<0.05）,显着提高哺乳期仔猪的平均日增重（P<0.05）,且显着降低母猪体重的损失量（P<0.05）;各试验组乳汁中乳糖、乳脂含量均有所上升,其中试验Ⅱ、Ⅲ组于对照组显着增加（P<0.05）。3.母猪分娩后第3天,试验Ⅱ组血清中IL-6含量显着高于对照组、试验Ⅰ组和试验Ⅲ组（P<0.05）,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组Ig A含量显着高于对照组（P<0.05）,试验Ⅰ、Ⅱ组Ig M与Ig G含量极显着高于对照组、试验Ⅲ组（P<0.01）;母猪分娩后第15天,试验Ⅰ、Ⅱ组中Ig A和Ig G含量显着高于对照组和试验Ⅲ组（P<0.05）,对照组Ig M含量极显着低于各试验组（P<0.01）。两阶段各试验组血清中PRL含量明显高于对照（P<0.05）,而LH无显着变化。综上所述,在饲粮中添加猪胎盘粉能改善哺乳母猪繁殖性能、血液免疫指标、生殖激素和乳汁品质。在本实验条件下猪胎盘粉的适宜添加量为3%。
张浩军,冯玉康,张怡,王文鹏,修亚丽,姜国志,张明正,王正品[2]（2015）在《HPGFC法检测抗乙肝胎盘转移因子高分子量物质的研究》文中认为目的测定抗乙型肝炎胎盘转移因子（anti-HBV placenta transfer factor,PSTF）的高分子物质组成和分子量。方法利用柱色谱法将PSTF中高分子量的组份分离,再采用高效凝胶过滤色谱法（high performance gel filtration chromatography,HPGFC）测定PSTF组份中高分子量物质的分子量。结果通过对分离到的PSTF中高分子量成份的检测,其分子量为9485.9Da。结论 PSTF应是多肽和核苷酸的复合物。
张浩军,赵玉欣,孙胜斌,姜国志,王正品,陈钟,张明正[3]（2015）在《抗乙肝胎盘转移因子注射液分子量分布的研究》文中研究指明目的建立电泳、高效液相色谱和质谱方法,测定抗乙肝胎盘转移因子注射液（anti-HBV placenta transfer factor injection,PSTF）中的分子量分布。方法采用SDS-PAGE、高效空间排阻色谱（HPSEC）、激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOFMS）检测分子量。结果电泳法显示其分子量在8000 Da左右;HPGFC法检测到其有4个有效成分,分子量为5026.67、6783.44、7496.42、8736.55 Da;质谱检测其主成份分子量是2972 Da,最大分子量是8197 Da。结论 HPSEC法检测快速、简便,可作为抗乙肝胎盘转移因子注射液的高分子量物质的控制方法。
王炳祥[4]（2011）在《山羊胎盘肽的分离和初步鉴定及营养、免疫、抗氧化作用的研究》文中指出自1985年刘月新首次采用“匀浆-透析法”提取人胎盘肽以来,广大科研工作者对胎盘肽进行了大量的理化分析与生物活性测定的研究,发现其在临床用于治疗病毒性肝炎、白细胞减少症、重症肌无力等免疫性疾病以及恶性肿瘤等,有较为理想的疗效。山羊胎盘的结构和功能与人的胎盘有许多相似之处,近几年来已有报道,从羊的胎盘中也可以提取出羊胎盘肽,并且具有与人胎盘肽类似的生物学活性,但是目前对于羊胎盘肽生物活性的研究还不全面,胎盘肽中活性组分的具体研究更是非常缺乏,而山羊胎盘来源有限,如用于临床,规模化生产胎盘肽需通过基因工程,活性组分的研究是基因工程的前提。本试验通过超滤制得胎盘肽,通过层析和电泳对其进行了初步分离和鉴定,对胎盘肽粗提物从营养学方面进行了分析,对胎盘肽粗提物和各分离出的组分从免疫和抗氧化方面进行了研究,旨在揭示羊胎盘肽在营养、免疫和抗氧化方面的作用,以及为活性组分的进一步研究提供参考。整个研究包括以下部分:一、山羊胎盘肽的分离提纯和初步鉴定取冷冻的山羊胎盘子叶,解冻后生理盐水冲洗,然后剪碎,经过反复冻融三次、高速组织匀浆机匀浆（12000r,3min,10次）、冷冻离心（4℃,8000r,20min）、取上清液微滤（0.22μm）、超滤（10KD）得到胎盘肽粗提物,粗提物为无色透明液体,为具有可透析可超滤性无热原的小分子多肽,PH6.6-6.9。粗提物经Superdex75层析得到四个组分,分别为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ,冷冻干燥均为白色粉末,四组分经加脲和甘油Tricine-SDS-PAGE电泳显示分子量分别为10.139KDa、8.166KDa、7.447KDa、6.761KDa。二、胎盘肽提取液的氨基酸分析和矿物元素测定山羊胎盘肽提取液中,共检出17种氨基酸,其中必需氨基酸7种,含量占总氨基酸的34.56%,对于儿童而言（儿童另需要精氨酸和组氨酸）,含必需氨基酸9种,占总含量的42.59%,含有Fe、Zn、Cu等微量元素,重金属种类很少且含量非常低,不存在临床使用中重金属中毒的威胁。由此可见,山羊胎盘肽提取液具有极高的营养价值,是安全理想的氨基酸补充营养品。三、山羊胎盘肽对小鼠免疫功能的影响将小鼠随机分成6组,其中5组为试验组（分别腹腔注射组分:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、和粗提物）;每个试验组又分为高中低三种剂量小组（分别为18mg/kg、9mg/kg、4.5mg/kg）,每小组10只;对照组10只,仅注射生理盐水。每天注射一次,连续注射一周。通过对各组分试验组小鼠外周血血清中IL-2含量同对照组相比可见,各组分均具有提高小鼠血液中IL-2含量的作用,其中组分Ⅲ、Ⅳ及粗提物试验组IL-2含量比对照组提高了15.3%～30.1%,差异达到显着（p<0.05）,组分Ⅳ的活性较强,但与组分Ⅲ和粗提物相比差异并不显着（p>0.05）。通过对各组分试验组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能同对照组相比可见,组分Ⅲ、Ⅳ及粗提物有促进小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的作用,同对照组相比,差异极显着（p<0.01）。本实验结果提示组分Ⅲ、Ⅳ及粗提物可显着提高小白鼠的免疫功能,在胎盘小肽这类混合小肽中有免疫活性的主要成分是组分Ⅲ、Ⅳ。四、山羊胎盘肽对小鼠抗氧化能力的影响通过对各组分试验组小鼠SOD、MDA含量及SOD/MDA值同对照组相比显示,中高剂量的胎盘肽Ⅳ和粗提物能显着提高小鼠血清SOD含量（P<0.05）,显着降低MDA含量（P<0.05）,显着提高SOD/MDA值（P<0.05）,提高小鼠的抗氧化能力,高剂量组比中剂量组更明显,但没有出现差异极显着的情况（P>0.01）,说明山羊胎盘肽和粗提物提高小鼠的抗氧化能力具有剂量相关性且在一定的限度内。粗提物的活性最高,与组分Ⅳ相比差异不显着（p>0.05）。组分Ⅳ的作用不及粗提物可能与分离过程胎盘肽活性的丧失有关,在胎盘肽粗提物中起增强小鼠抗氧化能力作用的是组分Ⅳ。
周建伟[5]（2009）在《甲型副伤寒STF口服制剂的制备和检定》文中研究指明目的:初步研制一种用于紧急预防和辅助治疗甲型副伤寒的新型生物制剂,并探索其制备工艺。方法:（1）体内免疫法制备甲型副伤寒特异性转移因子（PA-STF）:制备甲型副伤寒沙门菌（SPA）免疫原,采取皮下多点注射免疫山羊,免疫成功后分别取脾脏和淋巴结制备PA-STF。（2）体外免疫法制备PA-STF:采用SPA体外免疫脾细胞技术,探索PHA刺激的合适剂量、免疫原最佳浓度及最佳作用时间、免疫羊脾细胞最适培养时间,按优化条件培养羊脾细胞,制备PA-STF。（3）PA-STF的理化性质检定:采用紫外分光光度计进行多波长扫描,以苔黑酚法和改良Lowry法分别检测PA-STF的核糖及多肽含量,并进行无菌试验、热原质试验和安全试验等。（4） PA-STF的免疫学活性检定:取昆明小鼠,随机分成实验1组、实验2组、对照1组、对照2组和NS组,分别以体内法制备的PA-STF、体外法制备的PA-STF、体内法制备的非特异性转移因子（nTF）、体外法制备的nTF、生理盐水灌胃,采用淋巴细胞增殖试验、白细胞粘附抑制试验（LAIT）、吞噬细胞吞噬功能试验、吞噬细胞杀菌功能试验和免疫保护性试验等检定PA-STF的免疫学活性。免疫保护性试验中,SPA攻击后第4天仍然存活的小鼠,取5只观察攻击后2周时的一般情况,剩余小鼠在攻击后第7天处死,剪取3cm的回肠用4%甲醛固定后,HE染色,镜检,观察肠粘膜的病理学改变。结果:（1）以淋巴结制备的PA-STF的多肽浓度为1.83±0.17mg/ml,核糖浓度为0.572±0.024mg/ml,以脾脏制备的PA-STF的多肽浓度为1.59±0.22 mg/ml,核糖浓度为0.493±0.015mg/ml,两者相比,多肽之间及核糖之间浓度没有显着差异（P＞0.05）。（2） 100μg/ml的PHA与脾细胞培养6h后,加入0.2ng/ml的SPA免疫原,继续培养至96h条件下制备的PA-STF的多肽和核糖的含量,明显高于其他剂量、时间等条件下制备的PA-STF（P＜0.05）。（3）两种方法制备的PA-STF的氨基酸、多肽、核糖的含量无显着性差异（P＞0.05）,无菌试验均为阴性,热原质试验和安全试验均合格。（4）两种方法制备的PA-STF在多肽浓度为0.60mg/ml时,对淋巴细胞的刺激指数（SI）明显高于其它浓度时的SI（P＜0.05）;两实验组的LAIR均高于两对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;两实验组之间比较,LAIR无显着性差异（P＞0.05）;吞噬细胞的吞噬功能和杀菌功能试验中,实验组与对照组之间以及两实验组之间比较,吞噬率和杀菌率均无显着性差异（P＞0.05）,各组吞噬率与杀菌率的相关系数均大于0.8;免疫保护性试验中,两实验组分别与两对照组比较,实验组小鼠存活率均明显高于对照组（P＜0.05）,两实验组之间差异无统计学意义（P＞0.05）。实验组存活小鼠2周时一般情况明显好于其它组,且病理学结果显示小鼠回肠粘膜的炎性程度较其它组轻。结论:（1）体内免疫法成功制备PA-STF,脾脏和淋巴结均可作为制备原料;体外免疫法成功制备PA-STF,以100μg/ml的PHA与脾细胞共同培养6h,然后加入浓度为0.2ng/ml的PA免疫原,第96h终止培养为最佳制备条件。（2）两种方法制备的PA-STF口服制剂的理化性质均符合《中国药典》（2005版）的要求标准。（3）两种方法制备的PA-STF口服制剂均可以增强小鼠的非特异性免疫应答,能够转移针对SPA的特异性免疫效应。
马兴亮[6]（2008）在《奶山羊胎盘肽的分离提纯及其对小白鼠免疫功能的影响》文中指出自1985年,刘月新首次采用“匀浆-透析法”提取胎盘肽以来,广大科研工作者对胎盘肽进行了大量的理化分析与生物活性测定的研究,发现其在临床用于治疗病毒性肝炎、白细胞减少症、重症肌无力等免疫性疾病以及恶性肿瘤等,有较为理想的疗效。奶山羊胎盘的结构和功能与人的胎盘有许多相似之处,近几年来已有报道,从羊的胎盘中也可以提取出羊胎盘肽并且具有与人胎盘肽类似的生物学活性。但是对奶山羊胎盘肽的研究还没有,测定其理化性质和生物活性,看其与人胎盘肽的活性是否一致。可以为奶山羊胎盘肽的研究和将其用于治疗动物或人疾病方面提供一定的依据。以前的报道多集中于经透析或超滤制的的混合小肽的活性的研究。本试验将经过超滤和superdex75层析对混合小肽进行分离,通过检测各个组分的生物学活性来筛选有活性的组分,为下一步的生物合成或化学合成提供一定的依据。整个研究包括两大部分:一奶山羊胎盘肽的分离提纯和含量测定将冷冻的奶山羊胎盘常温解冻,洗净血液后用生理盐水冲洗胎盘,取胎盘的子叶,将子叶剪碎,经过反复冻融,经高速组织捣碎匀浆机匀浆,高速冷冻离心机离心沉淀,取上清液分别用0.45μm、0.22μm的滤器进行微滤,以除去不溶物质;微滤液经Millopor YM-10型超过滤器过滤得到粗样品,粗样品是无色透明液体,具有可透析性,可超滤性,无热原的小分子多肽,pH值为6.6～6.9;粗样品经superdex75层析得到四个组分肽类,分别为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ,冷冻干燥后均为白色的粉末;四组分经加脲和甘油Tricine-SDS-PAGE电泳法电泳。结果显示组分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的分子量分别为10.139KDa、8.166KDa、7.447KDa和6.761KDa;由考马斯亮蓝G-250法测定组分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的含量分别为:0.96mg/g、1.2mg/g、1.32mg/g、1.8mg/g。二奶山羊胎盘肽对小白鼠免疫功能的影响本实验将小白鼠随机分为6大组,其中5组为实验组（分别腹腔注射组分:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和粗提物）;每个实验组又分为高中低三种剂量小组（分别为0.1mL、0.2mL、0.4mL）,每小组5只;对照组5只,仅注射生理盐水。每天注射一次,连续注射一周。通过对小鼠外周血血清白介素2含量、脾脏T淋巴细胞增殖反应、脾脏NK细胞活性和腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响来考察奶山羊胎盘肽的免疫活性作用。1.通过放射性免疫法测定小鼠外周血中IL-2的含量,结果显示,组分Ⅲ、Ⅳ和粗提物可以显着提高小鼠外周血中IL-2的含量,比对照组提高了15.3%～30.1%（p<0.05）。2.通过MTT法测定脾脏T淋巴细胞增殖反应,结果显示,组分Ⅲ、Ⅳ和粗提物可以在体内能极显着协同ConA刺激脾脏淋巴细胞增殖（p<0.01）。3.通过MTT法测定脾脏NK细胞的杀伤活性,结果显示,组分Ⅲ、Ⅳ和粗提物可以极显着提高小白鼠脾脏NK细胞的杀伤活性（p<0.01）。4.通过腹腔巨噬细胞吞噬中性红实验可知,组分Ⅲ、Ⅳ和粗提物可以极显着提高小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能（p<0.01）。由以上奶山羊胎盘肽对小鼠免疫功能影响的4个实验结果中,发现存在剂量关系,随着浓度的能加而增强,但是差异不显着;在奶山羊胎盘肽中有免疫活性的是组分Ⅲ和Ⅳ。
谷玉[7]（2007）在《羊胎盘保健品的制备及主要功效研究》文中提出本文以羊胎盘为原料,按照匀浆、冻融、酶解、提取、冻干等现代工艺进行提取,并将提取物与其他辅配原料按两种不同的配方制备成羊胎盘保健品胶囊Ⅰ号（GPHPⅠ）和羊胎盘保健健品Ⅱ号（GPHPⅡ）,其中GPHPⅠ每粒胶囊的羊胎盘含量相当于鲜胎盘15g,GPHPⅡ每粒胶囊的羊胎盘含量相当于鲜胎盘30g。以小白鼠为试验动物,对这两种不同配方的保健品进行毒性试验检测（包括急性毒性试验、精子畸形试验和30天饲喂观察试验）、免疫功能测定（包括免疫器官指数测定、巨噬细胞吞噬能力测定、炭廓清能力、迟发性变态反应和血清溶血素测定）和部分的延缓衰老、抗疲劳的动物试验（包括负重游泳、血清尿素氮含量测定、红细胞SOD活性和MDA含量测定）,为产品的商品性开发提供相关理论依据。GPHPⅠ和GPHPⅡ每个项目试验分别设四个组,即低、中、高三个不同剂量组和对照组,每组10只小白鼠,不同剂量组均采取人工灌胃方法投喂,低、中和高剂量组的灌胃量分别为相当于人体推荐摄人量的1倍、5倍和10倍剂量。毒性试验结果表明,两种配方的羊胎盘保健品均无毒,给小白鼠灌胃的各剂量组中,急性和30天饲喂观察,小白鼠均无死亡;采食及排便均无异常,且精神状态良好,被毛光滑,无寒战、躁动等异常现象;GPHPⅠ各剂量小白鼠精子畸形率分别（分别为3.90%,3.85%和3.65%）与对照组（3.80%）相比差异不显着（p＞0.05）。GPHPⅡ各剂量小白鼠精子畸形率分别（分别为3.95%,3.85%和4.15%）,与对照组（3.80%）相比差异不显着（p＞0.05）。免疫功能检测结果表明,GPHPⅠ免疫功能试验中的低、中和高剂量组小白鼠的胸腺指数与对照组无明显差异（p＞0.05）,但高剂量组小白鼠的脾脏指数显着高于对照组（p＜0.05）,分别为8.342和6.104;二硝基氟苯诱导小鼠迟发型变态反应试验结果表明,GPHPⅠ的低剂量和中剂量试验组小白鼠细胞免疫功能（分别为2.49和2.51）与对照组（1.88）比较,都有显着增强（p＜0.05）,而高剂量组（3.00）则有极显着增强（p＜0.01）;血清溶血素试验测定结果表明,GPHPⅠ的低剂量试验组小白鼠体液免疫功能（49.2）显着高于对照组（35.3）（p＜0.05）,而中、高组（分别为58.1和80.6）则极显着高于对照组（p＜0.01）;碳廓清试验结果表明,GPHPⅠ的各剂量组小鼠单核巨噬细胞吞噬功能与对照组差异不显着（p＞0.05）;腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验结果表明,低剂量组小鼠巨噬细胞的吞噬率（0.294）与对照组（0.254）比较有显着增强（p＜0.05）,而中、高组（分别为0.327和0.352）则得到极显着增强（p＜0.01）;低剂量组小鼠巨噬细胞的吞噬指数（1.175）与对照组（1.152）比较差异不显着（p＞0.05）,中剂量组（1.211）差异显着（p＜0.05）,高剂量组（1.241）差异极显着（p＜0.01）。以上结果表明,GPHPⅠ具有增强免疫力功能的作用。免疫功能检测结果表明,GPHPⅡ免疫功能试验中的低、中和高剂量组小白鼠的胸腺指数与对照组无明显差异（p＞0.05）,但高剂量组小白鼠的脾脏指数显着高于对照组（p＜0.05）,分别为7.734和6.104;二硝基氟苯诱导小鼠迟发型变态反应试验结果表明,高剂量组的GPHPⅡ能显着增强小白鼠细胞免疫功能的作用（p＜0.01）,分别为2.85和1.88;血清溶血素试验测定结果表明,GPHPⅠ的低剂量试验组小白鼠体液免疫功能（42.4）显着高于对照组（35.3）（p＜0.05）,而中、高组（分别为59.1和71.0）则极显着高于对照组（p＜0.01）;碳廓清试验结果表明,中剂量组的GPHPⅡ能使小鼠单核巨噬细胞吞噬功能显着提高（p＜0.05）;腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验结果表明,低剂量组小鼠巨噬细胞的吞噬率（0.269）与对照组（0.254）比较差异不显着（p＞0.05）,而中、高组（分别为0.305和0.324）则分别达到显着（p＜0.05）和极显着（p＜0.01）;低剂量组小鼠巨噬细胞的吞噬指数（1.175）与对照组（1.152）比较差异不显着（p＞0.05）,中剂量组（1.197）和高剂量（1.230）组差异显着（p＜0.05）。以上结果表明,GPHPⅡ具有增强免疫力功能的作用。延缓衰老、抗疲劳试验结果表明,高剂量的GPHPⅠ能使小白鼠SOD活性（55120.60U/g Hb）显着高于对照组（48355.31U/g Hb）（p＜0.05）,MDA含量（12.298nmol/ml）也显着低于对照组（14.340 nmol/ml）（p＜0.05）,而低、中剂量组这两个指标与对照组差异均不显着（p＞0.05）;小白鼠负重游泳试验表明,GPHPⅠ的各剂量组与对照组相比差异不显着（p＞0.05）,而中（12.88 n mol/ml）、高剂量组（12.12nmol/ml）的小白鼠血清尿素氮含量和与对照组（14.61 n mol/ml）比较显着降低（p＜0.05）。以上结果表明,GPHPⅠ对延缓衰老、抗疲劳具有一定的作用。中（54006.42U/g Hb）、高剂量组（57643.10 U/g Hb）的GPHPⅡ能使小白鼠SOD活性显着高于对照组（48355.31 U/g Hb）,且中（13.277 nmol/ml）、高剂量组（13.085 nmol/ml）的GPHPⅡ能显着降低MDA含量（p＜0.05）。小白鼠负重游泳试验表明,GPHPⅡ高剂量组能延长小白鼠游泳时间（p＜0.05）,中（12.34 n mol/ml）、高剂量组（12.53n mol/ml）的小白鼠血清尿素氮含量和与对照组（14.61 n mol/ml）比较显着降低（p＜0.01）。以上结果表明,GPHPⅡ对延缓衰老、抗疲劳具有一定的作用。GPHPⅠ和GPHPⅡ均具有增强免疫力功能并且对延缓衰老、抗疲劳也具有一定的作用。其中GPHPⅡ的效果更好。
唐雯[8]（2007）在《组织因子基因沉默对胎盘早剥HUVECs的影响》文中认为研究背景和目的：胎盘早剥（placental abruption，PA）是妊娠晚期严重并发症，也是导致围产儿死亡的最主要的原因之一，胎盘早剥增加了新生儿的发病率和死亡率，也被证实是出生低体重如小于胎龄儿的发生原因之一，国内杨建波等报道发病率为0.06％～2.1％，这部分新生儿中死亡率较高，高达20％～35％，15倍于无胎盘早剥者，苏丹的Wad Medani医院报道的PA的发病率占正常分娩的6.5％，其中死胎和出生后一个月的死亡率为20.2％，Salihu报道美国1995-1998年出生的1548.8万婴儿中单胎、双胎及三胞胎胎盘早剥的发生率不一致，各为6.2／1000、12.2／1000及15.6／1000，随着胎儿数量的增加，胎盘早剥的发生率增加。胎盘早剥母亲分娩的新生儿中，大多数会发生凝血功能障碍，而在严重的胎盘早剥以及其他严重的妊娠合并症中，高凝状态可以导致胎盘血栓形成，影响胎儿的凝血功能和生命安全，同样是该类新生儿较为潜伏而凶险的病理变化。体内的凝血过程由外源性凝血途径和内源性凝血途径构成，目前研究发现外源性凝血途径在病理性凝血的过程中发挥着主要的作用，，而组织因子作为外源性凝血途径的启动因子，与许多疾病包括胎盘早剥对新生儿凝血系统的影响方面有着密切相关。母亲羊水、胎盘、蜕膜及子宫肌层中含有明显高于血浆的组织因子，在分娩前的正常情况下，蛋白质、多肽能够通过出、入胞方式通过胎盘屏障，是由胎盘合体滋养层细胞表面的特殊受体决定，部分物质如激素类的蛋白质跨越母亲的胎盘屏障细胞间隙时，受到胎盘屏障上的酶类存在下被降解而不会产生生理效应，包括肽酶a酶类，来自母体的物质在通过胎盘屏障的机制方面，目前认为与母体面的血窦细胞滋养层及胎儿部分丛密的绒毛有关，胎盘可以选择性地允许某些大分子物质如IgG通过。胎盘早剥主要的病理改变是子宫的螺旋动脉断裂，其他的临近组织也同时受到损伤，Kuczynski报道在PA的胎盘和子宫肌层中含有显着高于血浆的TF，而TFPI的水平似乎很低，胎盘早剥发生时，其剥离处胎盘绒毛和蜕膜释放大量的组织因子，一方面这些凝血因子可能通过胎盘进入胎儿血液循环，影响胎儿及出生后的新生儿的凝血系统功能，另一方面由于损伤可能使胎儿体内凝血系统受到激活，使胎儿以及产出后的新生儿发生凝血功能障碍，严重时由于凝血酶的增加，使大量纤维蛋白原转为纤维蛋白，最后产生广泛性血管内凝血。我们的前期研究也发现，由于母亲PA所入院的新生儿中，一部分患儿是处于高凝状态，而重症产妇所生新生儿多数在入院时已处于低凝期或者纤溶期。母体由于调节机制较为完善，需要较多的促凝物质进入血循环才可引起严重的DIC，而胎儿机体小且调节机制不完善，只需要少量促凝物质即可引起严重DIC。对这些情况如果处理不及时，就会危及胎儿及新生儿的生命，造成死胎或者新生儿DIC。我们研究在PA时凝血因子组织因子和抗凝物质组织因子途径抑制物在母亲、脐血及新生儿血液中的变化，从而也了解在胎盘损伤时其两侧的这两种蛋白质分子是否存在差异，目前在国内外文献中尚未见报道。尽管在新生儿的这种高危状态下治疗是多方面的，但目前的治疗主要在被动地应用纤维蛋白原、血小板及其他凝血因子。在治疗这类出凝血性疾病时，设想通过瞬时关闭组织因子途径中组织因子的表达，达到短暂阻止凝血过程的启动，减少凝血因子和血小板的消耗，从而防治母亲胎盘早剥对新生儿凝血功能的影响。RNAi技术（RNA interference，RNAi）是一种可高效、特异地下调目标基因的表达并在基因功能研究和基因治疗领域有着广阔应用前景的技术。近年来进展主要集中在诱导特异性靶基因表达沉默、干扰信号传导通路、抑制艾滋病病毒基因和肝炎病毒基因、抑制癌基因、癌相关基因或突变基因的过度表达，使这类基因保持在静默或休眠状态，从而有望成为这类疾病新的手段。我们设想应用RNAi技术瞬时关闭组织因子的表达，达到阻止凝血过程的启动，干扰病理性的凝血过程，从而减少胎盘早剥对新生儿凝血功能的影响，具有一定的临床实用意义。而脐静脉内皮细胞（Human Umbilical Vein Endothelial Cell，HUVECs）由于便利和来源丰富在疾病研究方面存在很大的优势，主要集中在为出凝血疾病、组织学工程人工血管、动脉粥样硬化等方面的研究提供很好工具。我们在原代培养脐静脉内皮细胞的基础上，建立组织因子基因干扰载体系统，利用近年来发展起来的RNAi技术，分别对胎盘早剥和正常出生的新生儿脐静脉内皮细胞的组织因子表达进行干预，将构建的组织因子干扰载体转染进入脐静脉血管内皮细胞，沉默内皮细胞组织因子表达，为进一步的基因治疗打下基础。方法1、按照试剂盒说明书，采用Elisa方法以正常分娩作为对照，测定胎盘早剥产妇血、脐血及所生新生儿血TF、TFPI，并计算出TFPI／TF的值。2、HUVECs的体外培养和鉴定：无菌剪取刚分娩的脐带约10cm，挤去脐带血管中的血液，PBS反复冲洗掉脐带外及末端血迹，再用PBS 20～40ml持续冲洗脐静脉腔，至流出的液体无色或淡洗肉水色，0.1％胶原酶Ⅱ5～10ml，灌入脐静脉，37℃孵育消化12min，收集消化液再用PBS约20ml反复冲洗脐静脉，加入胎牛血清终止消化，将收集液1000r／min×10min，常温离心，弃上清，在收集细胞沉淀中加入完全培养基，反复吹打使细胞团成为单个细胞，接种至25cm2培养瓶中，37℃，5％CO2，培养24h后观察，见较多细胞贴壁伸展生长，成梭形或三角形，换液，再加入含有表皮生长因子（Edothenial grouth factor，EGF）培养48～72小时至细胞基本长满培养瓶，应用免疫组织化学法进行Ⅷ因子相关抗原鉴定，取第2、3代细胞用于实验。3、RNA干扰TF基因表达载体的构建与鉴定：利用网站https://rnaidesigner.invitrogen.com/rnaiexpress提供的免费在线软件设计两个位点TF基因的干扰序列T12和T6，合成siRNA序列，再行寡核苷酸双链（ds oligo）的合成，退火后形成的ds oligo双链连接到BLOCK-iTTM U6 RNAi Entry Vector试剂盒中的pENTRTM／U6载体的粘性末端，连接产物转化到感受态细胞，增菌，质粒感受态扩增，质粒DNA小提、测序，根据测序结果选择正确的转化体T12，将结果中的错配T6作为阴性对照进行下一步实验。4、RNAi沉默胎盘早剥胎儿脐静脉内皮细胞组织因子基因表达的研究本实验分为两个实验组，一个为正常组，一个是病理组，每个组设立三种处理方法：①空白未干扰对照；②假干扰对照；③RNAi干扰TF基因表达实验，每种实验方法各有三个样本。分别对这3种处理方法后HUVECs在基因沉默前后的mRNA表达、TF蛋白水平免疫荧光检查的变化进行观察，以探讨其在生物学功能方面的变化。（1）转染：按1ml／孔将5×104／ml HUVECs接种到24孔板中，待细胞生长至24孔板的60％～80％，每孔加入0.5μg质粒DNA，将构建载体转染至HUVECs，37℃孵育培养48小时；（2）RT-PCR检测：将24孔板中的细胞去上清，采用两步法进行RT-PCR检测测定mRNA第一步反应条件为42℃20min→95℃5min→5℃5min；人组织因子cDNA序列（NM001993）设计一对引物，上游引物的序列为5′-CCGGCACAGCTTTAACAACCT-3′；下游引物的序列为5′-CGTTTGCTCTCGATTCCATGTG-3′。选用人β-actin基因（CF62602）作内参照，扩增β-actin基因的上游引物序列为：5′-TGGCACCACACCTTCTACAATG-3′；下游引物的序列为：5′-CCGTGGTGGTGAAGCTGTAGC-3′。PCR反应条件为：94℃5min→32×（94℃30s，50℃30s，72℃30s）→72℃5min。扩增产物在1.5％琼脂糖凝胶中电泳，Bio-rad凝胶成像系统成像，Gel-Pro Analyzer软件对上述结果进行区带灰度值扫描并分析，用所测定得到的TF和beta-actin的扩增带的密度比值表示TF的相对表达强度。（3）TF表达的免疫荧光检查：将1×1cm大小无菌盖玻片放入242孔板中，按5×104／ml密度接种HUVECs制作细胞爬片，待细胞生长至24孔板的60％～80％，按照上述步骤将构建载体转染至HUVECs，去上清，PBS浸泡，室温干燥后，多聚甲醛室温固定，兔抗人TF抗体（工作浓度为1：200），湿盒孵育，PBS清冼3次后加入FITC标记的羊抗兔二抗（工作浓度为1：400），孵育2hr，荧光显微镜下观察。结果1、PA组母亲较正常分娩母亲血浆TF测定值升高，有显着性差异，P＜0.05，PA组脐血较正常分娩脐血TF测定值升高，有显着性差异，P＜0.01，PA组胎儿脐血较PA组新生儿血及母亲血TF测定值升高，但差异没有显着性，P＞0.05；PA组母亲血浆较正常分娩母亲TFPI测定值降低，存在显着性差异，P＜0.01。PA组脐血较正常分娩脐血TFPI测定值降低，有显着性差异，P=0.01，PA病理母亲血浆TFPI值最低，PA新生儿血TFPI最高，脐血介于两者之间，PA母血与新生儿血之间差异显着，P＜0.05。PA组母亲、脐血及新生儿血TFPI／TF均较正常分娩者显着降低，P＜0.01。2、从正常对照组和胎盘早剥病理实验组胎儿的脐静脉成功地培养出HUVECs，培养24小时，细胞贴壁生长，随后在培养液中加入表皮生长因子，可以在48-72小时内得到生长旺盛的HUVECs，细胞能够在短时间不断传代，最长可以传代5代，两组细胞在形态学上没有显着差异。进行细胞形态学鉴定：早期细胞呈小多角、球形、呈团状，2～3天后细胞为扁平多角形，相互嵌合，单层呈铺路石状排列，边界清楚，胞浆丰富，核清晰，呈圆形或椭圆形，核分裂相多见，1～2核仁，内含小颗粒，3～4d后融合，7～10d胞体呈多角形，相互嵌合。应用免疫荧光方法进行Ⅷ因子相关抗原鉴定，确认为HUVECs。应用传代的第2～3代，满足实验需要。3、质粒感受态扩增后，提取得到的质粒DNA经过测序结果显示pENTRTM／U6-TF-shRNA为阳性克隆；RT-PCR结果提示pENTRTM／U6-TF-shRNA转染后的HUVECs其TF mRNA表达水平显着降低，免疫荧光检测TF蛋白明显减少。4、将测序结果正确的pENTRTM／U6-TF-shRNA分别转染到实验对象：正常组和病理组；两组细胞在转染后形态学上没有明显差异，RT-PCR结果采用Gel-Pro Analyzer软件进行区带灰度值扫描并分析，TF相对表达强度正常组和病理组组别之间TF mRNA的表达差异显着（F=23.436，P＜0.001），RNAi干扰处理后正常组和病理组TF mRNA表达的差异显着（F=33.630，P＜0.001）；正常组和病理组未干扰（干扰前）的TF mRNA表达水平的差异显着（t=0.023），正常组和病理组假干扰（阴性对照）的TF mRNA表达水平的显着差异（t=0.010），正常组和病理组干扰（实验组）的TF mRNA表达水平的没有显着差异（t=0.516）；病理组内处理间差异显着（F=19.299，P=0.002），正常组内处理间差异显着（F=27.657，P=0.001）结论1、PA产妇、脐血及新生儿血中TF较正常者升高，TFPI降低，TFPI／TF降低，PA时产妇和新生儿促凝血功能增强，抗凝血活性降低，与其高凝状态相关。2、从正常对照组和胎盘早剥实验组胎儿的脐静脉能够大量成功地培养出HUVECs，通过形态学和免疫荧光检测证实为HUVECs，为实验提供良好的研究工具。3、成功构建的pENTRTM／U6-TF-shRNA测序结果正确，并能够转染到HUVECs，发挥其生物学功能，干扰TF的表达。4、在胎盘早剥组的HUVECs中TF mRNA表达高于正常对照组，可能是胎盘早剥产妇及新生儿高凝状态的原因之一。5、pENTRTM／U6-TF-shRNA能够显着抑制正常分娩和胎盘早剥产妇胎儿脐带的HUVECs中TF的表达，可能成为未来生物学治疗的新的手段。主要创新点：1、首次在国内研究PA时TF及TFPI在母亲、脐血及新生儿血中的变化。2、应用pENTRTM／U6载体系统构建pENTRTM／U6-TF-shRNA载体，并在HUVECs中发挥生物学作用。3、利用RNAi技术沉默胎盘早剥产妇所生新生儿的HUVECs中TF基因，实现瞬时沉默，降低了TF的表达，为进一步应用TF沉默的体内试验研究进行了有益的探索。
蒙怡[9]（2007）在《胎盘免疫调节因子的制备及其对CIK细胞活性影响的研究》文中指出第一部分胎盘免疫调节因子的制备及活性检测目的制备胎盘免疫调节因子（placental immunoregulatory factor,PF）,并初步纯化PF和筛选活性最显着的活性组分。方法①PF的制备:将新鲜经检人胎盘去筋膜,生理盐水冲净、剪碎匀浆,反复冻融,用生理盐水透析,取透析外液,过虑除菌,分装,用Ea玫瑰花环法鉴定PF的活性。②PF初步纯化产物的制备:上样于用生理盐水的平衡好的Sephadex G-25凝胶层析柱,用Ea玫瑰花环法鉴定PF初步纯化产物的活性。结果与生理盐水的对照组相比,PF对Ea花环结合率有提高作用,其中以PF原液稀释至1/10和1/100时最显着,有统计学意义（p＜0.05）,经Sephadex G-25凝胶层析柱初步纯化后,得到4组分产物,各组产物与生理盐水对照组相比,Ea花环结合率皆有显着提高,而以峰4对Ea花环结合率的促进最为明显,可以上调Ea%至未脱受体水平,有统计学意义（P＜0.05）。结论本实验成功制备了胎盘免疫调节因子,并初步纯化了PF,用Ea花环结合试验从PF初步纯化产物中筛选出了活性最显着组分---峰4。第二部分胎盘免疫调节因子对CIK细胞增殖和杀伤活性的影响目的探讨胎盘免疫调节因子（placental immunoregulatory factor,PF）对细胞因子诱导的杀伤细胞（cytokine-induced killer cells,CIK）的增殖和杀伤活性影响,PF对NK敏感细胞株K562（慢性粒细胞性白血病细胞）、肝细胞LO2生长的影响。方法从健康人抽取新鲜血液,诱导成CIK细胞后,设置不同浓度PF组（实验组）和只加生理盐水的对照组（对照组）,观察淋巴细胞的增殖率和细胞毒活性变化;分别于生长有K562细胞和LO2细胞的96孔板中加入不同浓度PF,观察K562细胞和LO2的生长情况。结果①实验组与对照组比较,细胞增殖率和杀伤率都显着上调（P＜0.05）,促增殖作用于PF稀释度为1:16时最强,而对CIK细胞活性促进作用于PF稀释度为1:32时最强。②PF在一定浓度范围内对K562细胞的生长存在抑制及杀伤作用。③PF对肝细胞LO2的生长有一定抑制,但是无细胞毒。结论本实验发现,PF可以上调CIK细胞的活性和促进CIK细胞增殖,对白血病K562细胞有抑制作用,对LO2细胞生长有调节作用。第三部分胎盘免疫调节因子对CIK细胞超微结构及免疫表型的影响目的:通过电子显微镜、流式细胞仪,观察胎盘免疫调节因子（placentalimmunoregulatory factor,PF）处理的细胞因子诱导性杀伤细胞（cytokineinducedkiller cells,CIK细胞）超微结构及免疫表型变化,以及了解PF的免疫调节活性。方法:从健康人抽取新鲜血液,诱导CIK细胞产生后,设实验组和对照组,实验组中加入一定剂量的PF诱导,对照组加入等量的生理盐水,继续培养72h。制备电镜标本,观察细胞超微结构。用流式细胞术测定CIK细胞CD4+、CD8+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD25+、HLA-DR、CD3+CD56+、CD80+百分含量。结果:与对照组相比,CIK细胞超微结构变化包括:线粒体深染,溶酶体数量增加,异染色质比例增加,微绒毛肿胀及增长等。细胞表型CD4+、CD8+和CD3+CD4+细胞的百分率显着减少,CD3+CD8+、CD25+、百分含量显着增加（P＜0.05）。结论:PF能够作用于CIK细胞,促使CIK细胞超微结构及表型发生变化。第四部分SELDI-TOF-MS检测胎盘免疫调节因子对CIK细胞蛋白谱的影响目的:用表面加强激光解析电离飞行时间质谱技术（SELDI-TOF-MS）检测胎盘免疫调节因子（placental immunoregulatory factor,PF）作用后的人细胞因子诱导的杀伤细胞（cytokine-induced killer cells,CIK细胞）的蛋白组变化。方法:将健康人新鲜血液诱导成为CIK细胞后,设实验组和加生理盐水的对照组继续培养72h,用表面加强激光解析电离飞行时间质谱技术（SELD-ITOF-MS）及WCX2蛋白芯片获得CIK细胞蛋白质指纹图谱,用计算机软件进行比较分析,寻找差异蛋白。结果:对照组和实验组有6个峰有显着差异（P＜0.05）以其中4个蛋白质生物标志物（M/Z分别为5636.077,6860.359,6072.814和5984.191）差异最大。结论:PF能够引起CIK细胞蛋白组变化。SELDI-TOF-MS在CIK细胞特异性蛋白质生物标志分子的筛选等方面是个较优良的方法。
蒙怡,舒雨雁[10]（2007）在《胎盘免疫调节因子的研究进展》文中研究指明
二、抗乙肝特异胎盘因子的制备（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、抗乙肝特异胎盘因子的制备（论文提纲范文）
（1）猪胎盘粉对哺乳母猪繁殖性能、免疫指标和生殖激素以及乳成分的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 文献综述 |
| 1.1 胎盘内的活性成份及生物学功能 |
| 1.1.1 胎盘肽免疫调节功能 |
| 1.2 胎盘内激素及激素调节功能 |
| 1.2.1 绒毛膜促性腺激素 |
| 1.2.2 胎盘催乳素 |
| 1.2.3 其他激素 |
| 1.3 胎盘内生长因子及促生长功能 |
| 1.3.1 表皮生长因子 |
| 1.3.2 转化生长因子-β |
| 1.3.3 胰岛素样生长因子 |
| 1.4 胎盘内细胞因子及内分泌调节功能 |
| 1.4.1 干扰素 |
| 1.4.2 白介素 |
| 1.4.3 集落刺激因子 |
| 1.4.4 肿瘤坏死因子-α |
| 1.5 胎盘临床应用 |
| 1.5.1 治疗产科疾病 |
| 1.5.2 治疗肝炎 |
| 1.5.3 治疗其他疾病 |
| 1.6 研究目的与意义 |
| 2 猪胎盘中生物活性肽的提取及含量测定 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 试验材料 |
| 2.1.2 试验仪器 |
| 2.1.3 主要试剂 |
| 2.1.4 试验方法 |
| 2.1.5 数据分析 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 猪胎盘肽分子量检测结果 |
| 2.2.2 猪胎盘肽含量测定结果 |
| 2.2.3 猪胎盘生殖激素测定结果 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 胎盘肽的提取工艺 |
| 2.3.2 猪胎盘肽分子质量测定分析 |
| 2.3.3 猪胎盘肽含量的测定分析 |
| 2.3.4 猪胎盘中生殖激素含量测定分析 |
| 2.4 小结 |
| 3 猪胎盘粉对哺乳母猪繁殖性能及乳汁成分的影响 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 试验材料 |
| 3.1.2 试验设计及饲粮 |
| 3.1.3 饲养管理 |
| 3.1.4 测定指标与方法 |
| 3.1.5 数据处理 |
| 3.2 结果 |
| 3.2.1 猪胎盘粉对哺乳母猪繁殖性能及体况的影响 |
| 3.2.2 猪胎盘粉对哺乳母猪乳成分的影响 |
| 3.3 讨论 |
| 3.3.1 猪胎盘粉对哺乳母猪繁殖性能的影响 |
| 3.3.2 猪胎盘粉对哺乳母猪乳成分的影响 |
| 3.4 小结 |
| 4 猪胎盘粉对哺乳母猪免疫指标及生殖激素的影响 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 试验材料 |
| 4.1.2 试验设计及饲粮 |
| 4.1.3 饲养管理 |
| 4.1.4 测定指标与方法 |
| 4.1.5 数据处理 |
| 4.2 结果 |
| 4.2.1 猪胎盘粉对哺乳母猪产后第 3d血液免疫指标的影响 |
| 4.2.2 猪胎盘粉对哺乳母猪分娩后第 15d血液免疫指标的影响 |
| 4.2.3 猪胎盘粉对哺乳母猪血液生殖激素水平影响 |
| 4.3 讨论 |
| 4.4 小结 |
| 5 结论与展望 |
| 5.1 试验总体结论 |
| 5.2 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录 |
| 个人简历 |
（2）HPGFC法检测抗乙肝胎盘转移因子高分子量物质的研究（论文提纲范文）
| 1材料与方法 |
| 2结果 |
| 3讨论 |
（3）抗乙肝胎盘转移因子注射液分子量分布的研究（论文提纲范文）
| 1仪器与试药 |
| 2结果 |
| 3讨论 |
（4）山羊胎盘肽的分离和初步鉴定及营养、免疫、抗氧化作用的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 1 前言 |
| 1.1 胎盘肽的理化性质和生物学活性研究进展 |
| 1.1.1 胎盘肽的概念及其理化性质 |
| 1.1.2 免疫调节活性研究进展 |
| 1.1.3 延缓衰老的作用 |
| 1.1.4 对皮肤的保健作用 |
| 1.1.5 其他的生物功能 |
| 1.2 胎盘的临床应用 |
| 1.2.1 治疗病毒性肝炎 |
| 1.2.2 护肝作用 |
| 1.2.3 抗结核作用 |
| 1.2.4 辅助治疗恶性肿瘤 |
| 1.3 细胞免疫和抗氧化能力检测方法研究进展 |
| 1.3.1 白细胞介素-2 检测方法 |
| 1.3.2 淋巴细胞转化检测方法 |
| 1.3.3 先天性免疫细胞的检测 |
| 1.3.4 抗氧化能力的检测指标简介 |
| 1.4 本研究的目的和意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.2 主要仪器 |
| 2.3 试验方法 |
| 2.3.1 胎盘的处理 |
| 2.3.2 超滤的操作方法 |
| 2.3.3 用 Superdex-75 层析柱对粗样品进行分离提纯的操作方法 |
| 2.3.4 灌胶 |
| 2.3.5 电泳 |
| 2.3.6 氨基酸分析操作方法 |
| 2.3.7 矿物元素分析方法 |
| 2.3.8 山羊胎盘肽对小鼠免疫功能的影响 |
| 2.3.9 山羊胎盘肽对小鼠抗氧化能力的影响 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 胎盘肽的提取分离和初步鉴定 |
| 3.2 氨基酸分析结果 |
| 3.3 矿物元素测定结果 |
| 3.4 胎盘肽对小鼠免疫功能的影响 |
| 3.5 山羊胎盘肽对小鼠抗氧化能力的影响 |
| 4 讨论 |
| 4.1 山羊胎盘肽的分离提纯和初步鉴定 |
| 4.2 山羊胎盘肽的氨基酸和矿物元素分析 |
| 4.3 山羊胎盘肽对小鼠免疫作用的影响 |
| 4.4 山羊胎盘肽对小鼠抗氧化能力的影响 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 硕士期间发表的论文 |
| 硕士学位论文内容简介及自评 |
（5）甲型副伤寒STF口服制剂的制备和检定（论文提纲范文）
| 英汉缩略词对照表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 1 实验材料 |
| 2 主要实验试剂 |
| 3 主要实验仪器 |
| 4 实验方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 特异性转移因子的研究现状及临床应用进展(综述) |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附图 |
（6）奶山羊胎盘肽的分离提纯及其对小白鼠免疫功能的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 引言 |
| 1 胎盘肽生物学功能的研究进展 |
| 1.1 胎盘肽的概念及其理化性质 |
| 1.2 抗病毒性肝炎 |
| 1.3 护肝作用 |
| 1.4 抗结核作用 |
| 1.5 抗免疫抑制 |
| 1.6 抗氧化功能 |
| 1.7 辅助治疗恶性肿瘤 |
| 1.8 抗衰老作用 |
| 1.9 增强细胞免疫 |
| 1.10 增强体液免疫 |
| 2 羊胎盘肽生物学活性的研究进展 |
| 2.1 羊胎盘肽的制备流程 |
| 2.2 羊胎盘肽的理化性质 |
| 2.3 羊胎盘肽的免疫调节作用 |
| 2.4 延缓衰老的作用 |
| 2.5 对皮肤的保健作用 |
| 2.6 其他的生物功能 |
| 3 细胞免疫反应检测方法的研究进展 |
| 3.1 白细胞介素-2 检测方法 |
| 3.2 淋巴细胞转化检测方法 |
| 3.3 先天性免疫细胞的检测 |
| 4 本研究的目的和意义 |
| 试验一 奶山羊胎盘肽的分离提纯 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 胎盘肽粗提物的的制备方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 试验二 用 Tricine-SDS-PAGE 电泳法初步鉴定奶山羊胎盘肽 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 试验三 考马斯亮蓝 G - 250 法测定胎盘肽的含量 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 试验四 奶山羊胎盘肽对小鼠外周血血清白介素 2 含量的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 2 结果与分析 |
| 3 讨论 |
| 试验五 奶山羊胎盘肽对小鼠脾脏T 淋巴细胞增殖反应的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 2 结果与分析 |
| 3 讨论 |
| 试验六 奶山羊胎盘肽对小鼠脾脏 NK 细胞活性的影响 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.2.1 试验设计与处理 |
| 1.2.2 脾脏 NK 细胞的制备 |
| 1.2.3 NK 细胞杀伤活性检测,采用 MTT 检测方法 |
| 2 结果与分析 |
| 3 讨论 |
| 试验七 奶山羊胎盘肽对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 试验动物 |
| 1.1.2 试剂 |
| 1.1.3 主要仪器 |
| 1.1.4 主要试剂的配制 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.2.1 试验设计与处理 |
| 1.2.2 腹腔巨噬细胞的制备 |
| 1.2.3 腹腔巨噬细胞吞噬中性红实验 |
| 2 结果与分析 |
| 3 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
| 攻读学位期间发表的论文 |
（7）羊胎盘保健品的制备及主要功效研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文缩写一览表 |
| 文献综述 |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 1 材料 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试验动物 |
| 1.3 药品与试剂 |
| 1.4 试验仪器 |
| 1.5 其他材料 |
| 2 方法 |
| 2.1 材料的处理和溶液的配置 |
| 2.2 胎盘制品的制备 |
| 2.3 试验方法 |
| 2.3.1 毒性试验 |
| 2.3.2 免疫调节作用的影响 |
| 2.3.3 抗疲劳和延缓衰老作用的影响 |
| 3 数据处理 |
| 4 试验设计 |
| 结果与分析 |
| 1 胎盘制成品观察 |
| 2 毒性试验结果 |
| 2.1 急性毒性观察试验结果 |
| 2.2 精子致畸试验结果 |
| 2.3 三十天饲喂观察试验 |
| 3 对免疫调节作用的结果 |
| 3.1 免疫器官指数影响结果 |
| 3.2 迟发型变态反应变化结果 |
| 3.3 血清溶血素测定结果 |
| 3.4 腹腔巨噬细胞吞噬能力的变化结果 |
| 3.5 炭廓清能力的试验结果 |
| 4 对抗疲劳和延缓衰老作用影响的结果 |
| 4.1 小白鼠负重游泳及血清尿素氮含量的试验结果 |
| 4.2 小白鼠红细胞SOD活性、血清MDA含量检测结果 |
| 讨论 |
| 1 毒性试验 |
| 1.1 急性毒性观察 |
| 1.2 对精子致畸的影响 |
| 1.3 三十天饲喂试验 |
| 2 免疫功能测定 |
| 2.1 免疫器官指数测定 |
| 2.2 迟发性变态反应 |
| 2.3 对血清溶血素的影响 |
| 2.4 对腹腔巨噬细胞吞噬能力的影响 |
| 2.5 对炭廓清能力的影响 |
| 3 抗疲劳和延缓衰老作用影响 |
| 3.1 负重游泳及血清尿素氮含量 |
| 3.2 小白鼠红细胞SOD活性、血清MDA含量检测结果 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（8）组织因子基因沉默对胎盘早剥HUVECs的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一部分 胎盘早剥产妇新生儿及脐血的组织因子和组织因子途径抑制的变化 |
| 1.1 材料与方法 |
| 1.1.1 材料 |
| 1.1.2 实验方法 |
| 1.1.3 统计分析 |
| 1.2 结果 |
| 1.3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 人脐静脉内皮细胞的体外培养和鉴定 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 材料 |
| 2.1.2 实验方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 光学显微镜观察 |
| 2.2.2 人第 Ⅷ因子相关抗原免疫荧光检查 |
| 2.3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 人组织因子基因RNAi载体的构建与鉴定 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 材料 |
| 3.1.2 方法 |
| 3.2 结果 |
| 3.2.1 双链寡核苷酸(ds oligo)的合成 |
| 3.2.2 Pentrtm/u6-shRNA/TF克隆测序 |
| 3.3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第四部分 RNAi沉默胎盘早剥胎儿HUVECs组织因子基因表达的研究 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 材料 |
| 4.1.2 方法 |
| 4.1.3 统计学处理 |
| 4.2 结果 |
| 4.2.1 HUVECs的体外培养与形态学观察 |
| 4.2.2 各组 HUVECsRT-PCR结果 |
| 4.2.3 各组 HUVECs免疫荧光检查结果 |
| 4.3 讨论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 附录 |
| 缩略语 |
| 研究生期间主要科研成果 |
| 致谢 |
（9）胎盘免疫调节因子的制备及其对CIK细胞活性影响的研究（论文提纲范文）
| 缩略语 |
| 前言 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 第一部分 胎盘免疫调节因子的制备及活性检测 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 胎盘免疫调节因子对CIK细胞增殖和杀伤活性的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 胎盘免疫调节因子对cIK细胞超微结构及免疫表型的影响 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第四部分 SELDI-TOF-MS检测胎盘免疫调节因子对CIK细胞蛋白谱的影响 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 全文小结 |
| 综述:胎盘免疫调节因子的研究进展 |
| 正文 |
| 参考文献 |
| 在读期间发表的相关论文 |
| 致谢 |
（10）胎盘免疫调节因子的研究进展（论文提纲范文）
| 1 PF的制备 |
| 2 PF的理化性质 |
| 3 PF的稳定性 |
| 4 PF的安全性 |
| 5 PF的生物学活性及临床药理作用 |
| 5.1 免疫调节作用 |
| 5.1.1 E玫瑰花环实验: |
| 5.1.2 采用3H-TdR掺入法试验表明: |
| 5.1.3 给小鼠注射PF, 以SRBC |
| 5.1.4 与其他免疫调节制剂比较 |
| 5.2 对外阴营养不良的治疗作用 |
| 5.3 对慢性胃病的治疗作用 |
| 5.4 抗肿瘤及抗突变作用 |
| 5.5 对肝炎的治疗作用 |
| 5.6 抗氧化功能 |
| 6 结 语 |
四、抗乙肝特异胎盘因子的制备（论文参考文献）
- [1]猪胎盘粉对哺乳母猪繁殖性能、免疫指标和生殖激素以及乳成分的影响[D]. 张尚卫. 黑龙江八一农垦大学, 2018(08)
- [2]HPGFC法检测抗乙肝胎盘转移因子高分子量物质的研究[J]. 张浩军,冯玉康,张怡,王文鹏,修亚丽,姜国志,张明正,王正品. 中国生化药物杂志, 2015(10)
- [3]抗乙肝胎盘转移因子注射液分子量分布的研究[J]. 张浩军,赵玉欣,孙胜斌,姜国志,王正品,陈钟,张明正. 中国生化药物杂志, 2015(04)
- [4]山羊胎盘肽的分离和初步鉴定及营养、免疫、抗氧化作用的研究[D]. 王炳祥. 山东农业大学, 2011(08)
- [5]甲型副伤寒STF口服制剂的制备和检定[D]. 周建伟. 遵义医学院, 2009(S1)
- [6]奶山羊胎盘肽的分离提纯及其对小白鼠免疫功能的影响[D]. 马兴亮. 山东农业大学, 2008(02)
- [7]羊胎盘保健品的制备及主要功效研究[D]. 谷玉. 安徽农业大学, 2007(10)
- [8]组织因子基因沉默对胎盘早剥HUVECs的影响[D]. 唐雯. 南方医科大学, 2007(04)
- [9]胎盘免疫调节因子的制备及其对CIK细胞活性影响的研究[D]. 蒙怡. 广西医科大学, 2007(09)
- [10]胎盘免疫调节因子的研究进展[J]. 蒙怡,舒雨雁. 广西医学, 2007(03)