一、梨黄化病的发生原因及防治方法试验报告(论文文献综述)
张般般[1](2018)在《天津微酸性土壤中不同品种蓝莓植株的黄化特性及机制》文中研究指明蓝莓因其风味独特、营养丰富、具有花青素苷等多种生理活性成分,经济效益好等,而深受农户与消费者的喜爱。随着蓝莓的市场需求量日益增大,蓝莓在各地区的的引种栽培也随之增多,并出现了一些问题。天津市蓟州区目前设施栽培蓝莓4000亩。由于是微酸性土壤栽培,蓝莓植株出现了普遍的失绿黄化现象,严重影响了蓝莓的生长发育、产量和品质。因此,探索蓝莓在微酸性土壤中的黄化特性,了解其黄化机制以解决生产实践现存的问题,势在必行。本研究以在天津蓟县温室中主栽的6个蓝莓品种为研究对象,对其不同品种4个物候期(盛花期、幼果发育期、果实成熟期、果实采收期)的植株黄化规律,调查了黄化指数、叶绿素含量、FCR活性、有效铁含量的变化规律;比较了微酸性土壤中不同品种植株的生长和产量与植株黄化之间的关系;对黄化程度较严重的2个品种(蓝丰、蓝金)进行了不同黄化等级下的果实内外品质研究。通过三年生蓝莓植株(蓝丰、北陆、奥尼尔和莱格西)无土栽培盆栽试验,比较了不同p H下,黄化指数的变化规律,根系FCR活性有效铁含量、根际活力和根干重等指标的变化,探究了土壤酸碱性对对蓝莓黄化和根系生长生理的影响。结果显示:(1)6个蓝莓品种各个物候期的黄化指数变化规律有相同的趋势,均表现为幼果发育期最低,果实成熟期最高。盛花期叶片的黄化主要表现在幼叶上,黄化指数为9.43%21.94%;幼果发育期叶片出现复绿现象,黄化指数下降到2.76%12.24%;果实成熟期黄化指数上升至8.71%25.59%;果实采收后,植株黄化现象没有得到改善,个别品种黄化程度继续提高,该时期黄化指数为4.64%31.02%。(2)叶片中,叶绿素含量、FCR活性、有效铁含量均随着黄化程度的升高而降低,即叶片黄化越严重的,叶绿素含量越低,铁还原酶活性越低,叶片有效铁含量越低。表明该地蓝莓的叶片黄化是叶片有效铁含量低导致的叶绿素含量低所致。而有效铁含量低是因为叶片的铁还原酶活性低。(3)6个品种黄化程度(平均黄化指数)由高到低依次为蓝金、伯克利、蓝丰、布里吉塔、莱格西、北陆,铁还原酶活性由大到小依次为北陆、莱格西、布里吉塔、蓝丰、伯克利、蓝金。说明品种北陆最抗缺铁性黄化。(4)天津微酸性土壤中不同蓝莓品种的新梢数、新梢生长量和叶面积等生长差异显着。3项生长指标计算得的平均隶属函数值(综合生长特性)最高的是蓝金为0.781,其次是伯克利0.687,最低的是莱格西为0.001。说明在该土壤中蓝金和伯克利均生长较旺,莱克西生长较弱。3个品种的综合生长特性和黄化指数的相关系数为0.2377。表明生长势与植株黄化程度无关。(5)天津微酸性土壤中6个蓝莓品种的平均黄化指数与单株产量呈极显着负相关性,相关系数为-0.8648,说明产量直接影响到蓝莓植株的黄化,产量越高,黄化越严重。(6)天津微酸性土壤中不同黄化等级蓝莓品种果实色度、硬度、单果重、可溶性糖含量、酸度、维生素C和花青素含量等差异显着。隶属函数综合分析显示,品质最好的是一级黄化等级的蓝金果实。品质各项指标与黄化指数相关性较好的有色度、硬度、可滴定酸、花青素。说明植株黄化主要影响到了果实着色变差(黄化植株果实呈黄绿色,颜色发白)、硬度降低、可溶性固形物减少、含糖量降低、酸度提高、维生素C和花青素含量均显着降低。当黄化程度为三级时,果品品质发生显着变化。(7)随着基质中pH的升高(4.5-7.5),蓝莓植株的黄化程度显着提升。其中,4个蓝莓品种黄化指数平均值最高的是奥尼尔,其余依次是蓝丰、莱格西、北陆。说明北陆最抗黄化。(8)基质栽培4个pH梯度中,pH为6.5-pH7.5时的蓝莓植株黄化指数上升最快,其根部FCR活性、有效铁含量、根系活力、根系干重均迅速下降。说明微酸性基质是导致蓝莓黄化的根本原因。其机制是微碱性使根系活力降低,根系的铁还原酶活性降低,致使根系的有效铁吸收或根系将三价铁还原为二价铁——有效铁的数量减少,最终导致根系生长量降低(干重降低),植株严重黄化。(9)总之,影响蓝莓植株黄化的关键因素是土壤酸碱性。天津蓝莓基地植株黄化是因为微酸性土壤(pH6.5)中根系活力降低,根系中铁还原酶活性低而导致的植株叶片有效铁含量低所致。6个蓝莓品种中北陆最抗黄化。植株长势与黄化无关,产量使黄化加重。黄化会使蓝莓颜色变淡、营养成分降低。
封士达[2](2017)在《梨苦痘病、水心病发生特点和防治方法探讨》文中认为本试验以砂梨品种’秋荣’(Pyrus pyrifolia Nakai cv.Akiba)和’爱甘水’(Pyrus pyrifoloa Nakai cv.Aikansui)为试材,探讨了结果枝组年龄、花芽类型、果重与果实苦痘病、水心病发病率的关系;分析了生长期花、叶片、果实、须根内钙元素和硼元素含量变化,以及果实贮藏温度和时间对果实苦痘病和水心病发生的影响。主要研究结果如下:1.苦痘病和水心病的发生与砂梨品种有关;2.一年生结果枝组和腋花芽果实苦痘病、水心病发病率显着低于二年生及以上结果枝组和短果枝花芽的发病率;3.秋荣梨果实苦痘病和水心病发病率和发病指数均与果重呈线性相关;4.供试品种果实内钙元素含量的升高与苦痘病的发生有密切关联,硼元素含量的升高会抑制水心病的发生;5.秋荣梨果实蔗糖和山梨糖醇含量的升高与水心病的发生密切相关,果糖含量的降低与苦痘病的发生有紧密联系;6.秋荣梨果实在5℃、10℃下贮藏时,苦痘病发病率不会随着贮藏时间而升高,发病指数则会随着贮藏温度和时间的增加而升高;7.在贮藏期间秋荣梨果实水心病发病率和发病指数随着贮藏温度和时间的增加而升高,采收后将果实置于5℃温度贮藏可以抑制水心病的发生;8.根外追施硼酸或土施硼砂能降低秋荣梨果实水心病的发生;
张斌[3](2016)在《干旱胁迫下银杏叶片黄化病的发生及生理变化规律研究》文中进行了进一步梳理银杏是城市重要行道树种之一。近年来,由于街路地表过度硬化覆盖导致绿地土壤经常处于干旱缺水状态,影响银杏的生长发育:沈阳市内多条道路银杏出现不同程度的黄化病病症,严重时甚至整株死亡。本文以3年生银杏幼苗为试材,通过轻、中、重度3种连续干旱梯度处理的盆栽控水试验,对水分生理、光合生理、逆境生理进行测定,分析干旱胁迫条件下银杏叶片黄化病的发生规律以及生理变化规律,为街路银杏叶片黄化病的防治提供理论支持。主要研究结论如下:(1)土壤干旱会导致银杏叶片黄化病的发生。干旱胁迫导致银杏叶片黄化病发生率高达83.33%,其中土壤含水量降至田间持水量的65%发病最轻为1级程度病症,以田间持水量的10%发病最重,达到4级程度病症,树势弱。所有处理均未达到整株死亡的表现状况。(2)银杏受干早胁迫后,首先表现在生理上的变化,最终导致植株表观变化。对照处理叶片相对含水量维持在84.4%-86.97%,胁迫程度越深,叶片相对含水量越低,土壤含水量在田间持水量的65%时,叶片相对含水量降至80.50%,而土壤含水量在田间持水量的10%时,叶片相对含水量降至58.28%,降幅达到22.18%。干旱胁迫条件下,银杏叶片光合参数变化明显,光饱和点下降,瞬时光合速率蒸腾速率、气孔导度均随时间的变化呈显着地下降趋势,胞间CO2浓度随时间的变化先上升,在第3次测定后开始缓慢下降,最终依然高于初始值。而对照处理光合参数变化稳定,在小范围内轻微地浮动。随着时间的延长,最大光化学效率与最大荧光值的变化规律一致,逐渐下降,且随着胁迫程度的加深,下降幅度增大;初始荧光则随着时间的延长逐渐上升,且上升幅度随着干旱胁迫程度加深而增大。银杏叶片脯氨酸含量与丙二醛含量随着时间的延续呈倍数增加的变化规律,且增加幅度与胁迫程度成正比,即胁迫越大增加幅度越大;脯氨酸含量增加了3-5倍,丙二醛含量增加了1-1.5倍。SOD活性与可溶性糖含量随着时间的延长先上升后下降,最终各干旱处理SOD活性下降了31.72%-46.69%:可溶性糖含量在上升近1倍之后开始下降。干旱胁迫条件下银杏叶片黄化病对株高生长的影响最大,同时抑制了生物量的累积,最终4级程度症状银杏与正常植株相比地径增量、株高增量、生物量分别减少了50.31%、80.00%、53.66%。长期的2级程度黄化病严重影响银杏生物量的积累,而长期的3级、4级程度黄化病则严重限制其获取能量的能力。(3)银杏对土壤水分较为敏感,干早胁迫诱发了银杏叶片黄化病的发生,抑制了植株的生长,土壤含水量应维持在田间持水量的65%-80%,银杏长势正常,叶片无任何异常现象,保持良好的景观效果,建议及时灌溉。
卢永灿[4](2016)在《三种梨病毒实时荧光定量RT-PCR和RT-LAMP检测技术的研究》文中研究说明苹果茎沟病毒(Apple stem grooving virus)、苹果茎痘病毒(Apple stem pitting virus, ASPV)和苹果褪绿叶斑病毒(Apple cholortotic leaf spot virus, ACLSV)是侵染梨树的三种主要病毒,单一病毒侵染栽培梨时,通常不表现出明显的症状,而两种或三种病毒复合侵染时,有的梨树叶片表现出褪绿斑、脉黄、畸形及卷曲等明显症状。目前,培育和栽培无病毒苗木是防治果树病毒病的有效措施,因此,果树病毒病的检测和诊断具有非常重要的作用。建立灵敏、快速和高通量的病毒检测可为无病毒种苗的繁育提供技术。本研究建立了检测3种梨病毒ASGV、ASPV和ACLSV的实时荧光定量RT-PCR (Reverse transcriptional real time fluorescent quantitative, qRT-PCR)技术及ASPV和ACLSV的环介导等温扩增(Reverse transcription loop-mediated isothermal amplification, RT-LAMP)技术,研究结果如下:1、本研究依据ASGV、ASPV和ACLSV的印基因序列,分别设计了6对、9对和9对用于这3种梨病毒的qRT-PCR检测引物,从中筛选出检测效果稳定的3对引物:ASGV-F6/R6、ASPV-F8/R8和ACLSV-f5/r5。分别以含有3种病毒的印基因的质粒为模板,通过设置不同梯度,发现引物用量和退火温度对qRT-PCR的影响较大。确定最佳引物浓度均为0.15pmol/μl,退火温度均为58℃。采用qRT-PCR引物,检测ASGV、ASPV和ACLSV的灵敏度分别是RT-PCR的103倍、103倍和102倍,可检测梨离体植株中3种病毒的最低cDNA浓度均为4×110-3ng/μl。2、采用建立的qRT-PCR技术对22株梨离体植株和40株田间梨叶片进行病毒检测。结果显示,梨离体植株ASGV、ASPV和ACLSV的阳性率为68.2%、50.0%和4.5%,ASGV和ASPV的检出率均比RT-PCR高9.1%,ACLSV的检出率相当;田间梨样品ASGV、ASPV和ACLSV的阳性率为35.0%、7.5%和5.0%,ASPV和ACLSV检出率均高2.5%,ASGV的检出率一致。3、设计了5组和6组用于检测ASPV和ACLSV的LAMP引物,以阳性梨离体叶片为材料,从中筛选出2种病毒检测效果稳定的引物,即检测ACLSV的引物为ACLSV-6-F3/R3和ACLSV-6-FIP/BIP,检测ASPV的引物为ASPV-5-F3/B3和ASPV-5-FIB/BIP。分析了dNTP、Mg2+、甜菜碱的浓度和外引物与内引物浓度比及反应时间和温度检测效果的影响,建立了检测ASPV和ACLSV的LAMP扩增体系。这2种病毒的灵敏度均是RT-PCR技术的104倍,可从梨离体植株的最低总RNA浓度为10-4 ng/μl和10-3ng/μl中检测到ACLSV和ASPV。对扩增产物分别采用SYBR Green I染料直接观察法和琼脂糖凝胶电泳分析,结果显示,反应前加入染料可直接观察产物,其灵敏度比琼脂糖凝胶电泳法高出10倍。4.采用已建立的2种病毒的RT-LAMP技术,随机选取20个梨组培苗和22株田间梨样品,检测到梨离体植株ASPV和ACLSV的阳性率为45.0%和15.0%,ACLSV的检测率一致,而ASPV的检出率比RT-PCR技术高5.0%;田间梨样品ASPV和ACLSV的检出率为40.9%和36.4%,ASPV和ACLSV的检出率比RT-PCR技术分别高4.5%和4.6%。
赵越,吴玉霞,何天明[5](2016)在《基于质外体pH和铁素分析的‘库尔勒香梨’黄化症诊断研究》文中研究指明【目的】因缺铁而引起的叶片失绿黄化是新疆塔里木盆地钙质土壤栽培的‘库尔勒香梨’一种严重的生理性病害。通过分析‘库尔勒香梨’叶片黄化与木质部汁液p H值以及铁素含量的相关关系,探索基于质外体p H和铁素分析进行‘库尔勒香梨’黄化症早期诊断的可行性。【方法】通过微电极测定了‘库尔勒香梨’木质部质外体汁液的p H值,并分析了不同部位木质部汁液和叶片中总铁和有效铁含量。【结果】‘库尔勒香梨’各器官木质部质外体汁液的p H值在生长季大多保持在5.06.0,属正常生理范围。正常树的木质部汁液p H值略高于黄化树(5.6%),但与铁失活关联度不大。同一采样部位总铁的浓度在黄化树和正常树之间无显着差异。整个年生长季,正常树各器官的有效铁含量均极显着高于黄化树。【结论】叶片质外体p H值为叶面铁肥配制和黄化症诊断提供了重要参数,而‘库尔勒香梨’其他器官质外体p H值对黄化症诊断无直接参考价值。在‘库尔勒香梨’黄化病营养诊断时,总铁含量不能准确表征‘库尔勒香梨’植株叶片的铁营养水平,采用叶片有效铁含量作为量度指标更为可靠。
何香[6](2012)在《不同施肥处理对库尔勒香梨树体营养积累与抗寒性的影响》文中进行了进一步梳理库尔勒香梨原产于我国新疆的库尔勒地区,是当地特色的经济产业。近年来由于生产管理不当以及受到多次冻害的影响,对库尔勒香梨生产造成严重损失。库尔勒香梨发生不同程度的冻害和树体营养有关。因此,研究香梨的树体营养与抗寒性的关系,可为香梨抗寒栽培提供借鉴。为掌握不同处理对库尔勒香梨树体营养积累与抗寒性的影响,本实验以10年和20年香梨树为试验材料,采用施入不同量的基肥和喷施不同N、P、K、B配比的叶面肥的方法。测定不同处理叶片中的矿质营养成分;对休眠期不同处理枝条做低温胁迫试验,测定其抗寒指标。从而探讨出不同处理对库尔勒香梨营养变化及与抗寒能力的关系。研究结果如下:1.叶片中各矿质营养元素年周期变化:N、P、K含量整体随着叶龄的增加而降低,N含量在7月出现最高峰值;Ca含量在营养生长初期积累迅速,中后期保持平稳状态;Mg含量在6月出现最低值,后期积累平缓;Zn、Fe含量在整个生长期变化波动较大。2.研究发现处理PK1、N2、B2施肥效果整体较好。PK1处理的P、K、Ca、Mg元素含量均较高;N2处理的N、Ca、Zn、Fe元素含量均较高;B2处理的Ca、Mg、Zn、Fe元素含量均较高。3.各营养元素年变化累积含量基肥高于叶面肥处理,但叶面肥处理在果实生长前期各营养元素含量较基肥处理高且变化差异明显。4.叶片中营养元素含量在不同树龄之间整体差异不明显;高浓度叶面肥处理效果整体优于低浓度叶肥处理。5.根据相关性分析表明,叶片中不同矿质营养元素间的吸收和积累存在明显的相互影响关系。其中N、P、K与Fe之间,N与P、Mg之间存在明显拮抗关系;Ca、Mg与Zn、Fe之间存在协同关系。6.抗寒性研究表明,N2、PK2处理的树体抗寒效果较好。7.不同基肥处理枝条在低温胁迫下的抗寒顺序为:Jc>Jb>Ja。
黎秀丽[7](2010)在《库尔勒香梨缺铁失绿症的因子分析及其叶片诊断》文中研究说明库尔勒香梨(以下简称香梨)是新疆优良的地方梨品种。近年来,当地钙质土壤发生的叶片缺铁性黄化症已严重影响到这一特色优势资源的产业化发展。本课题在充分借鉴前人三十年对香梨黄化病研究成果的基础上,研究了影响香梨树黄化病发生的主要土壤因素、发病叶片的生理特性及解剖结构,探讨了香梨黄化病发生的形成机理,并提出了香梨在当地土壤条件下发生黄化病的叶片诊断方法与指标。主要取得了如下研究结果:1.果园调查表明黄化病在库尔勒香梨产区的发生具有普遍性,其中沙依东园艺场和英下乡是香梨黄化病的重灾区。2.植株发生黄化后,叶肉栅栏组织和海绵组织明显变薄,叶绿体含量减少,叶绿素含量的峰值只有正常株30.1%。黄化症状贯穿于整个生长季节,其中6-7月表现尤甚。3.对香梨黄化树滴注“光泰”营养液对梨园整体复绿效果显着,喷施硫酸亚铁改善果实效果明显。4.叶片活性铁含量可作为香梨缺铁失绿症的叶片诊断的首选指标,以单位叶面积为底数表征叶片全铁含量和有效铁含量更为熨切。库尔勒地区香梨缺铁黄化病的叶片诊断指标:全铁指标为400mg·kgI或300μg·dm-2,有效铁为150mg·kg-1或100μg·dm-2。用干灰消煮提取,邻菲罗啉显色,分光光度计比色测定法作为叶片全铁测定方法是最为理想的。总叶绿素的含量和活性铁的含量呈极显着的线性正相关关系,总叶绿素的含量可于作为香梨黄化病诊断的辅助手段。5.库尔勒地区土壤中较高的pH值(8.5以上)是香梨缺铁黄化症的产生的直接或间接原因。轻盐渍化土壤是诱发黄化病发生的潜在因子。当地土壤有效铁亏缺具有普遍性,犁园上层土壤有效铁含量低可能是香梨缺铁黄化症产生的最根本和最重要的原因。上述研究结果为进一步完善香梨黄化病发生机制奠定了理论基础,为下游研究中优化香梨缺铁性黄化病矫治措施提供了技术支撑。
付余波[8](2010)在《我国四省区梨主要病害的病原鉴定、分子检测与药剂筛选研究》文中研究说明梨病害是限制我国梨产业健康发展的重要因子之一。当前,我国梨主要病害尚未得到根本性地控制,新的病害又不断出现,一些次要病害也有可能上升为主要病害。而在防治过程中,普遍存在轻防重治思想。生长季节前期对病害的病原认识不明,错过了防治的最佳时期。同时,大量常规化学药剂的使用,使许多病原菌产生了抗药性。因此明确我国梨主产区病害种类、建立梨病害快速诊断技术以及筛选新型、高效、低毒的杀菌剂对我国梨产业的健康发展具有重要的意义。为了明确我国梨产区梨病害的种类,2007年和2008年对我国江苏省、安徽省、陕西省、新疆维吾尔自治区4个省区10个县市的梨树主要病害种类进行了调查。调查结果绘制成梨病害分布图,已上传至本实验室主办的梨树病害防控网(网站域名:http://lsbh.njau.edu.cn/)。调查发现:江苏省梨轮纹病为害最为严重,安徽省梨炭疽病已上升为第一病害,陕西省和新疆维吾尔自治区梨腐烂病尤为突出。此外,4个省区梨黑斑病均有发生且危害也较为严重,陕西省蒲城县部分梨园突现梨白粉病,60%以上叶片感染此病。本研究分离了梨轮纹病、梨炭疽病、梨黑斑病、梨腐烂病、梨白粉病的病原菌,并采用形态学及分子生物学相结合的方法对其进行了鉴定。结果表明,梨轮纹病、梨炭疽病、梨腐烂病、梨黑斑病和梨白粉病的病原菌分别为:贝伦格氏葡萄座腔菌(Botryosphaeria berengeriana)、胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)、梨黑腐皮壳菌(Valsa ambiens)、链格孢菌(Alternaria alternata)、梨球针壳菌(Phyllactinia pyri)。根据GenBank中葡萄座腔菌属不同种的内转录间隔区(ITS)序列差异,设计了特异性引物Bb1/Bb2检测梨轮纹病菌(Botryosphaeria berengeriana)。引用报道的两对引物E1/E2、AAF2/AAR3分别检测梨炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides)和梨黑斑病菌(Alternaria alternata)。进一步利用此3对引物分别建立了快速检测及诊断梨轮纹病、梨炭疽病、梨黑斑病技术,为生产上提供技术服务。试验结果表明,在供试的24种不同病原真菌中引物Bb1/Bb2、E1/E2、AAF2/AAR3分别只能从B.berengeriana、C. gloeosporioides、A. alternata基因组DNA中扩增到一条分子量326bp、329bp、340bp的特异性条带,这三对引物的检测灵敏度分别为1pg、lpg和10pg。以真菌通用引物ITS1/ITS4结合梨轮纹病菌特异性引物Bb1/Bb2进行巢式PCR扩增,可以使引物Bb1/Bb2检测灵敏度至少提高105倍,应用此方法直接对梨组织进行检测,亦可以检测到潜伏侵染的梨轮纹病菌。而用引物E1/E2和AAF2/AAR3对感染了梨炭疽病菌和梨黑斑病菌的梨组织进行常规PCR检测,可以快速稳定地检测到病原菌。在实验室内,采用生长速率法进行了21种杀菌剂对梨炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides)、轮纹病菌(Botryosphaeria berengeriana),黑斑病菌(Alternaria alternata)有效药剂的筛选并测定其毒力。通过EC50值分析结果表明,50%咪鲜胺可湿性粉剂对梨炭疽病菌、梨轮纹病菌均表现为最高毒力,其EC5o值分别是0.1195mg/L、0.0426 mg/L;50%异菌脲悬浮剂对梨黑斑病菌毒力最高,其ECso值为0.6964 mg/L;对梨炭疽病菌、梨轮纹病菌、梨黑斑病菌都具有较高毒力的杀菌剂是:50%咪鲜胺可湿性粉剂、25%咪鲜胺乳油、40%氟硅唑乳油、25%嘧菌酯悬浮剂、10%苯醚甲环唑(商品名:胜世)水分散粒剂、10%苯醚甲环唑(商品名:世高)水分散粒剂、50%异菌脲悬浮剂。本实验为田间选择合适药剂防治梨炭疽病、轮纹病、黑斑病提供参考依据。
龙春跃,克热木·伊力,买合木提·卡热,温且木[9](2009)在《库尔勒香梨枝条、花芽冻害发生程度与相关生理指标研究》文中研究指明2008年1月下旬库尔勒地区的梨树遭受不同程度的冻害,以了解受不同程度冻害的香梨枝条、花芽相关生理指标为目的,以不同冻害程度的枝条、花芽为试验材料,测定其部分生理及营养元素指标,并对不同程度冻害与各指标的关系进行研究。结果表明,随着冻害程度的不断加深,枝条和花芽的游离脯氨酸、可溶性糖含量不断降低,并且差异显着,POD活性、MDA含量变化不具有一致性,因此,游离脯氨酸、可溶性糖含量可作为库尔勒香梨树的主要抗冻生理指标。随着冻害程度的不断加深,枝条和花芽的N,K,Mg含量不断降低,并且差异显着,Ca含量变化不具有一致性,P含量差异不明显,因此,N,K,Mg含量可作为库尔勒香梨树的主要抗冻营养元素指标。
范锦[10](2007)在《砂梨上苹果茎痘病毒的分离鉴定及其cp基因遗传转化烟草研究》文中认为梨在世界果品产业中占有重要的经济地位。苹果茎痘病毒(Apple stem pittingvirus,ASPV)在我国发生普遍,该病毒危害可导致梨的产量明显下降和品质降低。对ASPV的防治措施主要是栽培无病毒苗木和选育抗病毒品种。近年来利用基因工程技术导入病毒外壳蛋白(cp)基因,培育抗病毒新品种的策略,为该病害的防治开辟了新的途径。本研究采用生物学和分子生物学方法,对我国砂梨(Pyrus pyrifolia)上发生的ASPV进行了分离鉴定;构建了ASPV cp基因的植物表达载体,利用根癌农杆菌EHA105介导的叶盘法进行了转化烟草研究,在国内首次得到了转化ASPV cp基因的西方烟(Nicotiana occidentalis)植株,为进一步利用此策略进行抗病毒育种研究奠定了技术基础。取得的主要研究结果如下:(1)砂梨上ASPV的鉴定和分离。以采集的52份砂梨样品(采自湖北省农科院果树桑蚕研究所国家砂梨种质资源圃)为材料,采用试管捕捉反转录-聚合酶链式反应(TC-RT-PCR)方法对ASPV进行检测,其中33份样品能扩增出316 bp的目标条带,样品带毒率为63.5%。取其中19份感染ASPV的砂梨样品和10份本实验室温室保存的带毒砂梨样品,采用汁液摩擦接种的方法,接种ASPV草本指示植物西方烟。从果茶所采集的19份阳性样品中有9份在西方烟上表现症状,实验室保存的10份带病毒样品在指示植物上全部表现出症状,且均采用TC-RT-PCR方法进行了验证。上述19份感染ASPV的砂梨样品,在西方烟上的症状表现主要有:接种叶片上出现白色坏死斑点;接种叶片上产生黑色斑点,并沿叶脉坏死;接种叶片出现褪绿斑;叶脉黄化等。此外,有少数带病毒样品接种西方烟后不表现明显症状。(2)ASPV cp基因植物表达载体的构建及转化烟草研究。对来源于ASPV分离物6-1-13的cp基因进行克隆与序列测定,将完整的ASPV cp基因克隆到植物表达载体pCAMBIA1301,转化大肠杆菌DH10B感受态细胞,经过PCR和双酶切筛选阳性克隆,成功构建了ASPV cp基因植物表达载体。将重组质粒转化根癌农杆菌EHA105感受态细胞,运用叶盘法转化5-6叶期的健康西方烟叶片。通过对转化烟草的遗传转化体系的优化,筛选出了适宜的潮霉素浓度、根癌农杆菌菌液浓度及合适的浸染时间。提取分化西方烟植株的总DNA,利用ASPV cp基因的特异引物进行PCR鉴定,结果表明有88株西方烟植株能成功扩增出目标片段,其中转ASPV cp基因正义链的烟草植株68株,转cp基因反义链的烟草植株20株,表明ASPV cp基因已成功导入烟草植株。
二、梨黄化病的发生原因及防治方法试验报告(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、梨黄化病的发生原因及防治方法试验报告(论文提纲范文)
(1)天津微酸性土壤中不同品种蓝莓植株的黄化特性及机制(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
第一章 引言 |
1.1 蓝莓概述 |
1.2 蓝莓的生物学特性和生长习性 |
1.2.1 蓝莓形态学特性 |
1.2.2 蓝莓的物候期、生长发育特性 |
1.2.3 蓝莓的生态习性 |
1.3 蓝莓品种 |
1.3.1 蓝莓品种类群和特征 |
1.3.2 优良蓝莓品种 |
1.3.3 蓝莓品种筛选研究现状 |
1.4 果树黄化和缺铁黄化研究现状 |
1.4.1 果树黄化研究现状 |
1.4.2 果树缺铁黄化研究现状 |
1.4.3 蓝莓黄化研究进展 |
1.5 本研究的目的意义 |
第二章 材料和方法 |
2.1 田间试验 |
2.1.1 供试品种 |
2.1.2 试验地 |
2.2 盆栽试验 |
2.3 采样和指标测定 |
2.3.1 蓝莓植株在天津微酸性土壤条件下黄化变化规律指标分析 |
2.3.2 蓝莓植株在天津微酸性土壤条件下的生长指标分析 |
2.3.3 蓝莓植株在天津非酸性土壤条件下的产量分析 |
2.3.4 蓝莓果实在天津微酸性土壤条件下的外在品质分析 |
2.3.5 蓝莓果实在天津微酸性土壤条件下的内在品质分析 |
2.3.6 蓝莓根系对铁元素的吸收生长生理指标分析 |
2.3.7 主要试剂和使用仪器 |
2.4 统计分析 |
第三章 结果与分析 |
3.1 天津微酸性土壤中不同品种蓝莓的黄化变化规律 |
3.1.1 不同蓝莓品种植株黄化指数的变化规律 |
3.1.2 不同蓝莓品种叶片叶绿素含量的变化规律 |
3.1.3 不同蓝莓品种叶片FCR铁还原酶活性的变化规律 |
3.1.4 不同蓝莓品种叶片有效铁含量的变化规律 |
3.2 天津微酸性土壤中不同蓝莓品种的生长特性与黄化之间的关系 |
3.2.1 天津非酸性土壤中不同蓝莓品种平均新稍数的比较 |
3.2.2 天津非酸性土壤中不同蓝莓品种新稍生长量的比较 |
3.2.3 天津非酸性土壤中不同蓝莓品种叶面积的比较 |
3.3 天津微酸性土壤中不同蓝莓品种的产量与黄化之间的关系 |
3.4 天津微酸性土壤中不同蓝莓品种的果实品质与黄化之间的关系 |
3.4.1 天津微酸性土壤中蓝莓植株黄化果实外观品质特性分析 |
3.4.2 天津微酸性土壤中蓝莓植株黄化果实内在品质特性分析 |
3.5 蓝莓植株黄化的机制 |
3.5.1 蓝莓植株黄化指数与基质pH的关系 |
3.5.2 基质不同pH对不同蓝莓品种根系FCR活性的影响 |
3.5.3 不同基质pH对不同蓝莓品种根系有效铁的影响 |
3.5.4 不同基质pH对不同蓝莓品种根际活力的影响 |
3.5.5 不同基质pH对不同蓝莓品种根干重的影响 |
第四章 讨论与结论 |
4.1 讨论 |
4.1.1 天津微酸性土壤中不同品种蓝莓黄化变化规律 |
4.1.2 蓝莓生长与黄化之间的关系 |
4.1.3 蓝莓产量与黄化之间的关系 |
4.1.4 蓝莓品质与黄化之间的关系 |
4.1.5 土壤pH值与蓝莓黄化间的关系 |
4.2 结论 |
参考文献 |
致谢 |
攻读硕士学位期间发表的论文 |
(2)梨苦痘病、水心病发生特点和防治方法探讨(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
第一章 文献综述 |
1.1 前言 |
1.2 果树生理病害的发生现状和研究进展 |
1.2.1 水心病 |
1.2.2 苦痘病 |
1.2.3 裂果病 |
1.2.4 黄化病 |
1.2.5 其他果实生理病害 |
1.3 本试验的目的和意义 |
第二章 梨水心病、苦痘病发病特点 |
2.1 材料与方法 |
2.1.1 供试材料 |
2.1.2 试验方法 |
2.1.3 果实病害分级 |
2.2 结果与分析 |
2.2.1 不同品种和不同树龄果实苦痘病和水心病发病率比较 |
2.2.2 结果枝组年龄与果实发病率和发病指数的关系 |
2.2.3 花芽类型与梨果实发病率和发病指数的关系 |
2.2.4 果重与梨果实发病率和发病指数的关系 |
2.3 小结与讨论 |
2.3.1 讨论 |
2.3.2 小结 |
第三章 施肥对秋荣梨果实苦痘病和水心病发病率的影响 |
3.1 材料与方法 |
3.1.1 供试材料 |
3.1.2 试验设计 |
3.1.3 采样方法 |
3.1.4 样品分析 |
3.2 结果与分析 |
3.2.1 根外追施钙肥对叶片、果实钙元素含量以及发病率的影响 |
3.2.2 根外追施和土施硼肥对叶片、果实硼元素含量以及发病率的影响 |
3.3 小结与讨论 |
3.4.1 讨论 |
3.4.2 小结 |
第四章 苦痘病、水心病发病率与不同器官组织内钙、硼元素含量变化的关系 |
4.1 材料与方法 |
4.1.1 供试材料 |
4.1.2 试验方法 |
4.1.3 样品分析 |
4.2 绪果与分析 |
4.2.1 花瓣内钙、硼元素含量分析 |
4.2.2 生长期叶片内钙、硼元素含量的变化 |
4.2.3 生长期果实内钙、硼元素含量的变化 |
4.2.4 生长期须根内钙、硼元素含量的变化 |
4.3 小结与讨论 |
4.3.1 讨论 |
4.3.2 小结 |
第五章 梨果肉糖组分含量对果实两种生理病害的影响 |
5.1 材料与方法 |
5.1.1 供试材料 |
5.1.2 试验方法 |
5.1.5 采样方法 |
5.2 结果与分析 |
5.2.1 不同采收期秋荣梨果实苦痘病和水心病发病率的变化 |
5.2.2 不同采收期秋荣梨果实糖组分变化 |
5.3 小结与讨论 |
5.3.1 讨论 |
5.3.2 小结 |
第六章 贮藏温度和时间对果实两种生理病害发生的影响 |
6.1 材料与方法 |
6.1.1 供试材料 |
6.1.2 试验方法 |
6.1.3 样品分析 |
6.2 结果与分析 |
6.2.1 贮藏温度和时间对秋荣梨果实苦痘病发病情况的影响 |
6.2.2 贮藏温度和时间对秋荣梨果实水心病发病情况的影响 |
6.3 小结与讨论 |
6.3.1 讨论 |
6.3.2 小结 |
第七章 结论 |
创新点 |
参考文献 |
致谢 |
(3)干旱胁迫下银杏叶片黄化病的发生及生理变化规律研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
第一章 文献综述 |
1.1 植物对干旱胁迫响应的研究进展 |
1.1.1 干旱胁迫与植物水分代谢 |
1.1.2 干旱胁迫与植物光合性状 |
1.1.3 干旱胁迫与植物生理变化 |
1.1.4 干旱胁迫与植物形态结构 |
1.2 银杏对干旱胁迫响应及叶片黄化病的的研究进展 |
1.3 研究目的和意义 |
第二章 材料与方法 |
2.1 试验材料 |
2.2 试验设计 |
2.3 试验方法 |
2.3.1 叶片相对含水量的测定 |
2.3.2 光合参数指标的测定 |
2.3.3 叶绿素荧光参数指标的测定 |
2.3.4 逆境生理指标的测定 |
2.3.5 生长指标的测定 |
2.4 数据处理 |
第三章 结果与分析 |
3.1 银杏叶片黄化病症状发生规律分析 |
3.1.1 银杏叶片黄化病病情变化分析 |
3.1.2 银杏叶片黄化病病情级别划分 |
3.2 银杏叶片黄化病症状发生前生理变化规律分析 |
3.2.1 银杏叶片相对含水量变化规律分析 |
3.2.2 银杏叶片光合参数变化规律分析 |
3.2.3 银杏叶片绿素荧光参数变化规律分析 |
3.2.4 银杏叶片逆境生理指标变化规律分析 |
3.3 干旱胁迫下银杏叶片黄化病对生长量影响分析 |
第四章 结论与讨论 |
4.1 结论 |
4.2 讨论 |
参考文献 |
致谢 |
攻读学位论文期间发表文章 |
(4)三种梨病毒实时荧光定量RT-PCR和RT-LAMP检测技术的研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
缩略语表(Abbreviations) |
第一章 文献综述 |
1.1 三种梨病毒的危害特点 |
1.2 三种梨病毒的分子特性 |
1.3 果树病毒检测技术研究进展 |
1.3.1 核酸分子杂交技术 |
1.3.2 双链RNA(dsRNA)技术 |
1.3.3 基因芯片技术 |
1.3.4 实时荧光定量PCR技术 |
1.3.5 LAMP技术 |
1.4 研究目的和意义 |
第二章 三种梨病毒实时荧光定量RT-PCR检测技术 |
2.1 材料 |
2.1.1 供试材料 |
2.1.2 试剂及仪器 |
2.2 研究方法 |
2.2.1 引物设计 |
2.2.2 总RNA的提取 |
2.2.3 Dnase Ⅰ消化 |
2.2.4 RT-PCR扩增 |
2.2.5 基因克隆 |
2.2.6 引物用量及反应温度的优化 |
2.2.7 阳性质粒标准品的构建 |
2.2.8 标准曲线的绘制 |
2.2.9 qRT-PCR引物特异性检测 |
2.2.10 qRT-PCR引物灵敏度验证 |
2.3 结果与分析 |
2.3.1 三种梨病毒qRT-PCR检测引物的筛选 |
2.3.2 引物用量对PCR扩增反应的影响 |
2.3.3 温度梯度对PCR扩增反应的影响 |
2.3.4 溶解曲线的分析 |
2.3.5 标准曲线的绘制 |
2.3.6 重复性 |
2.3.7 qRT-PCR检测ASGV、ASPV和ACLSV效果评价 |
2.3.8 qRT-PCR检测梨三种病毒的效果 |
2.4 结果与讨论 |
第三章 ACLSV和ASPV两种病毒的RT-LAMP技术 |
3.1 材料与方法 |
3.1.1 供试材料 |
3.1.2 主要试剂与仪器 |
3.2 研究方法 |
3.2.1 引物设计 |
3.2.2 总RNA提取 |
3.2.3 RT-PCR扩增 |
3.2.4 RT-LAMP反应体系的建立及优化 |
3.2.5 LAMP扩增产物检测 |
3.2.6 RT-LAMP特异性检测 |
3.2.7 RT-LAMP检测引物灵敏度验证 |
3.3 结果与分析 |
3.3.1 ACLSV和LAMP检测引物的筛选 |
3.3.2 RT-LAMP检测ACLSV和ASPV反应体系的优化 |
3.3.3 RT-LAMP检测ACLSV和ASPV效果评价 |
3.4 结果与讨论 |
第四章 结论与展望 |
参考文献 |
附录A Real-time RT-PCR与单一RT-PCR检测梨样品三种病毒 |
附录B RT-LAMP与单一RT-PCR检测梨样品三种病毒结果 |
致谢 |
(5)基于质外体pH和铁素分析的‘库尔勒香梨’黄化症诊断研究(论文提纲范文)
1 材料和方法 |
1.1 材料 |
1.2 方法 |
1.2.1茎干木质部汁液的提取和p H值的测定 |
1.2.2茎干木质部汁液和叶片总铁含量的测定 |
1.2.3 茎干木质部汁液和叶片有效铁含量的测定 |
1.2.4数据的统计分析 |
2 结果与分析 |
2.1 树体不同器官汁液p H值测定 |
2.2 不同器官木质部质外体汁液总铁含量测定 |
2.3 不同器官木质部汁液中活性铁含量 |
3 讨论 |
3.1 树体各器官的p H值和铁素代谢 |
3.2 铁素在各器官木质部的浓度分布 |
3.3关于“缺铁黄化悖论”( Iron chlorosis paradox)的探讨 |
(6)不同施肥处理对库尔勒香梨树体营养积累与抗寒性的影响(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
第1章 绪论 |
1.1 果树的营养特点 |
1.2 果树的营养状况研究进展 |
1.2.1 植物生长所需营养概述 |
1.2.2 果树营养概述 |
1.3 营养元素施肥与抗寒性研究概况 |
1.3.1 氮磷钾肥施用与植物抗寒性的关系 |
1.3.2 其它元素施用与植物抗寒性的关系 |
1.4 本课题研究的意义 |
第2章 库尔勒香梨不同施肥量与年周期树体营养积累的关系 |
2.1 施肥试验的材料与方法 |
2.1.1 试验材料 |
2.1.2 试验方法 |
2.2 矿质营养成分含量测定的材料与方法 |
2.2.1 供试材料 |
2.2.2 取样时间 |
2.2.3 试材预处理 |
2.2.4 各矿质元素测定方法 |
2.2.5 数据处理 |
2.3 结果分析 |
2.3.1 不同叶面施肥对叶片中矿质营养元素含量年周期变化的影响 |
2.3.2 不同基肥处理对叶片中矿质营养元素含量年周期变化的影响 |
2.3.3 库尔勒香梨不同叶面肥处理对叶片中矿质营养元素含量累积变化的影响 |
2.4 讨论 |
第3章 库尔勒香梨叶面肥处理与抗寒性的关系研究 |
3.1 材料与方法 |
3.1.1 材料 |
3.1.2 采样时间 |
3.1.3 生理指标的测定 |
3.2 结果分析 |
3.2.1 人工低温胁迫下库尔勒香梨10年生树枝条不同叶面肥处理可溶性糖含量的变化 |
3.2.2 人工低温胁迫下库尔勒香梨20年生树枝条不同叶面肥处理可溶性糖含量的变化 |
3.2.3 人工低温胁迫下库尔勒香梨10年生树枝条不同叶面肥处理淀粉含量的变化 |
3.2.4 人工低温胁迫下库尔勒香梨20年生树枝条不同叶面肥处理淀粉含量的变化 |
3.2.5 人工低温胁迫下库尔勒香梨10年生树枝条不同叶面肥处理脯氨酸含量的变化 |
3.2.6 人工低温胁迫下库尔勒香梨20年生树枝条不同叶面肥处理脯氨酸含量的变化 |
3.2.7 人工低温胁迫下库尔勒香梨10年生树枝条不同叶面肥处理丙二醛含量的变化 |
3.2.8 人工低温胁迫下库尔勒香梨20年生树枝条不同叶面肥处理丙二醛含量的变化 |
3.2.9 人工低温胁迫对不同叶面肥处理库尔勒香梨枝条抗寒性指标相关性分析 |
3.3 讨论 |
第4章 不同基肥量与提高库尔勒香梨抗寒性的关系 |
4.1 产量测定 |
4.2 抗寒指标测定 |
4.2.1 试验材料 |
4.2.2 采样时间 |
4.2.3 试验方法 |
4.3 结果分析 |
4.3.1 不同基肥处理和产量的关系 |
4.3.2 不同基肥量处理与提高库尔勒香梨抗寒性的关系 |
4.3.3 人工低温胁迫对不同基肥处理库尔勒香梨枝条抗寒性指标相关性分析 |
4.4 讨论 |
第5章 结论 |
附录 |
参考文献 |
致谢 |
作者简历 |
(7)库尔勒香梨缺铁失绿症的因子分析及其叶片诊断(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
第1章 绪论 |
1.1 植物叶片失绿黄化的原因 |
1.2 植物的铁素营养代谢机理 |
1.3 植物缺铁黄化的影响因素分析 |
1.4 植物缺铁黄化病的诊断研究 |
1.5 植物缺铁黄化症的矫治技术 |
1.6 本课题研究的背景、目的和意义 |
第2章 库尔勒地区香梨缺铁黄化病发生与矫治的果园调查 |
2.1 材料与方法 |
2.1.1 材料 |
2.1.2 方法 |
2.2 结果与分析 |
2.2.1 库尔勒香梨不同产区黄化病发生情况调查 |
2.2.2 黄化树滴注"光泰"营养液对黄化树叶片复绿的效果 |
2.2.3 黄化树喷施铁肥后果实品质的调查 |
2.3 讨论 |
2.3.1 库尔勒香梨黄化病发病情况 |
2.3.2 滴注"光泰"营养液对黄化树叶片复绿的效果 |
2.3.3 喷施铁肥后对香梨果实品质的影响 |
第3章 库尔勒香梨缺铁黄化病年度发生规律调查 |
3.1 材料与方法 |
3.1.1 材料 |
3.1.2 方法 |
3.2 结果与分析 |
3.2.1 黄化树与正常树枝叶生长比较 |
3.2.2 黄化树与正常树叶片总叶绿素含量的年度变化规律 |
3.2.3 黄化树与正常树叶果实品质的比较 |
3.2.4 黄化树与正常树叶叶片解剖结构的差异 |
3.3 讨论 |
3.3.1 黄化对叶片解剖结构的影响 |
3.3.2 黄化对叶片、果实的影响 |
3.3.3 黄化叶片年度变化规律 |
第4章 库尔勒香梨缺铁黄化病叶片诊断指标的研究 |
4.1 材料与方法 |
4.1.1 材料 |
4.1.2 方法 |
4.2 结果与分析 |
4.2.1 香梨叶片中各营养元素含量分析 |
4.2.2 黄化叶有效铁含量和叶绿素含量的相关性分析 |
4.2.3 不同方法对黄化叶和正常叶全铁含量测定的比较分析 |
4.2.4 正常绿叶和失绿黄叶的叶面积和灰分率的比较 |
4.2.5 干重法和叶面积法表征叶片全铁和有效铁含量的比较分析 |
4.3 讨论 |
4.3.1 香梨叶片矿质元素含量分析与缺铁失绿症的营养诊断 |
4.3.2 叶片含铁含量测定方法的优化 |
4.3.3 缺铁对香梨叶片叶绿素含量的影响 |
第5章 土壤因子对库尔勒香梨缺铁失绿症的影响 |
5.1 材料与方法 |
5.1.1 材料 |
5.1.2 方法 |
5.2 结果与分析 |
5.2.1 库尔勒地区各试点的土壤质地与理化分析 |
5.2.2 土壤矿质元素分析 |
5.2.3 库尔勒不同地区地下水位与香梨黄化病发生的相关关系 |
5.3 讨论 |
5.3.1 土壤理化特性与香梨黄化病的关系 |
5.3.2 土壤矿质元素与香梨黄化病的关系 |
5.3.3 地下水位对香梨黄化病的影响 |
第6章 结论 |
参考文献 |
图版 |
致谢 |
作者简历 |
(8)我国四省区梨主要病害的病原鉴定、分子检测与药剂筛选研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
上篇 文献综述 |
第一章 梨主要病害及综合防控研究现状概述 |
1 梨主要病害的研究现状 |
1.1 侵染性病害 |
1.2 非侵染性病害 |
2 梨病害防治研究现状 |
2.1 综合治理的原则和策略 |
2.2 梨主要病害的防治方法 |
第二章 植物病原真菌的分类鉴定研究方法 |
1 形态学分类鉴定 |
2 分子生物学分类鉴定 |
2.1 RAPD技术 |
2.2 微卫星技术 |
2.3 rDNA-ITS |
2.4 RFLP |
2.5 AFLP |
3 总结 |
第三章 植物病原真菌的检测技术研究进展 |
1 形态学检测方法 |
1.1 症状观察 |
1.2 分离培养 |
1.3 镜检 |
2 基于PCR的分子生物学检测方法 |
2.1 常规PCR |
2.2 巢式PCR |
2.3 实时荧光PCR |
2.4 多重PCR |
2.5 PCR ELISA技术 |
3 前景与展望 |
下篇 研究内容 |
第一章 我国4省区梨病害分布调查及主要病原菌的分离鉴定 |
1 试验材料与方法 |
1.1 供试材料 |
1.2 方法 |
2 结果与分析 |
2.1 江苏省、安徽省、陕西省、新疆维吾尔自治区梨树主要病害种类 |
2.2 梨轮纹病 |
2.3 炭疽病 |
2.4 黑斑病 |
2.5 梨腐烂病 |
2.6 梨白粉病 |
2.7 梨锈病 |
3 讨论 |
第二章 梨轮纹病、炭疽病、黑斑病病原菌的分子检测 |
1 材料与方法 |
1.1 材料 |
1.2 方法 |
2 结果与分析 |
2.1 引物Bb1/Bb2、E1/E2、AAF2/AAR3的特异性PCR扩增 |
2.2 引物Bb1/Bb2、E1/E2、AAF2/AAR3灵敏度验证 |
2.3 发病植株组织中病原物的快速检测 |
2.4 结论 |
3 讨论 |
第三章 21种杀菌剂对梨炭疽病菌、轮纹病菌、黑斑病菌的室内毒力测定 |
1 材料与方法 |
1.1 材料 |
1.2 供试方法 |
2 结果分析 |
2.1 供试杀菌剂对梨炭疽病菌的毒力测定结果 |
2.2 供试杀菌剂对梨轮纹病菌的毒力测定结果 |
2.3 供试杀菌剂对梨黑斑病的毒力测定结果 |
2.4 结论 |
3 讨论 |
附录一 梨树病害防控网的建立 |
附录二 上传GENBANK的几种病原真菌ITS序列 |
附录三 发表或待发表的论文 |
参考文献 |
致谢 |
(9)库尔勒香梨枝条、花芽冻害发生程度与相关生理指标研究(论文提纲范文)
1 材料与方法 |
1.1 材 料 |
1.2 方 法 |
1.2.1 可溶性糖、游离脯氨酸、可溶性蛋白质测定 |
1.2.2 营养成分含量的测定 |
2 结果与分析 |
2.1 库尔勒香梨枝条冻害发生程度与生理指标的相关性 |
2.1.1 枝条冻害程度与部分生理指标的关系 |
2.1.2 枝条生理指标相关性分析 |
2.2 库尔勒香梨枝条冻害程度与营养元素含量的关系 |
2.2.1 枝条冻害程度与营养元素含量的关系 |
2.2.2 枝条营养元素含量相关性分析 |
2.3 库尔勒香梨花芽冻害发生程度与相关生理指标的关系 |
2.3.1 花芽冻害发生程度对生理指标的影响 |
2.3.2 花芽生理指标相关性分析 |
2.4 库尔勒香梨花芽发生冻害程度与营养元素含量的关系 |
2.4.1 花芽不同冻害程度与营养元素含量的关系 |
2.4.2 花芽营养元素含量相关性分析 |
3 结论与讨论 |
3.1 库尔勒香梨枝条、花芽冻害发生与游离脯氨酸、可溶性糖含量的关系 |
3.2 库尔勒香梨枝条、花芽冻害发生与POD活性、MDA含量的关系 |
3.3 库尔勒香梨枝条、花芽冻害发生与N, K, Mg含量的关系 |
3.4 库尔勒香梨枝条、花芽冻害发生与P, Ca含量的关系 |
3.5 小 结 |
(10)砂梨上苹果茎痘病毒的分离鉴定及其cp基因遗传转化烟草研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
第一章 文献综述 |
1. 苹果茎痘病毒(ASPV) |
1.1 ASPV的发现 |
1.2 生物学特性 |
1.3 分子生物学特性 |
1.4 检测技术 |
1.4.1 指示植物法 |
1.4.2 血清学检测 |
1.4.3 分子生物学检测 |
1.5 国内研究现状 |
1.6 防治对策 |
2 cp基因抗病毒基因工程的研究进展 |
2.1 cp基因抗病毒基因工程的应用 |
2.2 cp基因介导抗性机制 |
3 反义RNA技术 |
3.1 反义RNA技术作用原理 |
3.2 反义RNA技术在植物基因工程中的应用 |
4 植物转基因研究 |
4.1 植物遗传转化的发展 |
4.2 根癌农杆菌介导的植物转基因 |
4.2.1 根癌农杆菌的研究简史 |
4.2.2 根癌农杆菌的生物学特性 |
4.2.3 根癌农杆菌Ti质粒的结构与功能 |
4.2.4 根癌农杆菌Ti质粒介导的整合转化程序的特点 |
4.2.5 根癌农杆菌转化的机理 |
4.2.6 根癌农杆菌T-DNA转移的影响因素 |
4.2.7 转化细胞的选择培养和再生 |
5. 目的及意义 |
第二章 砂梨上苹果茎痘病毒的分离鉴定 |
1 ASPV分子生物学检测 |
1.1 主要试剂 |
1.2 材料与方法 |
1.2.1 待检样品 |
1.2.2 引物设计 |
1.2.3 样品提取缓冲液 |
1.2.4 试管捕捉RT-PCR(TC-RT-PCR) |
1.2.5 PCR扩增 |
1.2.6 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)的制备及染色 |
1.3 结果与分析 |
1.3.1 TC-RT-PCR检测 |
2 砂梨上ASPV的分离 |
2.1 材料与方法 |
2.1.1 供试样品 |
2.1.2 指示植物 |
2.1.3 接种缓冲液 |
2.1.4 汁液摩擦接种及带毒叶片的保存 |
2.2 结果与分析 |
3 结论与讨论 |
第三章 ASPV的cp基因植物表达载体构建及转化烟草研究 |
1 前言 |
2 cp基因的克隆与序列测定 |
2.1 主要试剂 |
2.2 材料与方法 |
2.2.1 供试材料 |
2.2.2 引物设计 |
2.2.3 cp基因的PCR扩增与检测 |
2.2.4 目标片段的回收与纯化 |
2.2.5 目标片段与载体的连接 |
2.2.6 连接产物转化宿主菌 |
2.2.6.1 大肠杆菌DH10B感受态细胞的制备 |
2.2.6.2 热击转化大肠杆菌DH10B感受态细胞 |
2.2.7 阳性克隆的筛选 |
2.2.8 质粒DNA的制备 |
2.2.9 重组质粒的鉴定 |
2.2.9.1 PCR鉴定 |
2.2.9.2 酶切鉴定 |
2.2.10 序列测定和分析 |
2.3 结果与分析 |
2.3.1 cp基因的PCR扩增 |
2.3.2 重组质粒的PCR检测和酶切鉴定 |
2.3.3 ASPV cp基因的序列分析 |
3 cp基因植物表达载体的构建 |
3.1 材料与方法 |
3.1.1 供试材料 |
3.1.2 质粒pCAMBIA1301S的提取、酶切与纯化 |
3.1.3 质粒PMD18-T-CP的酶切与纯化 |
3.1.4 目标片段与载体的连接与转化 |
3.1.5 重组质粒的鉴定 |
3.2 结果与分析 |
3.2.1 重组植物表达载体的PCR和酶切鉴定 |
4 叶盘法转化西方烟 |
4.1 主要试剂 |
4.2 材料与方法 |
4.2.1 供试材料 |
4.2.2 根癌农杆菌感受态细胞的制备 |
4.2.3 重组植物表达载体转化根癌农杆菌感受态细胞 |
4.2.4 烟草的转化、再生和筛选 |
4.2.5 选择压力的确定 |
4.2.6 遗传转化体系的优化 |
4.2.7 Hyb抗性植株的筛选及PCR检测 |
4.3 结果与分析 |
4.3.1 外植体对潮霉素的敏感性 |
4.3.2 根癌农杆菌菌液浓度对外植体侵染的影响 |
4.3.3 不同浸染时间对根癌农杆菌侵染力的影响 |
4.3.4 Hyb抗性烟草植株的获得 |
4.3.5 Hyb抗性植株的PCR检测 |
4.4 结论与讨论 |
附录 试验常用溶液配方 |
参考文献 |
致谢 |
四、梨黄化病的发生原因及防治方法试验报告(论文参考文献)
- [1]天津微酸性土壤中不同品种蓝莓植株的黄化特性及机制[D]. 张般般. 天津农学院, 2018(07)
- [2]梨苦痘病、水心病发生特点和防治方法探讨[D]. 封士达. 扬州大学, 2017(01)
- [3]干旱胁迫下银杏叶片黄化病的发生及生理变化规律研究[D]. 张斌. 沈阳农业大学, 2016(04)
- [4]三种梨病毒实时荧光定量RT-PCR和RT-LAMP检测技术的研究[D]. 卢永灿. 华中农业大学, 2016(02)
- [5]基于质外体pH和铁素分析的‘库尔勒香梨’黄化症诊断研究[J]. 赵越,吴玉霞,何天明. 果树学报, 2016(02)
- [6]不同施肥处理对库尔勒香梨树体营养积累与抗寒性的影响[D]. 何香. 新疆农业大学, 2012(05)
- [7]库尔勒香梨缺铁失绿症的因子分析及其叶片诊断[D]. 黎秀丽. 新疆农业大学, 2010(02)
- [8]我国四省区梨主要病害的病原鉴定、分子检测与药剂筛选研究[D]. 付余波. 南京农业大学, 2010(06)
- [9]库尔勒香梨枝条、花芽冻害发生程度与相关生理指标研究[J]. 龙春跃,克热木·伊力,买合木提·卡热,温且木. 新疆农业大学学报, 2009(02)
- [10]砂梨上苹果茎痘病毒的分离鉴定及其cp基因遗传转化烟草研究[D]. 范锦. 华中农业大学, 2007(02)