紫外光谱鉴定茯苓、菝葜、必泻及其制备妙济丸

一、土茯苓与菝葜、萆薢及其制剂妙济丸的紫外光谱鉴别（论文文献综述）

刘志刚^[1]（2011）在《泄浊除痹方治疗高尿酸血症物质基础研究》文中研究指明中药复方物质基础研究是中药现代化和国际化的前提和基础,是目前亟待解决的中药（复方）现代化关键问题之一。中药（复方）现代化的进程中,首先要揭示中药（复方）发挥作用的药效物质基础。中药复方物质基础是中药复方中发挥药理学治疗作用的化学成分的集合。目前中药复方物质基础研究方法包括中药化学与药效学结合的方法、血清药物化学和血清药理学结合的方法、细胞膜色谱法等。本研究采用中药化学与药效学结合的方法对中药泄浊除痹方治疗高尿酸血症的物质基础进行了初步探讨：采用现代液相分析技术,对泄浊除痹方中活性成分进行了含量测定；采用色谱技术对泄浊除痹方含量较高的总黄酮部位进行了分离纯化研究,并系统研究了泄浊除痹方总黄酮部位体外对小鼠肾脏近曲小管上皮细胞（RTECs）增值、尿酸吸收及小鼠尿酸转运蛋白（RST）基因的负性调控,初步证实泄浊除痹方总黄酮为其治疗高尿酸血症的有效部位之一。本研究主要包括以下研究内容：1、泄浊除痹方中活性物质含量测定本研究采用HPLC法测定泄浊除痹方中薯蓣皂苷元、蜕皮甾酮、落新妇苷的含量。Agilent HC-18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）；以乙腈-甲醇（2：3）为流动相,流速为1mL-min"1,检测波长为206 nm,测定方中薯蓣皂苷元的含量,回收率为104.51%；AgilentTC-18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,以乙腈-水（17：83）为流动相,流速为1mL-min-1,检测波长为243 nm,测定方中蜕皮甾酮的含量,回收率为93.94%；KromasilC-18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,以乙腈-磷酸-水（20：0.025：80）为流动相,检测波长为290 nm,测定方中落新妇苷的含量,回收率为99.46%；以上含量测定方法经方法学验证,分析快速、准确、灵敏度高、重现性好。2、泄浊除痹方总黄酮有效部位纯化分离研究本研究以黄酮类成分为研究指标,完善补充了君药土茯苓的定性、定量方法,采用薄层色谱法进行了落新妇苷的鉴别,高效液相法（HPLC）建立了落新妇苷、黄杞苷的含量测定方法；采用高效液相法测定了提取溶液中落新妇苷含量,比色法测定了提取溶液中总黄酮含量,以正交试验进行了土茯苓总黄酮有效部位的提取工艺优化,考察了乙醇浓度、提取温度、固液比、提取次数等因素,确定提取工艺为以10倍量60%乙醇,沸水浴回流提取2次,经验证,总黄酮提取率可达95.99%。以土茯苓总黄酮、落新妇苷、黄杞苷含量为指标,通过考察静态、动态吸附试验,筛选了聚酰胺颗粒分离纯化土茯苓及泄浊除痹方总黄酮有效部位的科学合理的工艺条件,聚酰胺富集物中总黄酮含量为75.63%,转移率为68.24%,落新妇苷含量为12.77%,转移率为73.05%。3、泄浊除痹方化学成分分离纯化及结构研究本研究采用系统溶剂法、硅胶柱色谱法、聚酰胺柱色谱法等分离纯化技术分离泄浊除痹方化学成分；利用理化性质、红外吸收光谱、核磁共振碳谱与氢谱、质谱等鉴别化合物结构,并与相关文献对照,确认化合物。从泄浊除痹方中分离出7个化学成分,其中六个已鉴定结构,分别是p-谷甾醇（晶Ⅰ,β-Sitosterol）、齐墩果酸（晶Ⅱ,Oleanolic acid）、熊果酸（晶Ⅲ,Ursolic acid）、落新妇苷（晶Ⅳ, Astilbin）、黄杞苷（晶V, Engelitin）及p-蜕皮甾酮（晶Ⅵ,β-Ecdysterone）。4、泄浊除痹方总黄酮降尿酸机理研究进行了小鼠肾脏近曲小管上皮细胞原代培养条件优化及功能测试研究：经机械破碎的肾脏皮质组织在400U胶原酶Ⅰ处理20 min时,肾小管节段贴壁率达到最高,为54.5%；首次换液最佳时间为72 h；细胞在原代培养第4-7天生长达到对数期,在第10天状态开始下降。在1500μmol-L-1尿酸浓度的吸收培养基中,吸收实验进行30 min时,其对尿酸吸收速率达到最大。阳性药物丙磺舒和苯溴马隆在不同的浓度下,对尿酸吸收的抑制率不同,苯溴马隆的抑制率高于丙磺舒。泄浊除痹方总黄酮对小鼠肾脏近曲小管上皮细胞增殖及尿酸吸收的影响：将原代培养的小鼠肾脏近曲小管上皮细胞用不同浓度泄浊除痹方总黄酮孵育48h,四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞活性；进行尿酸吸收实验,采用尿酸检测试剂盒测定尿酸吸收值。结果显示：高浓度组总黄酮（10、7.5、5 g·L-1）对细胞生长有不同程度的抑制作用,低浓度组药物（2.5、0.5 g·L-1）对细胞生长活性无显着影响；在对细胞生长活性无显着影响的低浓度梯度范围内（2.5、2、1.5、1.0、0.5 g·L-1）,药物对尿酸吸收表现出不同程度的抑制作用。该研究表明泄浊除痹方总黄酮对小鼠肾脏近曲小管上皮细胞尿酸吸收功能有一定的抑制作用。泄浊除痹方总黄酮对RST基因的负性调控：利用分子生物学实验手段检测不同药物作用浓度下,细胞中RST蛋白的基因扩增。结果显示：泄浊除痹方总黄酮在1-2.5 g·L-1浓度范围内对尿酸吸收有显着抑制,且RST基因扩增明显下调。该研究表明泄浊除痹方有能够通过下调RST基因扩增,降低RTECs尿酸吸收作用。

秦文杰^[2]（2007）在《短柱肖菝葜化学成分及质量控制研究》文中研究说明短柱肖菝葜为百合科肖菝葜属短柱肖菝葜（Heterosmilax yunnanensis Gagnep.）的干燥根茎。具有清热、除湿、解毒、通利关节之功能,临床用于湿热淋浊,带下,痈肿,瘰疠,疥癣,梅毒,筋骨挛痛,以及钩端螺旋体病。短柱肖菝葜的化学成分研究未见报道。本研究的初步活性筛选试验结果表明,短柱肖菝葜具有较好的抗肿瘤作用。本课题以短柱肖菝葜为研究对象,对其化学成分和质量控制进行了较为系统的研究,同时还对其抗肿瘤活性进行了探讨,从而为其临床应用和进一步研究开发提供了物质基础和理论依据。主要包括以下几方面内容:1利用多种色谱技术对短柱肖菝葜根茎的化学成分进行了较为系统的提取、分离,并利用现代光谱、波谱技术对提取分离得到的化合物进行了结构鉴定。从中分离得到了31个化合物,鉴定了29个,其中黄酮类成分8个:大豆素（1）,甘草素（2）,橙皮苷（3）,芒果苷（4）,3-O-β-D-吡喃葡萄糖-1,3,6,7-四羟基- 酮苷（5）*,7-O-甲基芒果苷（6）,4-C-β-D-吡喃葡萄糖-1,3,6-三羟基-7-甲氧基 酮苷（7）,2-O-α-L-鼠李吡喃糖基-5-C-β-D-葡萄吡喃糖基-4,6-二羟基-苯基-对羟基苯酮（8）*;酚苷类成分4个:3,5-二甲氧基-4-羟基-苯甲酸-0-葡萄糖苷（9）,4-羟基苯甲酸葡萄糖苷（10）,3,5-二甲氧基-4-羟基-1-0-葡萄糖苷（11）,丁香酸葡萄糖苷（12）;三萜及甾醇类成分4个:熊果酸（13）,β-谷甾醇（14）,胡萝卜苷（15）,β-谷甾醇酯-3β-吡喃葡萄糖苷-6′-O-棕榈酸酯（16）;蒽醌类成分1个:大黄酚（17）;香豆素类成分1个:佛手内酯（18）;醇、酸及酯类成分8个:十八烷酸（19）,十六烷酸（20）,十四烷酸（21）,二十六烷酸（22）,四十六烷醇（23）,二十八烷醇（24）,二（2-乙基己基）邻苯二甲酸酯（25）,单棕榈酸甘油酯（26）;其它类成分3个:5-羟甲基糠醛（27）,正丁基-β-D-吡喃果糖苷（28）,1-O-[β-D木糖（1→6）-β-D-葡萄糖（1→）乙酸甲酯（29）*。这些化合物中,5、8、29为新化合物,除14,15,19,20,26外,其余化合物均为首次从该属植物中分离得到,所有化合物均为首次从该种植物中分离得到。2对短柱肖菝葜药材进行了质量控制研究。其内容主要有:定性部分:性状,显微和薄层色谱鉴别;定量部分:采用紫外-可见分光光度法,对该药材中的总黄酮进行了定量分析;采用RP-HPLC法,分别以芒果苷和丁香酸葡萄糖苷为指标,对本药材中的芒果苷和丁香酸葡萄糖苷又进行了含量测定;在上述工作的基础上,起草了短柱肖菝葜药材的质量标准（草案）。初步建立了短柱肖菝葜药材的HPLC指纹图谱条件,利用HPLC保留时间和LC-MS法对部分特征峰进行了指认,并利用所建立的指纹图谱对肖菝葜属不同来源药材及同一产地不同采集时间的短柱肖菝葜药材进行了初步区分。3对短柱肖菝葜的药理活性进行了初步研究。首先以小鼠H22肝癌、小鼠Lewis肺癌和小鼠S180肉瘤三个肿瘤模型,对其正丁醇提取物进行了体内抗肿瘤实验;继而,又用人肺癌细胞A-549、人结肠癌细胞HCT-8、人肝癌细胞BEL-7402、人白血病细胞U-937四个肿瘤细胞,对从正丁醇部位分离得到的13个单体化合物进行了体外抗肿瘤细胞筛选。上述结果表明:短柱肖菝葜正丁醇提取物对所选肿瘤模型均具有比较显着的抑制肿瘤作用;部分化合物表现出对所选的肿瘤细胞具有较好的体外抑制活性。为今后的研究开发奠定了较好的基础。综上,通过对短柱肖菝葜药材上述较为系统的研究,获知了其部分物质基础,进一步充实了对其性状、显微鉴别、薄层色谱鉴别、含量测定和药理活性等方面的研究内容,建立了短柱肖菝葜药材的质量标准（草案）。为短柱肖菝葜药材的研究开发及临床应用提供了物质基础和理论依据。

蔡建萍^[3]（2000）在《土茯苓与菝葜、萆薢及其制剂妙济丸的紫外光谱鉴别》文中研究指明

二、土茯苓与菝葜、萆薢及其制剂妙济丸的紫外光谱鉴别（论文开题报告）

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、土茯苓与菝葜、萆薢及其制剂妙济丸的紫外光谱鉴别（论文提纲范文）

（1）泄浊除痹方治疗高尿酸血症物质基础研究（论文提纲范文）

（2）短柱肖菝葜化学成分及质量控制研究（论文提纲范文）

（3）土茯苓与菝葜、萆薢及其制剂妙济丸的紫外光谱鉴别（论文提纲范文）

四、土茯苓与菝葜、萆薢及其制剂妙济丸的紫外光谱鉴别（论文参考文献）

• [1]泄浊除痹方治疗高尿酸血症物质基础研究[D]. 刘志刚. 广州中医药大学, 2011(09)
• [2]短柱肖菝葜化学成分及质量控制研究[D]. 秦文杰. 北京中医药大学, 2007(02)
• [3]土茯苓与菝葜、萆薢及其制剂妙济丸的紫外光谱鉴别[J]. 蔡建萍. 江西中医学院学报, 2000(S1)

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