一、血友病A的基因治疗研究进展（论文文献综述）
代新岳,张磊[1]（2022）在《血友病AAV载体基因治疗研究进展》文中研究指明血友病基因治疗经过30年的持续发展,已取得长足的进步。血友病患者FVIII或FIX水平达到正常甚至治愈已成为可能。虽然在多个国家血友病基因治疗已取得显着成果,但仍然有很大的改进空间。目前临床试验中AAV是血友病基因治疗的主要载体,未来的研究将集中在完善病毒衣壳、转基因和启动子的设计上,以追求更高的转导效率、更低的免疫反应和可预测性的治疗结果。目前的研究表明,与在动物模式中近乎100%的高转导效率相比,在人类肝细胞中实现高转导效率及凝血因子的高表达仍有不足之处,需要避免蛋白质过载引起的细胞应激风险。虽然血友病基因治疗面临一定的挑战,但是随着技术的不断发展成熟,相信未来会开发出真正治愈血友病的个体化治疗方案。
王稳,胡群[2]（2021）在《血友病患者关节评估及治疗的研究进展》文中认为血友病是一组X连锁隐性遗传性出血性疾病。以自发性出血或者轻微外伤后过度出血为主要临床表现, 其中关节出血最常见。反复的关节出血可引起退行性关节病, 因此早期进行关节评估极为重要。目前, 凝血因子替代治疗仍是血友病的首选治疗, 但是患者经反复多次替代治疗后, 可产生相应的凝血因子抑制物, 影响疗效。多项针对血友病的新治疗方案已取得显着进展, 但其安全性仍待进一步研究。笔者拟就血友病多种关节评估及治疗方法进行综述, 分析其优、缺点, 以期为血友病患者选择合适的诊疗方案提供参考。
沈绍宁,吴东晓,吕帅洁,肖鲁伟,童培建[3]（2021）在《干细胞疗法在血友病性关节炎治疗中的应用进展》文中指出目前,临床上治疗血友病性关节炎的方法主要为预防出血和骨科手术,但是这2种方法均无法延缓关节炎的病情进展。干细胞是具有多向分化潜能的细胞,在再生医学领域备受关注。近年来,有关干细胞疗法治疗血友病性关节炎的研究取得了显着成果,并已证明此疗法可以修复骨与软骨缺损,延缓血友病性关节炎病情进展。干细胞疗法在血友病性关节炎的治疗中展现出极大的应用前景。本文从治疗血友病性关节炎的干细胞类型、基于造血干细胞的基因治疗和基于间充质干细胞的细胞治疗3个方面,对干细胞疗法在血友病性关节炎治疗中的应用进展进行了综述。
孙庆云[4]（2021）在《腺病毒介导的B型血友病基因治疗研究》文中指出目的1将携带人凝血因子IX（Human coagulation factor IX,hFIX）的重组腺病毒载体（Ad-hFIX-GFP）转染至SD大鼠脂肪干细胞（Adipose-derived stem cell,ADSCs）中并进行传代培养,探讨hFIX基因是否可以在ADSCs内稳定表达。2通过将Ad-hFIX-GFP转染的C57BL/6j小鼠的ADSCs经尾静脉注射入血友病B（Hemophilia B,HB）鼠体内,观察hFIX基因在HB鼠体内的表达情况,并探讨ADSCs是否可以作为HB基因治疗的靶细胞载体。方法1 hFIX基因在SD大鼠ADSCs内的稳定表达:将实验分为F9组:Ad-hFIX-GFP首次转染ADSCs;F91组:Ad-hFIX-GFP转染ADSCs传代后1代;F92组:Ad-hFIX-GFP转染ADSCs传代后2代;F93组:Ad-hFIX-GFP转染ADSCs传代后3代;空载组:Ad-GFP转染ADSCs;空白组:正常ADSCs。2 hFIX在HB鼠体内的表达情况:将实验分为HB1组:Ad-hFIX-GFP转染C57BL/6j小鼠ADSCs;HB2组:Ad-GFP转染C57BL/6j小鼠ADSCs;HB3组:生理盐水,将3组细胞分别经尾静脉注射入HB鼠体内,在注射前1周、注射后的第1、7、14、21、28天采集血液标本,注射后第28天采集肝脏及肺脏组织标本。3通过RT-PCR检测转染后SD大鼠ADSCs内及HB鼠肝脏及肺脏内hFIX基因的表达情况,Western blot检测转染后SD大鼠ADSCs内及HB鼠肝脏及肺脏内hFIX蛋白表达情况,ELISA法检测转染后SD大鼠ADSCs上清液及HB鼠血浆中hFIX抗原的表达。结果1 hFIX基因在SD大鼠ADSCs内的稳定表达:RT-PCR检测结果F9组、F91组、F92组、F93组均可见hFIX基因表达条带,而空载组与空白组未见hFIX基因表达条带,差异具有显着性（P<0.05）。WB检测结果hFIX蛋白表达灰度值F9组（0.906±0.042）、F91组（0.619±0.015）、F92组（0.496±0.031）、F93组（0.288±0.060）高于空载组（0.182±0.017）和空白组（0.169±0.027）,差异具有显着性（P<0.05）。ELISA检测结果F9组（59.268±1.443ng/ml）、F91组（44.822±1.645ng/ml）、F92组（37.083±1.886ng/ml）、F93组（20.848±1.798ng/ml）hFIX:Ag表达水平高于空载组（0.622±0.105ng/ml）和空白组（0.611±0.128ng/ml）,差异具有显着性（P<0.05）。2 Ad-hFIX-GFP在HB鼠体内的表达结果:肝脏组织中hFIX基因表达及hFIX蛋白结果显示HB1组结果呈阳性,HB2组和HB3组结果呈阴性,三组差异具有显着性（P<0.05）。肺脏组织中hFIX基因表达及hFIX蛋白结果显示HB1组、HB2组和HB3组结果均呈阴性,三组之间差异无统计学意义（P>0.05）。与HB2组和HB3组相比,HB1组ELISA检测血浆中可见到hFIX抗原水平升高。结论1 Ad-hFIX-GFP转染SD大鼠ADSCs可以稳定表达hFIX基因。2 Ad-hFIX-GFP可在HB鼠体内分泌hFIX,腺病毒介导的血友病B基因治疗在动物体内可以表达。3 ADSCs可作为HB基因治疗的靶细胞载体之一。图10幅;表13个;参103篇。
郭佳慧[5]（2021）在《应用标准剂量与低剂量凝血因子Ⅷ预防治疗对A型血友病患儿关节损伤的疗效对比分析》文中研究表明目的探讨A型血友病（hemophilia A）患儿在标准剂量与低剂量凝血因子Ⅷ预防治疗后的各部位关节（膝关节、肘关节、踝关节）损伤进展情况以及经不同剂量的预防治疗后各部位关节损害差异,旨在为A型血友病患儿的长期预防治疗提供合理指导。方法募集2019年4月-2020年8月于沈阳市儿童医院门诊就诊的男性A型血友病患儿共17人,采集关节数共102个,经患儿及家属知情同意后,根据凝血因子Ⅷ预防治疗剂量不同将患儿分为标准剂量组（n=6）与低剂量组（n=11）,标准剂量组关节数36个,低剂量组关节数66个。标准剂量组凝血因子Ⅷ按照25-40IU/kg/次,每周3次或隔日1次给药,低剂量组凝血因子Ⅷ按照10IU/kg/次,每周2次给药。治疗1年后,收集两组患儿在治疗期间关节出血情况（关节出血次数与关节出血的人数）,并且通过关节超声评估以及关节健康状况表（Hemophilia joint health score,HJHS）综合分析两组患儿的各部位关节（膝关节、肘关节、踝关节）损伤程度,通过t检验对比分析标准剂量组与低剂量组经凝血因子Ⅷ预防治疗1年后关节滑膜增厚程度与关节积液量增加程度的变化情况。通过Wilcoxon秩和检验分析对比标准剂量组与低剂量组经凝血因子Ⅷ预防治疗1年后关节健康评估（HJHS）评分变化情况。最终根据对比结果明确A型血友病患儿在标准剂量与低剂量的凝血因子Ⅷ预防治疗后的关节远期进展情况以及关节损害差异。结果1.研究发现17例已经确诊的A型血友病患儿,标准剂量组患儿关节出血率为50%（3/6）,低剂量组患儿关节出血率为63.6%（7/11）。两组的关节出血状况无显着性差异（P>0.05）。2.关节滑膜厚度方面,对比两组各部位关节（双侧膝关节、双侧肘关节、双侧踝关节）滑膜厚度增加情况,标准剂量组与低剂量组无显着性差异（P>0.05）。3.关节积液量增加程度方面,标准剂量组与低剂量组的左、右肘关节、右侧踝关节积液量变化无显着性差异（P>0.05）,左、右膝关节与左侧踝关节积液量对比发现标准剂量组优于低剂量组,差异显着（P<0.05）。4.关节健康评估方面,对比两组HJHS评分发现标准剂量组优于低剂量组,差异显着（P<0.05）。5.标准剂量组经1年治疗后,各部位关节滑膜状况、关节积液以及HJHS评分对比入组时各数值无显着性差异（P>0.05）。6.低剂量组经1年治疗后,各部位关节滑膜状况、关节积液以及HJHS评分对比入组时各数值无显着性差异（P>0.05）。结论1.A型血友病患儿标准剂量预防治疗对于关节损伤的预防效果优于低剂量预防治疗。2.凝血因子Ⅷ标准剂量预防治疗与低剂量预防治疗均可在一定程度上延缓关节损伤的发生。
王艳娜[6]（2021）在《477例甘肃省血友病患者的临床资料分析》文中研究表明目的:评估甘肃省血友病患者的发病以及诊疗现状,进一步优化对甘肃省血友病患者的管理。方法:依据甘肃省血友病登记系统中的患者信息,通过电话、QQ、微信以及兰州大学第一医院HIS病例系统对凝血因子减少的506例患者进行资料完善,排除其他凝血因子减少患者25例、C型血友病患者4例,对477例A、B型血友病患者的临床资料进行回顾性分析。结果:1.凝血因子减少患者共506例,男性500人,女性6人。其中,A型血友病436例,包括轻型81例（18.5%）,中间型225例（51.7%）,重型130例（29.8%）。B型血友病41例,包括轻型12例（29.3%）,中间型19人（46.3%）,重型10例（24.4%）,C型4例,其他凝血因子缺乏患者25例。2.477例血友病患者分布的地区依次为定西、兰州、天水,其次为临夏回族自治州;2016年白银市确诊并登记12例,截至2020年确诊并登记47例,相比其他地区明显增多。登记病例中43.2%的患者有家族史。3.477例血友病患者中,最高学历为小学的患者102例（21.4%）,初中69例（14.5%）,高中或中专45例（9.4%）,大专16例（3.4%）,大学本科12例（2.5%）;就业患者43例（9.0%）,无业患者97例（23%）,间断就业患者4例（0.8%）,因疾病辍学29例（6.1%）。4.477例血友病患者中,外地疑难转诊患者316例（66.2%）;有243例（50.9%）医保为新型合作医疗保险,69例（14.5%）为居民医保,14例（2.9%）为城镇医保,29例（6.1%）明确无医保,29例（6.1%）患者没有医疗保险。5.477例血友病患者的首次出血平均年龄为4.16±7.17岁,中位年龄2.00岁;确诊平均年龄为6.41±9.24岁,中位确诊年龄3.00岁;首次替代治疗平均年龄为7.76±10.07岁,其中首次替代治疗中位年龄为4.00岁。平均延迟诊断年龄2.24±6.39岁。6.477例血友病患者,无论是A型还是B型出血部位以皮肤黏膜、关节、肌肉、牙龈最多。其中关节出血的患者320例（67.1%）,以膝关节出血最多。出血关节最多12个,最少1个,平均关节3.2个。关节出血的75例（33.9%）患者出现了关节畸形,最少1个,最多6个。7.477例血友病患者,不同程度的预防治疗的患者仅占6.3%（间断预防、临时预防）,79.7%的患者接受按需治疗,5.0%的患者从未接受过治疗。8.477例血友病患者中,37例（7.3%）有过抑制物检测,阳性7例（18.9%）。9.477例血友病患者中,乙肝病毒阳性率为2.6%、丙肝病毒阳性率为5.0%、梅毒阳性率为1.9%、人类免疫缺陷病毒（HIV）阳性率为2.5%。结论:1.我省血友病患者仍然有部分漏诊、或尚未登记,确诊病例以中间型与重型患者居多;2.定西、兰州、天水是确诊并登记最多的三个地区,白银市确诊并登记例数较2016年明显增多;对比临夏回族自治州人口数,该区域的血友病的发病率较高;3.血友病患者的整体学历水平较低,辍学与失业率较高;4.我省血友病患者农村户口居多,基层医疗不能满足患者的就医需求;5.甘肃省血友病患者首次出血年龄与全国相差不大,但确诊年龄明显延迟;6.甘肃省血友病患者关节畸形率高;7.治疗不及时,预防治疗患者占比较低;8.凝血因子抑制物检测率低;9.病毒感染率高,但较16年数据有改善;
杨月明[7]（2021）在《儿童重度血友病甲FⅧ类型与抑制物关系的荟萃分析》文中认为目的利用荟萃分析软件Rev Man（Review Manager）5.4和Stata 16对不同FⅧ（F8）基因突变类型的重度血友病甲患者中抑制物发生率进行统计学分析,拟得出儿童重度血友病甲抑制物产生相关的F8基因因素影响程度,获得较为全面的F8基因突变与抑制物产生的危险分级。方法英文以“haemophilia A”、“FⅧdeficiency”、“Gene*”、“mutation*”、“inhibitor*”,中文以“血友病甲”、“抑制物”、“遗传因素”、“基因突变”为关键词,系统检索Pub Med、Web of Science、Cochrane Library、EMBASE、万方医学、中国知网及维普等中英文数据库,获得2020年10月前发表的中英文血友病甲抑制物相关基因研究,整理所搜集的各种资料,利用荟萃分析软件Rev Man5.4和Stata16,对纳入文献进行统计学分析,计算比值比（OR）及其95%可信区间（CI）,并进行发表偏倚评估和敏感性分析。结果本研究共纳入27项针对10402例重度血友病甲患者的研究,其中2053例患者在病程中出现抑制物,其中639例为高滴度抑制物。研究中涉及F8基因突变类型包括:大片段缺失、无义突变、22内含子倒位、1内含子倒位、小片段缺失或插入、错义突变、剪接位点突变及其他未知突变。以22内含子倒位为参照计算不同类型F8基因突变抑制物产生风险,其中大片段缺失和无义突变中的抑制物风险高于22内含子倒位（大片段缺失OR=3.3;95%置信区间[95%CI]:3.14-4.93和无义突变OR=1.45;95%CI:1.24-1.7）,1内含子倒位风险未达到统计学差异（OR=0.92;95%CI:0.71-1.2）,以及剪接位点突变、小片段缺失或插入和错义突变的风险较低（剪接位点突变OR=0.48;95%CI:0.36-0.63,小片段缺失/插入OR=0.34;95%CI:0.29-0.4和错义突变OR=0.34;95%CI:0.29-0.4）。相对于22内含子倒位而言,产生高滴度抑制剂的风险大片段缺失的合并OR为3.05（95%CI:2.33-3.99）;无义突变为1.11（95%CI:0.85-1.18）;对于1内含子倒位,OR为0.62（95%CI:0.36-1.05）;对于小片段缺失或插入,OR为0.42（95%CI:0.31-0.56）;错义突变OR为0.48（95%CI:0.36-0.63）;对于剪接位点突变,OR为0.58（95%CI:0.35-0.97）。不同基因突变高滴度抑制物的相对风险与总体抑制物产生风险基本相似。结论对于重度血友病甲的患者来说,F8基因突变中大片段缺失和无义突变可能是该类患者产生抑制物的重要诱发因素,而发生剪接位点突变、小片段缺失或插入和错义突变患儿较少出现抑制物。
鲍莉雯,周一叶,曾凡一[8]（2020）在《基于CRISPR/Cas9技术的β-地中海贫血和血友病基因治疗研究进展》文中认为地中海贫血和血友病是由基因异常引发的常见的遗传性血液病,难以根治且可遗传给下一代,造成严重的家庭和社会负担。基因治疗的出现为遗传性疾病提供了新的治疗方案,但自1990年第1项基因治疗临床试验被批准以来,30年间基因治疗的发展并不乐观。随着基因编辑技术的发展,尤其具有编辑效率高、操作简单、成本低等优势的第三代基因编辑技术CRISPR/Cas9 （clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated protein 9）的发展,基因编辑介导的基因治疗越来越受到关注,有望根治地中海贫血和血友病等遗传性血液病。本文综述了近6年（2014～2020年）基于CRISPR/Cas9技术的β-地中海贫血和血友病基因治疗基础研究进展,总结了基于CRISPR/Cas9技术的基因治疗临床试验概况,并对CRISPR/Cas9技术用于基因治疗存在的问题和可能的解决方案进行探讨,以期为基于CRISPR/Cas9技术的遗传性血液病基因治疗相关研究提供参考。
刘嘉榆,郑梦琪,陈菡,李斌斌,汤维,章国卫[9]（2020）在《血友病基因治疗的研究进展》文中研究说明近年来,作为X性联隐性遗传病的血友病的基因治疗获得了较大的发展,文章围绕治疗基因、载体和靶细胞,总结血友病基因治疗的研究进展。造血干细胞和慢病毒结合的离体基因治疗模式可能成为血友病基因治疗的一条重要途径。靶向血小板表达的FVIII在抑制物存在下仍能起到治疗作用,为伴抑制物血友病患者的治疗提供了新的可能性。
李杰[10]（2020）在《腺病毒介导的血友病基因治疗实验研究》文中指出目的1通过将携带有B区缺失的凝血因子FVIII（B-domain-deleted human coagulant factor VIII,BDDh FVIII）的重组腺病毒载体（Ad-BDDh FVIII-GFP）及携带人凝血因子IX（human Coagulation Factor IX,h FIX）的重组腺病毒载体（AdFIX-GFP）转染的脂肪干细胞（adipose-derived stem cell,ADSC）进行传代培养,观察h FVIII、h FIX的表达情况,探讨BDDh FVIII及h FIX是否可以在ADSC内稳定表达;2通过将BDDh FVIII经过直接途径（in-vivo）和间接途径（ex-vivo）注射入血友病A（hemophilia A,HA）鼠体内,观察h FVIII在体内表达情况,探讨ADSC是否可以作为HA基因治疗的靶细胞载体。方法1 BDDh FVIII在ADSC内的稳定表达:实验分为4组,P0组:正常ADSC;P1组:Ad-BDDh FVIII-GFP首次转染ADSC;P2组:Ad-BDDh FVIII-GFP转染ADSC细胞传代后1代;P3组:Ad-BDDh FVIII-GFP转染ADSC细胞传代后2代。2 BDDh FVIII在体内表达情况:将Ad-GFP转染的ADSC（A组）、AdBDDh FVIII-GFP转染的ADSC（B组）、Ad-BDDh FVIII-GFP（C组）及Ad-GFP（D组）,经尾静脉注射入HA鼠体内,在注射前1周、注射后第1、7、14、21、28天采集血液标本,注射后第28天采集肝脏组织标本。3 h FIX在ADSC内稳定表达:实验分为4组,A组:Ad-FIX-GFP首次转染ADSC;B组:Ad-FIXGFP转染ADSC细胞传代后1代;C组:Ad-FIX-GFP转染ADSC细胞传代后2代;D组:正常ADSC。通过逆转录聚合酶链反应（Reverse transcriptionpolymerase chain reaction,RT-PCR）检测ADSC内及肝脏内基因转录,酶联免疫吸附试验（Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）法检测ADSC上清液及血浆中凝血因子抗原及免疫印迹试验（Western blot,WB）检测ADSC内及肝脏内携带凝血因子蛋白。结果1 BDDh FVIII在ADSC内的稳定表达:与P0组相比,P1组、P2组及P3组均可见到BDDh FVIII基因表达条带。h FVIII:Ag检测结果P1组（140.260±2.290ng/m L）、P2组（118.140±21.050ng/m L）、P3组（107.730±4.530ng/m L）水平高于P0组（80.02±0.21 ng/m L）,差异具有显着性（P<0.05）。h FVIII蛋白表达灰度值与P0组比较,P1组（0.630±0.070）、P2组（0.450±0.040）、P3组（0.250±0.020）明显升高,差异具有显着性（P<0.05）。2BDDh FVIII在体内表达:B组及C组血浆中均可见到h FVIII:Ag的升高,肝脏组织中BDDh FVIII基因转录及h FVIII蛋白结果显示,B组及C组结果为阳性。与A组及D组比较,差异具有显着性（P<0.05）。3 h FIX在ADSC内稳定表达:与D组相比,A、B、C组可检测到h FIX基因转录。h FIX:Ag结果显示A组（81.620±8.820ng/m L）、B组（52.496±3.246ng/m L）、C组（47.407±4.002ng/m L）明显高于D组（0.751±0.426ng/m L）,差异具有显着性（P<0.05）。h FIX蛋白表达灰度值与D组相比,A组（0.680±0.100）、B组（0.490±0.150）、C组（0.180±0.050）明显升高,差异具有显着性（P<0.05）。结论1 BDDh FVIII可以在ADSC内稳定表达,并可在HA鼠体内分泌凝血因子VIII,腺病毒介导的血友病A基因治疗在动物体内可以成功表达。2 Ad-h FIX-GFP转染后的ADSC可以稳定表达h FIX。3 ADSC可以作为血友病基因治疗的靶细胞载体。图13幅;表13个;参135篇。
二、血友病A的基因治疗研究进展（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、血友病A的基因治疗研究进展（论文提纲范文）
（1）血友病AAV载体基因治疗研究进展（论文提纲范文）
| 1 血友病基因治疗的发展现状 |
| 2 AAV载体介导的血友病基因治疗 |
| 2.1 作用机制 |
| 2.2 治疗后潜在的风险 |
| 2.3 目前研究的主要障碍 |
| 3 结论与展望 |
（3）干细胞疗法在血友病性关节炎治疗中的应用进展（论文提纲范文）
| 1 治疗HA的干细胞类型 |
| 2 基于HSC的基因治疗 |
| 2.1 基于HSC的基因治疗的优势 |
| 2.2 基于HSC的基因治疗的安全性 |
| 2.3 基于HSC的基因治疗存在的问题 |
| 3 基于MSC的细胞治疗 |
| 3.1 基于MSC的细胞治疗的作用机制 |
| 3.1.1 止血 |
| 3.1.2 免疫调节 |
| 3.1.3 骨与软骨修复 |
| 3.2 基于MSC的细胞治疗存在的问题 |
| 4 小 结 |
（4）腺病毒介导的B型血友病基因治疗研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略表 |
| 引言 |
| 第1章 实验研究 |
| 1.1 材料与方法 |
| 1.1.1 实验动物 |
| 1.1.2 重组腺病毒载体 |
| 1.1.3 细胞系与细胞株 |
| 1.1.4 主要试剂与仪器 |
| 1.1.5 实验试剂配制 |
| 1.1.6 ADSCs的提取及传代培养 |
| 1.1.7 ADSCs冻存及复苏 |
| 1.1.8 hFIX在SD大鼠ADSCs内的稳定表达 |
| 1.1.9 Ad-hFIX-GFP在血友病B鼠体内表达情况 |
| 1.1.10 统计学方法 |
| 1.2 结果 |
| 1.2.1 ADSCs复苏后观察 |
| 1.2.2 Ad-hFIX-GFP转染SD大鼠ADSCs及转染后传代荧光图 |
| 1.2.3 RT-PCR检测转染ADSCs及传代后hFIX基因表达 |
| 1.2.4 Western blot检测转染ADSCs及传代后hFIX蛋白表达 |
| 1.2.5 ELISA检测转染ADSCs及传代后hFIX:Ag表达水平 |
| 1.2.6 RT-PCR检测HB鼠组织中hFIX基因表达 |
| 1.2.7 Western blot检测HB鼠组织中hFIX蛋白表达 |
| 1.2.8 ELISA检测各组HB鼠血浆中hFIX:Ag表达水平 |
| 1.3 讨论 |
| 1.4 小结 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 第2章 综述 血友病的基因治疗进展 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 替代治疗 |
| 2.3 新型替代治疗 |
| 2.3.1 延长半衰期药物 |
| 2.3.2 非因子疗法 |
| 2.4 基因治疗 |
| 2.4.1 病毒载体 |
| 2.4.2 细胞疗法 |
| 2.4.3 基因编辑技术 |
| 2.5 展望与不足 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在学期间研究成果 |
（5）应用标准剂量与低剂量凝血因子Ⅷ预防治疗对A型血友病患儿关节损伤的疗效对比分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略语 |
| 前言 |
| 资料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 一、综述 儿童血友病关节进展及诊疗 |
| 参考文献 |
| 二、在学期间科研成绩 |
| 三、致谢 |
| 四、个人简介 |
（6）477例甘肃省血友病患者的临床资料分析（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一章 前言 |
| 1.1 血友病的发病率及死亡率 |
| 1.2 凝血因子抑制物 |
| 1.3 血友病性关节病的机制 |
| 1.4 血友病的治疗 |
| 1.4.1 当前治疗方案 |
| 1.4.2 治疗进展 |
| 第二章 研究对象和方法 |
| 2.1 研究对象 |
| 2.2 研究方法 |
| 2.3 统计学处理 |
| 第三章 结果 |
| 3.1 基本资料 |
| 3.1.1 民族特征 |
| 3.1.2 分布地区 |
| 3.1.3 婚姻状态 |
| 3.1.4 家族史 |
| 3.1.5 就业情况 |
| 3.1.6 最高学历 |
| 3.1.7 病人类型 |
| 3.1.8.医保类型 |
| 3.1.9 诊断诱因 |
| 3.2 临床特征 |
| 3.2.1 年龄特征 |
| 3.2.2 首次出血部位 |
| 3.2.3 整个疾病程中出血部位 |
| 3.2.4 初次治疗时使用的药品 |
| 3.2.5 治疗方式 |
| 3.2.6 抑制物 |
| 3.3 病毒学 |
| 3.4 关节状态 |
| 3.5 住院治疗情况 |
| 第四章 讨论 |
| 第五章 结论 |
| 参考文献 |
| 在学期间学术成果 |
| 综述 血友病的治疗研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（7）儿童重度血友病甲FⅧ类型与抑制物关系的荟萃分析（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| (一)前言 |
| (二)材料与方法 |
| 1.检索方法 |
| 2.研究对象 |
| 3.纳入排除标准 |
| 3.1 纳入标准 |
| 3.2 排除标准 |
| 4.资料筛选和质量评价 |
| 5.数据提取与统计学分析 |
| 5.1 数据提取 |
| 5.2 统计学分析 |
| 5.3 资料评估 |
| (三)结果 |
| 1.研究选择 |
| 2.纳入研究 |
| 2.1 研究的基本特征 |
| 2.2 纳入人群 |
| 2.3 结果类型 |
| 2.4 单个研究的结果 |
| 3.Meta分析结果 |
| 3.1 纳入文献的质量评价 |
| 3.2 F8基因型的分布 |
| 3.3 F8基因突变类别与抑制物产生风险 |
| 3.4 异质性分析 |
| 3.5 敏感性分析 |
| (四)讨论 |
| (五)结论 |
| (六)参考文献 |
| 综述 儿童血友病甲抑制物产生因素研究进展 |
| 1、儿童血友病甲抑制物的非遗传性高危因素 |
| 2、儿童血友病甲抑制物的遗传性高危因素 |
| 3、总结 |
| 4、存在问题 |
| 5、展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（8）基于CRISPR/Cas9技术的β-地中海贫血和血友病基因治疗研究进展（论文提纲范文）
| 1 遗传性血液病基因治疗概况 |
| 2 基于CRISPR/Cas9技术的遗传性血液病基因治疗策略 |
| 2.1 原位修复突变基因 |
| 2.1.1 CRISPR/Cas9介导的外显子点突变/移码突变的修复 |
| 2.1.2 CRISPR/Cas9介导的内含子点突变的修复 |
| 2.1.3 CRISPR/Cas9介导的内含子倒位的修复 |
| 2.1.4 单碱基编辑技术介导的原位修复 |
| 2.2 调控基因表达 |
| 3 CRISPR/Cas9治疗策略与其他基因疗法的比较 |
| 4 基于CRISPR/Cas9技术的基因治疗临床研究 |
| 5 结语和展望 |
（9）血友病基因治疗的研究进展（论文提纲范文）
| 1 治疗基因 |
| 1.1 FIX基因 |
| 1.2 FVIII基因 |
| 2 载体 |
| 2.1 腺相关病毒载体 |
| 2.2 慢病毒载体 |
| 2.3 CRISPR/Cas9 |
| 3 靶细胞 |
| 3.1 肝细胞 |
| 3.2 造血干细胞及多种血细胞 |
| 4 结论 |
（10）腺病毒介导的血友病基因治疗实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 英文缩略表 |
| 引言 |
| 第1章 实验研究 |
| 1.1 材料与方法 |
| 1.1.1 实验动物 |
| 1.1.2 重组腺病毒载体 |
| 1.1.3 .细胞系与细胞株 |
| 1.1.4 主要试剂 |
| 1.1.5 主要仪器与设备 |
| 1.1.6 主要溶液配制 |
| 1.1.7 ADSC的提取及培养 |
| 1.1.8 ADSC的冻存 |
| 1.1.9 BDDh FVIII在 ADSC内的稳定表达 |
| 1.1.10 BDDh FVIII在血友病A鼠体内表达情况 |
| 1.1.11 Ad-h FIX-GFP转染ADSC后凝血因子稳定表达 |
| 1.1.12 统计学方法 |
| 1.2 结果 |
| 1.2.1 ADSC复苏后状态观察 |
| 1.2.2 Ad-BDDh FVIII-GFP转染ADSC及转染后传代荧光图 |
| 1.2.3 转染后ADSC的成骨诱导检测 |
| 1.2.4 RT-PCR检测转染后ADSC传代后BDDh FVIII基因表达 |
| 1.2.5 Western blot检测转染后细胞及传代后h FVIII表达 |
| 1.2.6 ELISA检测转染后细胞及传代后h FVIII:Ag表达 |
| 1.2.7 ELISA检测血友病A鼠血浆中h FVIII:Ag水平 |
| 1.2.8 RT-PCR检测肝脏BDDh FVIII基因表达 |
| 1.2.9 Western blot检测肝脏h FVIII蛋白表达 |
| 1.2.10 Ad-h FIX-GFP转染小鼠ADSC及转染后传代荧光图 |
| 1.2.11 RT-PCR检测转染后ADSC传代后h FIX基因表达 |
| 1.2.12 Western blot检测转染后细胞及传代后h FIX蛋白表达 |
| 1.2.13 ELISA检测转染后细胞及传代后h FIX:Ag表达 |
| 1.3 讨论 |
| 1.4 小结 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 第2章 综述 |
| 2.1 血友病小鼠模型的初次构建 |
| 2.2 血友病小鼠模型特点的研究 |
| 2.3 血友病小鼠模型的改进 |
| 2.4 锌指核酸酶技术构建血友病鼠模型 |
| 2.5 CRISPR/Cas系统构建血友病鼠模型 |
| 2.6 总结及展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在学期间研究成果 |
四、血友病A的基因治疗研究进展（论文参考文献）
- [1]血友病AAV载体基因治疗研究进展[J]. 代新岳,张磊. 中国细胞生物学学报, 2022(01)
- [2]血友病患者关节评估及治疗的研究进展[J]. 王稳,胡群. 国际输血及血液学杂志, 2021(05)
- [3]干细胞疗法在血友病性关节炎治疗中的应用进展[J]. 沈绍宁,吴东晓,吕帅洁,肖鲁伟,童培建. 中医正骨, 2021(07)
- [4]腺病毒介导的B型血友病基因治疗研究[D]. 孙庆云. 华北理工大学, 2021
- [5]应用标准剂量与低剂量凝血因子Ⅷ预防治疗对A型血友病患儿关节损伤的疗效对比分析[D]. 郭佳慧. 沈阳医学院, 2021(10)
- [6]477例甘肃省血友病患者的临床资料分析[D]. 王艳娜. 兰州大学, 2021(12)
- [7]儿童重度血友病甲FⅧ类型与抑制物关系的荟萃分析[D]. 杨月明. 大连医科大学, 2021(01)
- [8]基于CRISPR/Cas9技术的β-地中海贫血和血友病基因治疗研究进展[J]. 鲍莉雯,周一叶,曾凡一. 遗传, 2020(10)
- [9]血友病基因治疗的研究进展[J]. 刘嘉榆,郑梦琪,陈菡,李斌斌,汤维,章国卫. 健康研究, 2020(04)
- [10]腺病毒介导的血友病基因治疗实验研究[D]. 李杰. 华北理工大学, 2020(02)