一、HSPG对培养的人血管壁细胞增殖和PG合成的影响及其可能机制（论文文献综述）
王一同[1]（2021）在《华蟾素注射液治疗结肠癌腹水的优效人群分析及对VM的作用机制研究》文中指出研究背景恶性腹水是晚期结肠癌患者的常见并发症,是临床治疗的难点。西医目前主要采用腹腔穿刺置管引流、全身化疗或联合腹腔灌注化疗等方法,但恶性腹水患者多为肿瘤晚期,经过多程放、化疗治疗,体质较差,再次化疗的敏感性及耐受性降低,且恶性腹水多为血性,无法大量置管引流,使腹胀、喘憋等症状持续存在,严重影响生活质量。因此需探索更为温和、有效的治疗方法。中药腹腔灌注,可避免口服汤药引起的胃肠不适,副反应小,近年来广泛应用于恶性腹水的临床治疗。本团队致力于华蟾素注射液腔内灌注治疗研究多年,发现华蟾素注射液对恶性浆膜腔积液有一定的疗效,庄等研究发现,华蟾素注射液腔内灌注治疗恶性浆膜腔积液,有效率为66.42%;杨等研究发现,华蟾素注射液腔内灌注对于恶性胸水有效率为60.00%;袁等研究发现,华蟾素注射液对于消化系统肿瘤来源恶性腹水有效率为75.4%,疗效更好,但前期研究对于不同癌种患者分层后病例数较少,未进行具体分层讨论。恶性腹水的生成与血管新生密切相关。本团队前期基础研究发现华蟾素注射液能够降低恶性腹水中的红细胞数量,使腹水颜色变浅,推测华蟾素注射液可能通过抑制肿瘤血管新生干预恶性腹水的生成。血管生成拟态（Vasculogenic Mimicry,VM）是近年来提出的全新肿瘤血管新生模式,可能与传统内皮细胞参与的肿瘤血管新生共同促进恶性腹水的生成。既往多数研究关注在华蟾素对内皮细胞参与的肿瘤血管新生的影响,鲜有研究探究华蟾素对VM形成的影响。研究目的临床部分:明确华蟾素注射液腹腔灌注治疗对于结肠癌这一单一病种来源的恶性腹水的疗效及该治疗方法对应的优效人群特征,以期为华蟾素注射液腹腔灌注治疗结肠癌恶性腹水提供更为个体化的临床指导。实验部分:由临床现象探索内在机制。以VM为新切入点,通过体内、体外实验观察华蟾素注射液对结肠癌HCT116细胞VM形成的影响及作用机制,从而更为全面地从肿瘤血管新生角度阐述华蟾素注射液腹腔灌注抑制结肠癌恶性腹水的作用机制。研究方法临床部分:采用单臂回顾性研究方法,收集2010年1月1日～2020年12月31日于北京中医药大学东方医院肿瘤科行华蟾素注射液腹腔灌注治疗的结肠癌恶性腹水的患者临床资料,从腹水量控制率、腹水质改善率、KPS评分改善情况及患者生存期方面进行疗效评价,同时评价安全性。进一步对比不同因素（如肿瘤原发病特点、转移情况、整体及局部中医辨证分型、合并全身治疗等）对疗效的影响,从中筛选优效病例,总结优效人群特征。实验部分:（1）采用结肠癌HCT116细胞腹腔+脾脏原位接种法建立BALB/C裸鼠结肠癌血性腹水模型;观察造模前后及华蟾素注射液干预前后裸鼠一般体征、体重、腹围、腹水量、腹水红细胞数量及腹腔转移瘤瘤重等。（2）采用CoCl2化学诱导建立结肠癌HCT116细胞体外缺氧模型;采用CCK-8实验、细胞划痕实验、Transwell实验检测缺氧微环境及华蟾素注射液对结肠癌HCT116细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。（3）采用Matrigel基质胶细胞三维培养建立结肠癌HCT116细胞体外VM模型;通过PAS-CD31组织化学与免疫组化双染法显示结肠癌HCT116细胞体内VM的形成;显微镜下计数VM形成数目,观察缺氧微环境及华蟾素注射液对结肠癌HCT116细胞体内、体外VM形成的影响。（4）采用RT-qPCR、Western-blot实验检测缺氧微环境及华蟾素注射液对结肠癌 HCT116 细胞 VM 形成相关靶点 HIF-1α、VEGF、MMP2、MMP9、VE-cadherin mRNA及蛋白表达的影响。研究结果临床部分:（1）腹水量疗效评价:研究共纳入135例患者。灌注后腹围较灌注前显着减小（P<0.01）;完全缓解2例,部分缓解25例,稳定56例,合计有效83例,无效52例,总有效率61.5%。（2）腹水质疗效评价:灌注后腹水红细胞数、腹水肿瘤标记物、腹水乳酸脱氢酶水平较灌注前显着下降（P<0.01）;腹水红细胞较治疗前下降≥25%者94例,总有效率74.0%;腹水肿瘤标记物较灌注前下降≥25%者70例,总有效率55.1%,其中CEA、CA199、CA724水平下降显着,铁蛋白水平较灌注前差异无统计学意义（P>0.05）;腹水乳酸脱氢酶较治疗前下降≥25%者50例,总有效率39.4%。（3）KPS评分疗效评价:灌注后KPS评分较灌注前显着提高（P<0.01）;较治疗前提高者41例,较治疗前稳定者82例,较治疗前减少者12例。（4）生存情况疗效评价:纳入患者截至末次随访,仍存活者2例,腹水生存期为1～31个月,平均腹水生存期5.66±4.59个月,中位腹水生存期4.00个月;腹水1年生存率为9.6%,2年生存率为3.7%,未见大于3年生存者。（5）安全性评价:出现不良反应者27例,占比20.0%,主要不良反应为腹痛（10例）、发热（11例）、恶心呕吐（3例）、腹泻（3例）,多可耐受或对症治疗后可较快缓解,为1级轻度不良反应。未见由药物引起的骨髓抑制、肝、肾功能异常及心电图改变,未见腹腔感染、肠梗阻、消化道出血等严重并发症,安全性良好。（6）短期疗效优效人群特征分析:对于男性、有饮酒史、左半结肠、灌注前血液NLR≤2.81、初诊即诊断恶性腹水、血性腹水、全身辨证含瘀毒证,全身辨证非肝肾阴虚证、局部辨证为湿热毒证及合并全身中医治疗患者的腹水量控制方面疗效更好,其中结肠癌位置、腹水性质、合并全身中医治疗是影响腹水量控制率的独立预后因素;对于有饮酒史、无肝转移、有腹腔淋巴结转移、无胆红素升高、血性腹水、局部辨证为湿热毒证及合并全身中医治疗患者的腹水颜色改善方面疗效更好,其中肝转移、胆红素升高、腹水性质、局部辨证为影响腹水颜色改善率的独立预后因素。（7）长期疗效优效人群特征分析:有家族史、左半结肠、无肝转移、无脑转移、转移部位≤2个、灌注前无血中乳酸脱氢酶升高、初诊即诊断恶性腹水、全身辨证非肝肾阴虚证、无不良反应及腹水量得到控制的患者腹水生存期更长,但与外部研究结果对比生存期未见明显延长。实验部分:（1）结肠癌HCT116细胞腹腔+脾脏原位接种可建立较为稳定的BALB/C裸鼠结肠癌血性腹水模型;Matrigel基质胶细胞三维培养可建立结肠癌HCT116细胞体外VM模型。（2）华蟾素注射液腹腔注射可抑制结肠癌血性腹水的生成、降低腹水中红细胞数目,抑制结肠癌腹腔转移瘤的生成。（3）缺氧微环境可促进结肠癌HCT116细胞迁移、侵袭,增强体外VM的形成能力。（4）华蟾素注射液可逆转缺氧对HCT116细胞造成的不良影响,抑制其增殖、迁移、侵袭及体内、体外VM的形成。（5）缺氧微环境可上调HCT116细胞HIF-1α、VEGF、MMP2、MMP9、VE-cadherin mRNA及蛋白的表达,华蟾素注射液干预后可抑制HIF-1α、VEGF、MMP2、VE-cadherinmRNA及蛋白表达,对MMP9 mRNA及蛋白未见显着影响。研究结论临床部分:（1）华蟾素注射液腹腔灌注可有效抑制结肠癌恶性腹水的产生,延缓病情进展,降低腹水中的红细胞数量,提高KPS评分,改善患者生活质量,安全性良好;（2）左半结肠癌、无肝转移、无胆红素升高、血性腹水、局部辨证为湿热毒证及合并全身中医治疗的患者是华蟾素注射液腹腔灌注治疗的优效人群,通过人群特征初步筛选后用药可提高临床疗效。实验研究:华蟾素注射液腹腔灌注抑制结肠癌血性腹水的机制,可能与其逆转肿瘤缺氧微环境,下调HIF-1α、VEGF、MMP2、VE-cadherin mRNA及蛋白的表达从而抑制结肠癌细胞体内、体外VM的形成,同时抑制结肠癌细胞增殖、迁移及腹腔侵袭有关。
张广辉[2]（2020）在《血清PDGF-BB/PDGFR-β配体受体及MCP-1、MMP-9水平与冠心病血瘀证的相关性研究》文中研究表明目的:本研究采用酶联免疫吸附法检测冠心病血瘀证患者外周静脉血血清血小板衍生生长因子-BB（PDGF-BB）、血小板衍生生长因子受体-β（PDGFR-β）、单核细胞趋化因子-1（MCP-1）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）表达水平,采用RT-PCR技术检测冠心病血瘀证患者外周静脉血单核细胞中的PDGFR-β mRNA表达水平。并通过分析比较上述指标在冠心病患者与健康人群之间表达水平的差异性,进而探究冠心病与上述指标的相关性。并同时分析比较上述指标在冠心病血瘀证患者与非血瘀证患者之间表达水平的差异性,进而探究冠心病血瘀证与上诉指标的相关性。为冠心病血瘀症的病理机制与临床诊断提供更多的生物学基础与参考依据。方法:选取2019年9月至2020年1月,于中国中医科学院广安门医院心血管内科接受住院治疗的冠心病患者128例,并纳入同期在广安门医院南区体检中心的30例健康体检者作为健康对照组。参照2016年中国中西医结合学会活血化瘀专业委员会制定的《冠心病血瘀证诊断标准》将128例冠心病患者分为血瘀证组（87例）与非血瘀证组（41例）。于入院第二天清晨抽取所有受试者的空腹静脉血,采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测外周静脉血血清PDGF-BB、PDGFR-β、MCP-1、MMP-9水平,并采用RT-PCR技术检测外周静脉血单核细胞中PDGFR-β mRNA表达水平,并同时收集整理所有入组受试者的一般资料、血常规、生化全项等相关临床检验数据。所得数据采用SPSS 22.0统计软件进行统计学分析处理。结果:1、冠心病组血清PDGF-BB、PDGFR-β、MCP-1与MMP-9水平较健康对照组均明显升高,差异具有显着性统计学意义（p<0.01）。2、冠心病组外周血单核细胞PDGFR-β mRNA表达水平较健康对照组明显升高,差异具有显着性统计学意义（p<0.01）。3、冠心病与 PDGF-BB、PDGFR-β、MCP-1、MMP-9、PDGFR-β mRNA 均呈正相关。4、冠心病血瘀证组血清PDGF-BB、PDGFR-β、MCP-1与MMP-9水平较冠心病非血瘀证组均明显升高,差异具有显着性统计学意义（p<0.01）。5、冠心病血瘀证组外周血单核细胞PDGFR-β mRNA表达水平较冠心病非血瘀证组明显升高,差异具有显着性统计学意义（p<0.01）。6、冠心病血瘀证与 PDGF-BB、PDGFR-β、MCP-1、MMP-9、PDGFR-β mRNA 均呈正相关。结论:1、冠心病患者血清PDGF-BB、PDGFR-β、MCP-1与MMP-9水平升高。2、冠心病患者外周血单核细胞PDGFR-β mRNA表达水平升高。3、冠心病与 PDGF-BB、PDGFR-β、MCP-1、MMP-9、PDGFR-β mRNA 均呈正相关。4、冠心病血瘀证患者血清PDGF-BB、PDGFR-β、MCP-1与MMP-9水平升高。5、冠心病血瘀证患者外周血单核细胞PDGFR-β mRNA表达水平升高。6、冠心病血瘀证与 PDGF-BB、PDGFR-β、MCP-1、MMP-9、PDGFR-β mRNA 均呈正相关。
贾文浩[3]（2020）在《基于NF-κB通路探究益气凉血生肌方干预兔颈动脉球囊损伤修复的机制》文中进行了进一步梳理背景:随着现代医学对冠心病（coronary artery disease,CAD）研究的不断深入,经皮冠状动脉介入治疗（percutaneous coronary intervention,PCI）已成为CAD的重要治疗手段。但PCI术也带来了如缺血再灌注损伤、晚期支架内血栓及支架内再狭窄（in-stent restenosis,ISR）等新的问题与挑战,严重降低了患者获益。炎症反应是PCI术后发生主要不良心血管事件（major adverse cardiac event,MACE）的关键机制之一。PCI术由于异物的置入使血管局部机械损伤,损伤后的修复过程涉及血管内膜的炎症反应,包括血管内皮损伤、血小板和白细胞聚集、趋化因子和炎性因子等产生,内皮修复不良或延迟修复是发生MACE的主要原因。Toll样受体4（toll like receptor 4,TLR4）作为哺乳动物TLR家族里第一个被发现的膜受体,连接着天然免疫和获得性免疫。TLR4活化后可以激活核因子κκB（nuclear factor κB,NF-κB）,继而诱发一系列的炎症反应,释放各种致炎细胞因子、趋化因子等,导致不良事件的发生。目的:通过构建兔颈总动脉球囊损伤内皮剥脱模型,基于NF-κB通路探究益气凉血生肌方改善损伤血管内皮功能、减轻球囊损伤术后兔颈动脉炎症反应的作用与机制。方法:1.动物造模:选取6月龄雄性新西兰大耳白兔,构建颈总动脉球囊损伤模型。2.分组及给药:除正常对照组（N组）与假手术组（S组）外,术后大耳白兔随机分为模型组（M组,生理盐水）,益气凉血生肌方低浓度组（YL组,相当于生药1.5 g/kg/d）,益气凉血生肌方中浓度组（YM组,相当于生药3.0 g/kg/d）,益气凉血生肌方高浓度组（YH组,相当于生药6.0g/kg/d）,西药组（P组,阿托伐他汀钙片）。3.检测方法及指标:（1）每周记录动物体重及生理状态。（2）术后4周,超声检测血管血流情况,包括内中膜厚度IMT、收缩期峰值流速PSV、舒张末期流速EDV及阻力指数RI。（3）术后4周,HE染色及EVG染色评价血管形态结构改变,包括内膜厚度（intimal thickness,IT）及中膜厚度（media thickness,MT）,管腔面积（luminal area,LA）、内膜面积（intimal area,IA）及中膜面积（media area,MA）。（4）术前及术后1天、3天、7天、14天、28天采血行Elisa检测,包括NO、ET-1、IL-6、TNF-α及hs-CRP水平。（5）术后4周,流式细胞术及免疫荧光检测血管内皮细胞（vascular endothelial cell,VEC）及血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cell,VSMC）的占比和分布变化。（6）术后4周,RT-PCR及Western blot法检测TLR4、MyD88、NF-κB、TNF-α及ICAM-1的mRNA及蛋白表达水平。（7）术后4周,透射电镜观察超微结构。结果:1.实验中动物健康状况良好,各组各时间节点体重差异无统计学意义（P>0.05）。2.超声检测结果比较:术后4周,与N组相比,M组IMT、PSV及RI明显增大,EDV明显减小（P<0.05）;与M组相比,YL、YM、YH及P组IMT、PSV及RI明显减小,EDV明显增大（P<0.05）;与P组相比,YM及YH组IMT减小程度更明显（P<0.05）。3.病理分析结果比较:（1）HE染色结果比较:术后4周,N组及S组血管形态大致正常;在M、YL、YM、YH及P组中,其血管形态均较正常形态迂曲变形,各组管腔内壁均不光滑,呈现不规则改变,管腔面积明显减小,其中M组最为严重,各治疗组相较于M组均有不同程度的改善,其中YM组改善最为明显。（2）EVG染色结果比较:术后4周,与N组相比,M组LA明显减少,IT、MT、IT/MT、IA、MA及IA/MA方面均明显增加（P<0.05）;与M组相比,YL组LA明显增加,IT、IT/MT、IA、MA及IA/MA方面均明显减少（P<0.05）,YM组LA明显增加,IT、MT、IT/MT、IA、MA及IA/MA方面均明显减少（P<0.05）,YH组LA明显增加,IT、MT、IA、MA及IA/MA方面均明显减少（P<0.05）,P组LA明显增加,IT、IT/MT、IA、MA及IA/MA方面均明显减少（P<0.05）;与P组相比,YM组在MA改善方面优于P组（P<0.05）。4.Elisa结果比较:术前,各组NO、ET-1、IL-6、TNF-α及hs-CRP水平差异无统计学意义（P>0.05）;术后1天,与N组比较,M组NO水平明显降低,ET-1、IL-6、TNF-α及hs-CRP水平明显升高（P<0.05）;术后3天、7天、14天及28天,与M组相比,YL、YM、YH及P组NO水平明显升高,ET-1、IL-6、TNF-α及hs-CRP水平明显降低（P<0.05）。5.流式细胞检测结果比较:术后4周,与N组相比,M组VEC占比减小,VSMC占比增大（P<0.05）,与M组相比,YL、YM、YH及P组VEC占比增大,VSMC占比减小（P<0.05）,与P组相比,YM及YH组VEC占比增大,VSMC占比减小（P<0.05）。6.免疫荧光检测比较:术后4周,与N组相比,M组VWF荧光减弱,α-actin荧光增强;与M组相比,YL、YM、YH及P组VWF荧光增强,α-actin荧光减弱,其中,以LM组变化最为明显。7.RT-PCR结果比较:术后4周,与N组相比,M组TLR4、MyD88、NF-κB、TNF-α及 ICAM-1 mRNA 表达水平增加（P<0.05）;与 M 组相比,YL、YM、YH及 P 组 TLR4、MyD88、NF-κB、TNF-α及 ICAM-1 mRNA 表达水平降低（P<0.05）。8.Western blot结果比较:术后4周,与N组相比,M组TLR4、MyD88、NF-κB、TNF-α、ICAM-1 蛋白表达增加（P<0.05）;与 M 组相比,YM 及 P 组 TLR4、TNF-α、ICAM-1蛋白表达减小,YM、YH及P组MyD88、NF-κB蛋白表达减小（P<0.05）。9.透射电镜结果比较:术后4周,N组及S组颈动脉血管内膜可见VEC形态正常,光滑完整,VSMC形态正常,胞体内染色质分布均匀,多见含量不等的内质网和线粒体等细胞器,未见脂滴沉积。M组VEC明显损伤,数量减少,不易观察;VSMC胞浆内细胞器数量增加,充满扩张肿胀的线粒体及粗面内质网,见大量脂滴。YL、YM、YH及P组VEC均有不同程度的损伤,细胞形态不规则,YM及P组形态变形程度较轻;VSMC内细胞器数量轻度增加,内质网、线粒体及高尔基体数量较M组少,可见少量脂滴。结论:1.益气凉血生肌方对球囊损伤术后兔颈动脉具有促进修复的作用,促进VEC增殖修复,抑制VSMC增殖迁移,改善损伤血管内皮功能。2.益气凉血生肌方可减轻兔颈动脉球囊损伤术后炎症反应,其机制可能与抑制TLR4/NF-κB通路有关。
赵健[4]（2020）在《不同品系Apoe-/-小鼠颈动脉结扎后内膜增生的比较及N-乙酰半胱氨酸（NAC）的干预研究》文中认为目的:脑卒中是我国成年人致残的重要原因,严重影响病患的劳动能力和生活质量。颈动脉动脉硬化是缺血性脑卒中的主要原因之一,颈动脉狭窄或闭塞的介入腔内治疗短期效果良好,但动脉成形术后再狭窄或闭塞仍是目前临床治疗面临的难题。动脉内膜增生是介入治疗后再狭窄的主要病理过程,前期的研究发现载脂蛋白E敲除的小鼠高脂饮食条件下结扎颈动脉可以在短期内出现颈动脉硬化病变,病变从由巨噬细胞源性泡沫细胞组成的脂肪条纹发展到包含平滑肌细胞的纤维斑块,再发展到含有新生血管的严重管腔狭窄,在增生的动脉内膜中我们可以观察到巨噬细胞、中性粒细胞浸润和中层迁移而来的血管平滑肌细胞（VSMC）,前期的研究发现局部的炎症反应和氧化应激是影响血管平滑肌细胞迁移和增殖的影响因素。C3H/HeJ（C3H）和C57BL6（B6）载脂蛋白E敲除小鼠在动脉硬化遗传易感性存在较大差异,分析这两种品系小鼠动脉内膜增生病变成分的差异有助于分析二者动脉硬化遗传易感性差异的机制。本研究首先通过比较上述两种品系小鼠高脂饮食下动脉内膜增生病变的成分差异,分析出可能影响早期动脉内膜增生的因素。然后通过干预病变巨噬细胞、中性粒细胞浸润和干预病变局部的氧化应激水平,观察其对动脉硬化易感的B6载脂蛋白E敲除小鼠动脉内膜增生病变的影响,分析可能的主要影响因素。最后通过细胞实验,明确N-乙酰半胱氨酸（NAC）能否调节ox-LDL刺激后血管平滑肌细胞的氧化应激水平,与血管平滑肌细胞的增殖和迁移的关系,及其对血管平滑肌细胞炎性因子的分泌影响。研究方法:1、在动物实验中,A组两种性别的B6-Apoe-/-和C3H-Apoe-/-小鼠在6周龄时开始高脂饮食,并持续12周,获取双侧颈动脉标本。B组选用4-8周龄的两种性别的B6-Apoe-/-和C3H-Apoe-/-小鼠,进行左侧颈动脉动脉结扎手术,术前1周开始喂饲高脂饮食,术后继续给予高脂饮食,结扎术后1天、3天、1周、2周、4周安乐死小鼠,获得双侧颈动脉标本;ELISA法检测分析空腹血脂水平,组织病理学测量比较动脉内膜增生面积、动脉中层面积等形态学指标。免疫组织化学方法分析病变的细胞成分。干预实验中,C组选用8周龄的两种性别的Mep1α-/-/Apoe-/-小鼠进行左侧颈动脉动脉结扎手术,术前1周及术后持续给予高脂饮食,颈动脉结扎术前1天开始每隔一天腹腔注射抗Ly6G抗体250微克/只治疗,持续4周,对照组腹腔注射生理盐水。术后4周安乐死小鼠,获取心脏及双侧颈动脉;D组选用5-12周龄的两种性别的B6-Apoe-/-小鼠进行左侧颈动脉动脉结扎手术,术前1周及术后给予高脂饮食,颈动脉结扎术前1天开始每隔2天腹腔注射抗CSF-1R抗体（AFS98）200微克/只治疗,持续2周,对照组注射生理盐水。术后2周安乐死小鼠,获取肝脏及双侧颈动脉组织;E组选用8周龄的两种性别的B6-Apoe-/-小鼠进行左侧颈动脉动脉结扎手术,术前1周及术后给予高脂饮食,术前1周开始N-乙酰半胱氨酸（NAC）按照1.5g/每公斤体重/每天和20g小鼠每日饮水约4-6ml计算,将NAC混于小鼠的饮用水中,术后继续口服混有NAC的饮用水,持续4周。对照组口服正常饮用水,术后4周安乐死小鼠,获取双侧颈动脉。病理学检查比较动脉内膜增生面积。免疫组织化学分析颈动脉内膜病变、主动脉根部病变及肝脏组织的特定细胞成分。ELISA法检测动物血浆炎性因子分泌水平。2、细胞实验使用人血管平滑肌细胞系,以50μg/ml的ox-LDL刺激血管平滑肌细胞,MTT法检测血管平滑肌细胞的增殖能力,划痕试验检测血管平滑肌细胞的迁移能力,流式细胞学方法测量血管平滑肌ROS水平。ELISA法检测细胞培养液中单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-10（IL-10）和分光光度法检测一氧化氮NO的水平。结果:1、在喂饲高脂饮食12周后,B6-Apoe-/-和C3H-Apoe-/-小鼠均出现了严重的高脂血症,C3H-Apoe-/-小鼠与B6-Apoe-/-小鼠相比,具有更高的血浆血脂水平。在未干扰颈动脉血流的情况下,高脂饮食12周后,B6-Apoe-/-小鼠出现进展期动脉粥样硬化病变,而C3H-Apoe-/-小鼠没有病变。而在结扎颈动脉后,在1周、2周、4周三个时间点,B6-Apoe-/-小鼠结扎侧动脉比C3H-Apoe-/-小鼠出现更大的动脉内膜病变。组织学上,C3H-Apoe-/-小鼠2周时出现脂纹,C3H-Apoe-/-小鼠4周时和B6-Apoe-/-小鼠2周时出现中等大小的纤维性病变。B6-Apoe-/-小鼠4周时出现进展期的动脉内膜病变,出现新生血管及严重管腔狭窄。两个品系小鼠的颈动脉均可观察到早期中性粒细胞粘附于内皮细胞及内膜病变中的中性粒细胞浸润。B6-Apoe-/-小鼠动脉最早在1周时出现内膜病变巨噬细胞浸润,两个品系小鼠在2周和4周时的动脉内膜病变中出现明显的巨噬细胞浸润。在C3H-Apoe-/-小鼠的病变中观察到CD4+T细胞,但在B6-Apoe-/-小鼠的病变中没有观察到。两个品系小鼠的动脉硬化内膜病变出现血管平滑细胞染色,动脉中层α-平滑肌肌动蛋白的免疫反应性均下降。抗Ly6G抗体治疗组与对照组相比,病变中性粒细胞浸润明显减少,但内膜增生病变大小相当。抗CSF-1R抗体治疗后小鼠巨噬细胞清除结果不稳定,治疗组与对照组内膜增生病变大小相当。抗氧化剂NAC治疗后颈动脉内膜增生小于对照组,MCP-1表达受到抑制,治疗组小鼠血浆MCP-1、TNF-α分泌水平减低,而IL-10分泌增加。2、以50μg/ml浓度的ox-LDL刺激血管平滑肌细胞后,测量发现每孔8000个细胞组血管平滑肌细胞在刺激后能平稳的增殖。NAC在1mM和2m M浓度能明显抑制血管平滑肌细胞增殖。划痕试验中2mM NAC治疗组24h和48h血管平滑肌细胞迁移面积小于对照组。流式细胞学实验发现1mM NAC及2mM NAC干预可以抑制血管平滑肌细胞的氧自由基ROS水平。ELISA检测细胞培养液中的MCP-1、TNF-α、IL-10,发现NAC可以抑制由ox-LDL诱导血管平滑肌细胞分泌的MCP-1、TNF-α（P<0.05）,促进血管平滑肌细胞分泌IL-10（P<0.05）;分光光度法检测发现NAC促进血管平滑肌细胞分泌NO（P<0.05）。结论:1、遗传背景、动脉血流对高脂血症Apoe-/-小鼠颈动脉粥样硬化形成具有显着影响。中性粒细胞对B6-Apoe-/-小鼠颈动脉结扎后动脉内膜增生不起主要作用。NAC治疗抑制B6-Apoe-/-小鼠颈动脉结扎后动脉内膜增生,部分因为NAC治疗可调节小鼠血浆MCP-1、TNF-α、IL-10水平。2、NAC通过抑制ROS进而抑制了血管平滑肌细胞（VSMC）的增殖和迁移。NAC通过抑制VSMC MCP-1和TNF-α分泌而抑制VSMC的增殖和迁移,NAC促进VSMC IL-10和NO的分泌。抗氧化剂NAC有望成为预防动脉硬化闭塞和介入治疗后再狭窄的有效药物。
张石蕾[5]（2020）在《肉苁蓉苯乙醇总苷脂质体抗肝纤维化的作用及机制研究》文中进行了进一步梳理目的:构建CPhGs脂质体,并表征其特性;考察CPhGs和CPhGs脂质体体外释放行为及体内药代动力学特征;采用体内实验,探讨CPhGs脂质体对BSA诱导的大鼠免疫性肝纤维化模型的防治作用及作用机制;采用体外实验,观察CPhGs脂质体对HSCs增殖、细胞凋亡、细胞周期及胶原分泌的影响,并进一步通过观察CPhGs脂质体对rrPDGF-BB刺激HSCs增殖的影响,从细胞和分子水平上探讨CPhGs脂质体对MAPK和FAK/PI3K/Akt信号传导通路的影响,揭示其抗肝纤维化的作用靶点,并阐明其发挥作用的分子机制。方法:（1）采用薄膜分散一次包封法、薄膜分散二次包封法、逆向蒸发法、真空冷冻干燥薄膜分散二次包封法制备CPhGs脂质体,使用透射电镜观察其形态,Malvern激光粒度分析仪测量其粒径,Zeta电位、HPLC法测量药物包封率、载药率,评价并确定其最佳制备方法。（2）以原料药为对照组,采用HPLC检测并阐明CPhGs脂质体的体外释药规律,LC-MS法测定CPhGs脂质体中松果菊苷在大鼠血浆中的血药浓度,分析药代动力学特征。（3）使用BSA建立免疫性肝纤维化大鼠模型,体内观察CPhGs脂质体及CPhGs原料药对BSA诱导的大鼠免疫性肝纤维化的影响,分析血清学指标、肝组织病理、免疫组化指标以及ECM蛋白、MAPK通路、炎症蛋白表达水平的变化,评价CPhGs脂质体抗肝纤维化的作用及可能的分子机制。（4）体外观察CPhGs脂质体对HSCs的增殖和细胞凋亡、细胞周期及对细胞活力、细胞毒性的影响,从细胞学水平阐述CPhGs脂质体抗肝纤维化的作用,研究CPhGs脂质体对rrPDGF-BB/FAK/PI3K/Akt信号通路的影响,探讨其抗肝纤维化的作用靶点,从分子水平阐明其作用机制。结果:（1）采用薄膜分散一次包封法制备的3个不同批次CPhGs脂质体包封率平均值为28.55%,载药率为2.73%;采用薄膜分散二次包封法制备的3个不同批次CPhGs脂质体包封率平均值为38.46%,载药率为3.71%;采用逆向蒸发法制备的3个不同批次CPhGs脂质体包封率平均值为33.88%,载药率为3.28%,薄膜分散二次包封法制备的CPhGs脂质体包封率和载药率均是最高;在以薄膜分散二次包封法制备的CPhGs脂质体基础上,利用真空冷冻干燥法制备了CPhGs脂质体冻干粉,复溶后CPhGs脂质体冻干粉外观形态良好,冻干前后纳米粒的粒径和包封率变化均不大,说明其稳定性良好,为后续实验提供足够的样品量。（2）体外释药结果显示,最适合CPhGs和CPhGs脂质体的模型分别是一级动力学和Higuchi方程,CPhGs脂质体没有显示任何突释效应;大鼠体内的药物代谢动力学相关参数表明,CPhGs原料药和CPhGs脂质体组在相同剂量灌胃给药的情况下,CPhGs脂质体给药后Cmax明显提高（P<0.05）,CPhGs脂质体组给药0.75h之后的血药浓度均远远大于原料药组（CPhGs脂质体组35.95±3.95 ng/ml vs CPhGs原料药组27.14±0.93 ng/ml）,给予CPhGs原料药后大鼠血浆中松果菊苷的浓度较低,CL为2.07±0.39 ml/h/kg,t1/2显着延长（CPhGs脂质体组5.33±0.43h vs CPhGs原料药组2.07±0.61h,P<0.05）,MRT显着延长（CPhGs脂质体组5.87±0.32h vs CPhGs原料药组2.80±0.47h,P<0.05）,Tmax显着增加（CPhGs脂质体组1.60±0.55h vs CPhGs原料药组0.60±0.22h,P<0.05）;CPhGs脂质体组大鼠血浆中24h内药时曲线下面积较CPhGs原料药组显着提高,为原料药组的273.30%。（3）体内药效学实验结果表明,CPhGs脂质体和CPhGs原料药干预均可使肝纤维化模型大鼠肝脏、脾脏指数降低,其中CPhGs脂质体组大鼠肝脏、脾脏指数与CPhGs原料药组相比显着降低;并且,相同剂量的CPhGs脂质体组大鼠血清ALT、AST、ALP、TBIL、TBA、γ-GT、TGF-β、肝纤维化四项LN、HA、PCⅢ、IV-C以及肝组织HYP含量总体上较CPhGs原料药组有明显的下降,大鼠肝脏病理损伤情况也有所改善;免疫组化和WB实验结果均显示CPhGs脂质体组ECM标志性分子α-SMA和CollagenⅠ蛋白表达水平显着降低;与模型组、CPhGs原料药组以及空白脂质体组大鼠相比,CPhGs脂质体给药组大鼠肝组织MAPK信号通路相关蛋白p-ERK 1/2、p-JNK 1/3和p-P38以及炎症相关蛋白NF-κB、AP-1、Cox-2、HMGB1有所下调,IκBα有所上调。（4）体外药效学实验结果表明,CPhGs脂质体对HSCs的增殖抑制率随着药物浓度的升高逐渐升高,24h的IC50值为42.535μg/ml;CPhGs脂质体（29.45、14.72、7.36μg/ml）对HSCs没有明显的毒性作用（P>0.05）。流式细胞仪检测结果显示,浓度为29.45μg/ml的CPhGs脂质体可诱导HSCs晚期凋亡,晚期凋亡细胞比例高于早期凋亡细胞比例;在浓度为14.72μg/ml和7.36μg/ml的CPhGs脂质体组中,早期凋亡细胞比例要明显高于晚期凋亡细胞;细胞周期结果显示,与正常对照组相比,不同浓度的CPhGs脂质体处理HSCs后,G0/G1期细胞比例明显升高（P<0.05）,S期细胞比例明显降低（P<0.05）,G2/M期细胞比例明显降低（P<0.05）。与rrPDGF-BB组比较,不同浓度CPhGs脂质体组均可抑制rrPDGF-BB诱导的HSCs的增殖;荧光定量PCR结果显示,与rrPDGF-BB组相比,29.45、14.72、7.36μg/ml CPhGs脂质体组CollagenⅠ、α-SMA、TIMP-1的mRNA表达水平均降低,MMP-1 mRNA表达水平均增多（P<0.05）。在rrPDGF-BB刺激活化的HSCs中,CollagenⅠ和α-SMA mRNA表达水平显着提升,经三个剂量组的CPhGs脂质体干预均可以减少CollagenⅠ、α-SMA、TIMP-1的mRNA表达水平,尤其是29.45μg/ml高剂量CPhGs脂质体组效果最为明显。WB分析结果显示,与正常对照组比较,模型组CollagenⅠ、α-SMA蛋白表达水平显着升高（P<0.05）;与模型组比较,CPhGs脂质体7.36μg/ml、14.72μg/ml和29.45μg/ml三个剂量组中CollagenⅠ、α-SMA蛋白表达水平显着降低（P<0.05）;三个剂量组的CPhGs脂质体处理HSCs 24小时后,HSCs中p-PI3K和p-Akt水平持续下降;和rrPDGF-BB刺激组相比,rrPDGF-BB刺激+FAK基因过表达组中FAK蛋白表达水平显着升高（P<0.05）,而rrPDGF-BB刺激+FAK基因过表达对照组中FAK蛋白表达水平无显着变化;和rrPDGF-BB刺激+FAK基因过表达组相比,rrPDGF-BB刺激+FAK基因过表达对照组和rrPDGF-BB刺激+FAK基因过表达+CPhGs脂质体给药组磷酸化PI3K和磷酸化Akt蛋白表达水平显着下降（P<0.01）。结论:采用薄膜分散二次包封法制备得到CPhGs脂质体纳米粒,形态圆整、包封率较高、粒径分布小、稳定性好;体外释药实验结果表明,本研究所制备的CPhGs脂质体纳米粒在一定程度上有缓释作用,并且明显改变了CPhGs的药物动力学行为,减缓了药物的消除时间,提高了药物的生物利用度;CPhGs脂质体能不同程度降低肝纤维化大鼠的肝、脾指数,改善血清肝功能酶指标,降低血清肝纤维化标志物含量,减轻肝细胞变性及炎性细胞浸润,抑制胶原纤维的合成与沉积,通过MAPK通路及炎症因子蛋白表达抑制肝纤维化的发展变化;CPhGs脂质体给药组能在无细胞毒性的基础上明显减少HSCs的活化,剂量依赖性地抑制rrPDGF-BB刺激的HSCs的细胞增殖,能通过PDGF/FAK/PI3K/Akt通路对rrPDGF-BB刺激的HSCs中ECM蛋白表达产生调控。研究结果为CPhGs脂质体纳米粒在抗肝纤维化方面的应用提供了科学依据。
李熙惠[6]（2019）在《通过体外细胞培养观察血液透析对内皮细胞功能的变化及其可能机制》文中提出【目的】本研究通过体外培养不同环境下的内皮细胞,观察单次血液透析对内皮细胞功能的变化,研究不同因素与内皮细胞生长的关系及其可能存在的机制。【方法】1.收集2018年6月至2018年11月在广西医科大学第一附属医院体检部随机挑选40例健康体检者和在广西医科大学第一附属医院血液净化中心进行维持性血液透析（maintenance hemodialysis,MHD）的77例患者的血清干预内皮细胞,检验其增殖能力和迁移能力,同时检测两组血清尿素肌酐（creatinie,Cr）、β2-微球蛋白（β2-MGicroglobulin,β2-MG）含量,用酶联免疫吸附法（Elisa）检测白介素-6（interleukin-6,IL-6）的含量;2.用不同浓度的肌酐、β2-MG、IL-6、IS培养人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVEC）,检测其增殖活性和迁移距离;3.用肌酐、β2-MG、IL-6和IS组处理24小时后,使其正常化,继续培养24h和48h后,检测各组细胞的增殖活性,推测其是否建立尿毒症毒素记忆;4.用MHD患者做单次血液透析（HD）治疗前后的血清干预内皮细胞,检测其增殖能力和迁移能力,同时检测两组血清的肌酐、β2-微球蛋白和IL-6;5.分析肌酐、β2-MG、IL-6和内皮细胞增殖功能的相关性,并计算出线性回归方程。【结果】1.CKD患者的细胞增殖能力均高于健康组,CKD患者HD前的细胞增殖能力均高于治疗后的细胞增殖能力,差异有显着性（P<0.05）;2.健康组与MHD患者的肌酐、β2-MG和IS的差异有统计学意义（P<0.05）,MHD患者透析前肌酐和β2-MG水平显着高于透析治疗后水平,IL-6水平透析治疗后水平较透析治疗前低,其差异有统计学意义（P<0.05）;3.随着肌酐和IS浓度的增加,肌酐、β2-MG和IS分别对内皮细胞增殖的抑制作用也逐步增加（P<0.05）,但是IL-6对内皮细胞的增殖有促进作用,其促进作用随浓度的增加而增加（P<0.05）;4.肌酐、β2-MG和IS抑制内皮细胞的愈合能力,且其作用随浓度的增加而增加;IL-6促进内皮细胞愈合能力,且其作用随浓度的增加而增加;5.与对照组相比,撤去干预条件后,肌酐、β2-MG和IS的增殖抑制率随着时间的增加而逐渐减小,同时IL-6促进增殖率也随着时间的增加而逐渐减小;6.Pearson相关分析显示细胞OD值与肌酐（r=0.640,P<0.01）、β2-MG（r=0.633,P<0.01）呈正相关,与IL-6呈负相关（r=-0.540,P<0.01）,并得出线性回归方程为y=0.000039a+0.002b-0.001c。【结论】肌酐、β2-MG和IS抑制内皮细胞的增殖和迁移,IL-6促进内皮细胞和迁移;血液透析通过改变尿毒症毒素（肌酐、β2-MG和IL-6）浓度,改变对内皮细胞的影响。
张影[7]（2019）在《雌激素对女性H型高血压发病的影响研究》文中进行了进一步梳理目的:分析雌激素对女性H型高血压的影响及雌激素与其他影响因素的交互作用,探索雌激素与血浆同型半胱氨酸水平、高血压分级之间的相关性,研究颈动脉内膜中层厚度（IMT）与血浆Hcy水平、雌激素水平之间的相关性。方法:采用病例对照的研究方法,随机选取湖南省人民医院2017年10月至2018年12月住院的426例H型高血压女性患者为病例组（入选患者均按照H型高血压的诊断标准进行选择）;选取同一时期内在该院住院的564例普通高血压女性患者作为对照组。收集所有调查对象的一般人口学特征、体格测量指标、生化指标检测结果和颈动脉内膜中层厚度（Intima-media thickness,IMT）等数据。运用EpiData3.1建立数据库以及数据的录入和校验,采用SPSS 23.0软件对研究结果进行数据分析,多因素非条件Logistic回归模型分析H型高血压的影响因素及雌二醇与其他影响的交互作用,Spearman相关性检验分析雌二醇（Estradiol,E2）、睾酮（Testosterone,T）与同型半胱氨酸（Homocysteine,Hcy）水平、高血压分级之间的相关性及IMT与Hcy水平、雌激素水平之间的相关性。结果:（1）调查对象总共为990人,全部为女性,年龄范围为2488岁,平均年龄（65.91±10.60）岁。其中H型高血压组426例,年龄范围为2488岁,平均年龄（68.38±10.14）岁;对照组564例,年龄范围为2987岁,平均年龄（64.04±10.57）岁。（2）H型高血压组与对照组比较,婚姻状况、文化程度、运动情况、是否绝经和TC、LDL-C、E2、T、TG、Cr、BUN、Cys C在两组之间的差异有统计学意义（均有P<0.05）。（3）E2（OR=0.777,95%CI=0.6430.939）、文化程度（OR=0.854,95%CI=0.7480.975）、LDL-C（OR=1.312,95%CI=1.1091.552）和Cys C（OR=21.796,95%CI=11.77940.333）是H型高血压的影响因素;E2与Cys C、文化程度、绝经之间具有交互作用。（4）相关性分析,结果显示,E2与Hcy呈轻度负相关（rs=-0.163,P<0.05）,与高血压分级未见相关性（rs=-0.050,P=0.126）;T与Hcy、高血压分级均呈轻度正相关（rs=0.116、rs=0.073,均为P<0.05）;IMT与Cys C、Hcy、T呈轻度正相关（rs=0.315、rs=0.261、rs=0.241）,与E2呈轻度负相关（rs=-0.231）,且均有P<0.05;而IMT与hs-CRP水平未见相关性（rs=0.070,P>0.05）。结论:E2和文化程度是H型高血压的保护因素,LDL-C和Cys C是H型高血压的危险因素;E2与Cys C、文化程度、绝经之间具有交互作用;E2与Hcy呈轻度负相关,T与Hcy水平、高血压分级呈轻度正相关;IMT与Cys C、Hcy、T呈轻度正相关,与E2呈轻度负相关。
廖肇福[8]（2019）在《心脏Telocytes协同心脏干细胞治疗缺血性心肌梗死及其机理的研究》文中研究说明目的:（1）对心脏Telocytes（CTs）、心脏干细胞（CSCs）和骨髓间充质干细胞（MSCs）移植治疗缺血性心肌梗死的疗效进行比较;（2）对CTs与CSCs不同的协同方式移植治疗缺血性心肌梗死的疗效进行比较;（3）对CTs分泌外泌体治疗缺血性心肌梗死的疗效及其机制进行研究;（4）对CTs外泌体所含的miRNA-21-5p治疗缺血性心肌梗死的疗效及其机理进行研究;（5）对不同细胞、CTs外泌体治疗和miR-21-5p治疗心肌梗死的疗效进行比较;（6）对CTs外泌体的蛋白组可能参与梗死心肌修复再生的可能机理进行生物信息学预测;（7）对年青与年老CTs表达基因的差异组学及随增龄相应通路改变进行研究。方法:（1）通过贴壁法分离得到MSCs,磁珠分选法分离得到CTs和CSCs,然后分别将总细胞量为5×105的CTs、CSCs、MSCs、4种不同的CTs协同CSCs的方式[（1）CTs与CSCs在Transwell系统中共培养48小时后,移植共培养后的CSCs（5×105个细胞）（CSCs-co）;（2）移植正常培养的CTs（2.5×105个细胞）和低氧（5%O2）培养48 h的CSCs（2.5×105个细胞）（CTs+CSCs-hyp）;（3）移植正常培养的CTs（2.5×105个细胞）和在Transwell中与CTs共培养48 h后的CSCs（2.5×105个细胞）（CTs-nor+CSCs-co）;（4）移植CTs（2.5×105个细胞）和CSCs（2.5×105个细胞）混合培养48 h后的混合细胞（CTs+CSCs-co）]及PBS移植到利用左冠状动脉前降支（LAD）结扎术构建的心肌梗死大鼠的心肌层中。细胞心肌内移植4周后,使用超声心动图评价心功能;使用Masson’s trichrome染色,对各组心肌梗死面积、心脏纤维化程度、左心室室壁厚度进行半定量比较分析;使用抗v WF免疫组化染色对各组梗死区和梗死边缘区的血管密度进行半定量分析比较;使用抗PH3和α-SA,抗Ki67和Cardiac troponin I的免疫荧光双标染色对各组梗死区和梗死边缘区的增殖心肌数进行半定量分析;使用抗c-Kit和CD34,及抗c-Kit和Sca-1的免疫荧光双标染色分别对各组梗死区存活的CTs和CSCs密度进行半定量分析;（2）使用透射电镜观察大鼠心肌层的CTs及CTs分泌的外泌体。通过心肌内注射移植CTs外泌体到LAD结扎的大鼠梗死心肌层中,4周后使用超声心动图对CTs分泌外泌体治疗组和PBS对照组的心功能进行评价分析;使用Masson’s trichrome染色,对心肌梗死面积、心脏纤维化程度、左心室室壁厚度进行半定量分析;使用抗α-SMA和抗MMP2的免疫荧光染色分别对各组梗死区成肌成纤维细胞密度和MMP2的表达量进行半定量分析;使用抗v WF的免疫组化染色和抗Ki67与Cardiac troponin I的免疫荧光双标染色分别对各组梗死区与梗死边缘区的血管密度和增殖心肌数进行半定量分析;使用抗c-Kit和Sca-1的免疫荧光双标染色分别对各组梗死区存活的CSCs密度进行半定量分析;把经Di I染色的CTs分泌外泌体与CSCs进行共孵育,以观察CTs分泌外泌体是否能进入CSCs;使用流式细胞技术、死活细胞染色和CCK8分别对CTs分泌外泌体对缺血缺氧环境中的CSCs可能的保护作用进行分析;（3）使用qPCR对与CTs共培养48小时的CSCs中的miR-21-5p表达水平进行定量分析。通过心肌内注射miR-21-5p agomir和无关序列对照至LAD结扎致心梗的大鼠缺血心肌层中,7天后利用超声心动图对心功能进行评价;使用Masson’s trichrome染色对心肌梗死面积进行半定量分析比较;使用抗Ki67和Cardiac troponin I的免疫荧光双标染色对各组梗死区和梗死边缘区的增殖心肌数进行半定量分析;使用抗c-Kit和Sca-1的免疫荧光双标染色对各组梗死区存活的CSCs进行半定量分析。使用生物信息学预测miR-21-5p潜在靶基因,并利用qPCR和双荧光素酶报告系统确认miR-21-5p的靶基因,并使用针对靶基因的siRNA对miR-21-5p靶基因及功能进行研究。（4）通过单因素方差分析比较不同细胞、CTs外泌体和miR-21-5p治疗心肌梗死的射血分数、缩短分数、左心室收缩和舒张末期直径和梗死面积,以比较相应的疗效。（5）使用蛋白质非标记定量质谱技术和Ingenuity Systems Pathway Analysis（IPA）生物信息学系统对常氧和低氧环境下,CTs分泌外泌体参与心肌修复与再生的功能因子进行分析。（6）通过基因芯片和IPA生物信息学系统对年老和年青CTs差异表达的基因可能参与调控心血管生理与病理与通路进行分析。结果:（1）CTs,MSCs和CSCs分别对心梗治疗的疗效比较:心功能指标,CTs治疗组的射血分数、缩短分数、左心室收缩和舒张末期直径相比MSCs组和CSCs组差异均无显着性统计学意义（P>0.05）;梗死面积,CTs治疗组的梗死面积显着小于MSCs组（P<0.05）,与CSCs组的差异没有显着性统计学意义（P>0.05）;心脏纤维化指标,CTs治疗组的梗死区胶原面积和梗死对侧区的血管周边胶原面积均分别显着小于MSCs组和CSCs组（P<0.05）;左心室重构指标,CTs治疗组的梗死区边缘厚度和最小厚度与MSCs组和CSCs组差异均无显着性统计学意义（P>0.05）;血管新生,CTs治疗组的梗死区血管密度分别显着性大于MSCs组和CSCs组（P<0.05）,CTs治疗组的梗死边缘区血管密度显着性大于MSCs组（P<0.05）,而和CSCs组的差异没有显着性统计学意义（P>0.05）;梗死区和边缘区的心肌增殖,CTs治疗组的PH3阳性心肌或Ki67阳性的心肌数与MSCs组和CSCs组的差异无显着性统计学意义（P>0.05）;梗死区CSCs和CTs的密度,CTs治疗组的梗死区CTs密度和CSCs密度分别与MSCs组和CSCs组相比,差异无显着性统计学意义（P>0.05）。（2）4种不同协同方式的CTs和CSCs治疗对心梗治疗的疗效比较:心功能指标,4种不同协同方式的CTs和CSCs治疗组中只有CTs+CSCs-co治疗组的射血分数和缩短分数分别显着大于单独移植CTs组、CSCs组和MSCs组（P<0.01）,左心室收缩末期直径分别显着小于单独移植CTs组、CSCs组和MSCs组（P<0.05）,左心室收舒张期直径分别显着小于单独移植CTs组和MSCs组（P<0.05）,但与CSCs组的差异没有显着性统计学意义（P>0.05）;梗死面积,4种不同协同方式的CTs组和CSCs治疗组中只有CTs+CSCs-co治疗组的梗死面积分别显着小于单独移植CTs、CSCs和MSCs组（P<0.05）;心脏纤维化指标,CTs+CSCs-co治疗组的梗死区胶原面积分别显着小于单独移植CTs组、CSCs组和MSCs组（P<0.05）,梗死对侧区血管周边胶原面积分别显着小于单独移植CSCs组和MSCs组（P<0.01）,但与CTs组的差异没有显着性统计学意义（P>0.05）;左心室重构指标,CTs+CSCs-co治疗组的梗死边缘厚度与CTs组、CSCs组和MSCs组差异均无显着性统计学意义（P>0.05）,而梗死区最小厚度分别显着大于CSCs组和MSCs组（P<0.05）,但与CTs组差异没有显着性统计学意义（P>0.05）;血管新生,CTs+CSCs-co治疗组的梗死区和梗死边缘区的血管密度均分别显着大于单独移植CTs组、CSCs组和MSCs组（P<0.01）;梗死区和边缘区心肌增殖,CTs+CSCs-co治疗组的PH3阳性心肌或Ki67阳性的心肌数均分别显着大于单独移植CTs组、CSCs组和MSCs组（P<0.05）;梗死区CSCs和CTs的存活,CTs+CSCs-co治疗组的梗死区CTs密度和CSCs密度均分别显着大于单独移植CTs组、CSCs组和MSCs组（P<0.05）。（3）通过透射电镜在大鼠心肌层观察到典型形态的CTs及其分泌的外泌体;心肌注射CTs外泌体对心梗治疗的疗效:心功能指标,CTs外泌体治疗组的射血分数和缩短分数分别显着大于PBS对照组（P<0.05）,左心室收缩末期直径显着小于PBS组（P<0.01）,左心室舒张末期直径与PBS组的差异没有显着性统计学意义（P>0.05）;梗死面积,CTs外泌体治疗组的梗死面积显着小于PBS组（P<0.05）;心脏纤维化指标,CTs外泌体治疗组的梗死区胶原面积、梗死对侧区的血管周边胶原面积以及梗死区成肌成纤维细胞密度均显着小于PBS组（P<0.01）;左心室重构指标,CTs外泌体治疗组的梗死边缘厚度显着大于PBS对照组（P<0.05）,但最小厚度与PBS组的差异没有统计学意义（P>0.05）,梗死区的MMP2的表达量显着低于PBS对照组（P<0.01）;血管新生,CTs外泌体治疗组的梗死区血管密度显着大于PBS对照组（P<0.05）,但梗死边缘区血管密度与PBS对照组相比差异没有显着性统计学意义（P>0.05）;梗死区和边缘区心肌增殖,CTs外泌体治疗组的Ki67阳性的心肌数显着大于PBS组（P<0.01）;梗死区CSCs的存活,CTs外泌体治疗组的CSCs密度显着大于PBS组（P<0.01）;经Di I染色的CTs外泌体能被CSCs摄取,并且发现CSCs经CTs外泌体预处理2 h后相比PBS对照组能显着减少缺血缺氧环境中CSCs的凋亡率和显着提高CSCs的存活率（P<0.05）。（4）与CTs共培养48 h后CSCs的miR-21-5p的表达量显着升高（P<0.01）;心肌注射miR-21-5p对心梗治疗的疗效:心功能指标,miR-21-5p治疗组的射血分数和缩短分数均显着大于无关序列对照组（P<0.05）,左心室收缩和舒张末期直径均显着小于无关序列对照组（P<0.05）;梗死面积,miR-21-5p治疗组的梗死面积显着小于无关序列对照组（P<0.05）;梗死区和边缘区的心肌增殖,miR-21-5p治疗组的Ki67阳性的心肌数显着大于无关序列对照组（P<0.05）;梗死区CSCs存活,miR-21-5p治疗组的CSCs密度均显着大于无关序列对照组（P<0.05）;CSCs过表达miR-21-5p后能显着减小在缺血缺氧环境中的凋亡率（P<0.05）。通过生物信息学预测、q-PCR和双荧光素酶报告细胞验证Cdip1是miR-21-5p的靶基因,通过Cdip1的siRNA沉默CSCs中Cdip1的表达能显着减少CSCs在缺血缺氧环境中的凋亡（P<0.05）。（5）通过比较不同细胞治疗、CT外泌体治疗和miR-21-5p治疗三种疗法对心梗大鼠的心功能和梗死面积,发现所有的细胞治疗组与注射CTs外泌体及注射miR-21-5p治疗组的射血分数、缩短分数相比PBS对照组均显着增加（P<0.05）,而梗死面积显着减小（P<0.05）。而三种治疗心肌梗死的疗法中CTs+CSCs-co组的射血分数和缩短分数最大,梗死面积最小。（6）蛋白质非标记定量质谱技术在常氧和低氧CTs分泌的外泌体中检测到450种和454个蛋白,通过IPA分析揭示这些蛋白可能参与血管新生、心脏纤维化、细胞增殖和细胞死亡与存活等去影响心肌梗死进程。（7）通过比较分析老年CTs与年青CTs的表达芯片,发现老年CTs相比年青CTs表达量上调有注释的基因有1948个,表达量下调有注释的基因有1407个,IPA分析揭示老年CTs相比年青CTs表达有显着性差异的基因和显着性差异在5倍以上的基因都与Cardiovascular system development and function和Cardiovascular disease高度相关。结论:（1）移植CTs治疗心肌梗死,在减少梗死面积和心脏纤维化与促进血管新生方面略优于单独移植CSCs和MSCs;（2）4种CTs与CSCs协同治疗方式中CTs+CSCs-co对心肌梗死的疗效最佳,并且在改善心功能,减小梗死面积和心脏纤维化,促进血管新生、心肌增殖、CTs网络重构及CSCs的存活方面优于单独移植CTs、CSCs和MSCs治疗;（3）使用CTs分泌的外泌体对心梗进行治疗能显着改善心梗心脏的心功能,减小梗死面积和心脏纤维化,改善左心室重构,促进血管新生、心肌增殖以及CSCs的存活;（4）心肌内注射miR-21-5p对心梗进行治疗能显着减小梗死面积,促进心肌增殖和CSCs存活,miR-21-5p保护CSCs的机制之于是通过下调靶基因Cdip1的表达减少缺血缺氧环境中CSCs的凋亡;（5）三种治法（细胞、CTs外泌体和miR-21-5p）对心梗的治疗中,CTs+CSCs-co组治疗的疗效相对最佳;（6）CTs分泌外泌体所含的蛋白因子可能参与梗死心肌的再生;（7）老年CTs相比年青CTs表达差异的基因可能参与心脏衰老和心血管疾病的发生。
周文婷[9]（2014）在《榅桲提取物对高血压大鼠的影响及作用机制的研究》文中研究指明目的:榅桲是传统维吾尔药材,据文献记载可用于心血管系统疾病的防治。本研究首先通过两肾一夹肾性高血压大鼠模型进行榅桲抗高血压有效部位的筛选及化学成分的初步分析,确定黄酮类化合物可能为榅桲抗高血压最主要化学组分之一;再通过对榅桲总黄酮进行分离纯化,观察其对自发性高血压大鼠血压和主要靶器官的影响,尤其是对心脏结构和功能的影响,并进一步从不同角度探讨其可能的作用机制,本研究结果可为进一步开发利用传统维吾尔地方药材提供一定理论依据和研究基础。方法:①利用左肾动脉狭窄法建立两肾一夹（2K1C）肾性高血压大鼠模型（RHR）,将高血压成模大鼠随机分为模型组、卡托普利组（25mg/kg）、榅桲果和叶水提取物和65%乙醇提取物低（80mg/kg）、高剂量组（160mg/kg）,另设假手术组,各组大鼠连续灌胃给药8W。无创尾套法每两周测定一次大鼠收缩压和舒张压,末次给药后取大鼠血浆测定血液流变学指标。②利用2K1C肾性高血压大鼠模型,随机分为假手术组、模型组、榅桲叶提取物高、中、低剂量组（40、80、160mg/kg）、阳性对照药卡托普利组（25mg/kg）,连续给药8周,在给药前和给药后每两周测量大鼠的收缩压（SBP）和舒张压（DBP）,末次给药后测量大鼠Ang II、RA、apelin-12、ET-1、NO的变化。③采用溶剂萃取法将榅桲叶65%乙醇提取物分为石油醚、乙酸乙酯、正丁醇及水4个部位,利用2K1C肾性高血压大鼠模型,连续给药8周观察并记录各组收缩压（SBP）和舒张压（DBP）变化情况,进行榅桲叶抗高血压作用有效部位筛选,并通过测定血清T-AOC、GSH-ST、SOD等指标的活性,初步观察其抗氧化作用。④按最优工艺提取分离纯化榅桲总黄酮,将自发性高血压大鼠（SHR）分为6组,分别为模型组、卡托普利组（25mg/kg）、杜仲平压片组（30mg/kg）、榅桲总黄酮低（40mg/kg）、中（80mg/kg）、高剂量组（160mg/kg）,另取WKY大鼠8只为正常组,给药16周,1次/d,无创尾套法每两周测定一次大鼠收缩压和舒张压,末次给药后进行超声心动图检查和心脏血流动力学指标测定,并进行心脏、胸主动脉和肾脏等主要组织器官的病理学检查,评价靶器官损伤程度。⑤测定血或心脏组织中AngⅡ、ALD水平,并通过RT-PCR法检测心肌组织ACE、ACE2和AT1的mRNA表达,Western blot法检测其蛋白表达,评价榅桲总黄酮对RAAS系统的影响。⑥测定血清中IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α及CRP的含量,评价榅桲总黄酮对炎症因子的影响。⑦测定血清ET-1、NO、NOS、SOD、MDA及CGRP的含量,评价榅桲总黄酮对血管内皮功能的影响。结果:①给药8周后,榅桲果和叶的水提物和醇提物组动物收缩压和舒张压均表现不同程度的降压趋势,其中榅桲叶的醇提物作用最明显,收缩压下降了 9.0%,舒张压下降了 11.8%。与模型组相比,榅桲各给药组大鼠全血粘度和血浆粘度、红细胞压积、红细胞聚集指数、红细胞刚性指数有不同程度降低,而红细胞变形指数有所升高;②给药8周后,榅桲叶提取物高、中、低剂量组可明显降低RHR的收缩压与舒张压,并不同程度减少血和肾脏AngⅡ、RA、apelin-12含量,减少血中ET-1含量并增加NO含量,与模型组比较均有显着性差异（P<0.05）;③与模型组相比,COM-乙酸乙酯部位收缩压和舒张压分别降低了 4.3%和9.1%,不同部位T-AOC、GSH-ST、SOD、NOS活性均有不同程度升高,MDA减少,与模型组相比有统计学差异（P<0.05）;④给药16周后,与SHR组比较,COMF-H组SBP和DBP分别降低了 18.9%和21.1%。超声心动图结果显示,与SHR组比较,COMF各组LVIDdI、LVIDsI、IVSTI均有不同程度降低（P<0.01或P<0.05）,计算得LVW、LVWI、LVW/BW 均明显减小（P<0.01 或P<0.05）,COMF-M 和 COMF-H 组 FS、LVEF增大（P<0.01或P<0.05）,其中COMF-H组变化最大。血流动力学测定结果显示,与SHR组比较,COMF各组SBP、DBP、LVSP、LVEDP不同程度降低（P<0.01或P<0.05）,LV+dp/dtmax、LV-dp/dtmax 减小（P<0.01 或P<0.05）,SD 无明显变化,DD延长（P<0.05）,HR减小,但无统计学差异（P<0.05）。心脏指数与左室肥厚指数测定结果显示,与SHR组相比,COMF-M和COMF-H组HW、HW/BW、LVM、LVM/BW均有不同程度减小（P<0.01或P<0.05）,COMF-H组变化更为明显（P<0.01）。组织病理学检查结果显示,COMF可抑制SHR心肌细胞肥大和间质增宽,COMF-H组变化最为明显。与SHR组相比,COMF-H组心肌细胞直径减小了 4.6%（P<0.05）,心肌细胞横截面积减小了 13.6%（P<0.05）。COMF可抑制SHR胸主动脉中膜增厚和内皮细胞脱落。与SHR组相比,COMF-M组和COMF-H组AW/lenth分别降低了 8.1%（P<0.05）和13.1%（P<0.01）。与SHR组大鼠相比,COMF-M组和COMF-H组中膜厚度减小,中膜厚度/管腔内经比值明显减小（P<0.01或P<0.05）,但对管腔内径影响不大。COMF-H组还可抑制肾小球入球小动脉管壁增厚,管腔变小的病理性改变;⑤给药16周后,与SHR组相比,COMF-H组心脏和血液中的AngⅡ含量分别减少了 5.2%和13.2%,ALD含量分别减少了 15.4%和19.2%。RT-PCR结果表明,与SHR组相比较,COMF各剂量组心肌组织ACE和AT1的mRNA相对表达量有不同程度减少,ACE2的mRNA相对表达量有不同程度增加（P<0.01或P<0.05）,其中COMF-H组心肌组织ACE和AT1的mRNA相对表达量分别下降了 50.0%和55.4%,ACE2的mRNA相对表达量增加了 120.0%。Western blot结果显示,与SHR组相比较,COMF各剂量组心肌组织ACE和AT1的蛋白表达均有不同程度减少,ACE2的蛋白表达有不同程度增加（P<0.01或P<0.05）,其中COMF-H组心肌组织ACE和AT1的蛋白表达分别下降了 45.5%和32.7%,ACE2的蛋白表达增加了 180.6%。⑥给药16周后,与SHR组相比较,COMF各剂量组IL-1β、IL-6、TNF-α和CRP水平均有不同程度降低,差异有统计学意义（P<0.01或P<0.05）。IL-10升高但无统计学差异（P<0.05）。⑦给药16周后,与SHR组相比较,各给药组ET-1水平和MDA含量均有不同程度降低,NO、eNOS、SOD和CGRP水平均有不同程度升高,差异有统计学意义（P<0.01或P<0.05）。结论:榅桲叶和果实对肾性高血压和自发性高血压大鼠均具有一定抗高血压作用,榅桲叶抗高血压的有效部位为乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位,黄酮类化合物为其中最主要的有效组分。榅桲总黄酮对自发性高血压大鼠具有一定降压作用,主要作用机制可能包括:（1）抑制循环RAAS系统活性,使AngⅡ和ALD水平降低,从而抑制血管收缩、钠水潴留及抗利尿作用,抑制血管平滑肌增殖;（2）降低IL-1β,IL-6、TNF-α和CRP等炎症因子水平,抑制高血压的发生发展;（3）调节ET-1/NO的平衡,增加CGRP水平,增加SOD活性,减少MDA合成,从而减轻过氧化损伤,保护血管内皮。榅桲总黄酮抑制自发性高血压大鼠心肌肥厚,主要作用机制可能包括:（1）榅桲总黄酮能降低高血压大鼠心肌组织ACE和AT1的mRNA和蛋白表达,同时增加ACE2的mRNA和蛋白表达,ACE/ACE2比值降低,从而抑制AngⅡ合成,并激活了 ACE2-Ang（1-7）-MAS代谢途径,起到保护心脏的作用;（2）降低体内IL-1β、IL-6和TNF-α的水平,通过作用于炎症介质延缓高血压左室肥厚的进程。
王筝[10]（2014）在《肾络通对梗阻性肾病大鼠炎性介质表达的影响》文中研究表明由于先天性或获得性泌尿系梗阻所致的梗阻性肾病是急性或慢性肾功能衰竭的常见原因之一，也是难治性反复发作的尿路感染的常见诱发因素。造成慢性泌尿系梗阻的机制非常复杂，其中包括血液动力学改变、炎性介质、血管活性物质、氧化应激等因素的共同参与，最终导致肾脏损伤及肾功能衰竭。肾脏病的发生与肾素-血管紧张素-醛固酮系统（Renin-angiotensin-aldosterone, RAAS）有密切关系，目前对血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ, AngⅡ）的研究较多，其通过转化生长因子-β（Transforminggrowth factor-β, TGF-β）途径促进肾间质纤维化（Renal interstitial fibrosis,RIF）的机制已经比较明确，应用血管紧张素转化酶抑制剂（angiotensinconverting enzyme inhibitors, ACEI）及血管紧张素Ⅱ受体阻断剂（angiotensin II receptor blockers, ARB）后可减轻慢性肾脏病患者肾脏结构和功能的损伤，但仍有不少患者，即便足量的ACEI及ARB治疗亦未能有效，说明有其他因素如炎性损伤、氧化应激的参与。已有的研究表明，炎性损伤在慢性疾病持续进展中发挥重要作用，故抗炎治疗对于慢性疾病的预后有重要意义。这种炎性损伤并非单纯由外界感染所致，而是以内源性炎性损伤为主，且与RIF的持续进展密切相关，炎性介质在其中的作用也得以重视。有研究指出炎性介质例如单核细胞趋化蛋白-1（monocytechemotactic protein1, MCP-1）、白介素-1β（Interleukin1β, IL-1β）、肿瘤坏死因子（tumor necrosis factorα, TNF-α）和诱导型一氧化氮合酶（inducednitric oxide synthase，iNOS）是各种慢性肾脏疾病中引起肾脏炎症和纤维化的重要因素。随着对RAAS的深入研究，发现除了AngⅡ外，醛固酮也可通过激活其下游效应介质血清糖皮质激素诱导蛋白激酶1（Serum andglucocorticoid-induced protein kinase1, SGK-1）及核转录因子κB （NuclearfactorκB, NF-κB）、氧化应激等多种途径导致肾脏炎性细胞浸润和细胞外基质（extracellular matrix, ECM）积聚，最终导致RIF的进展，故阻断醛固酮活化造成的炎性损伤对于减缓肾脏病的进展有重要意义。本次实验通过单侧输尿管结扎（unilateral ureteral obstruction, UUO）建立梗阻性肾病间质纤维化实验动物模型，观察盐皮质激素受体阻断剂依普利酮和化瘀涤痰通络方肾络通煎剂对单侧输尿管梗阻大鼠炎性介质表达的影响，利用实时定量荧光聚合酶链式反应（Real-time polymerase Chain Reaction, Real-timePCR）、免疫组化、蛋白质印迹法（Western blot）、酶联免疫吸附法（enzymelinked immunosorbent assay, ELISA）、放射免疫分析法等技术检测血清醛固酮、血清和糖皮质激素诱导蛋白激酶1（Serum and glucocorticoid-inducedprotein kinase1, SGK-1）及MCP-1、TNF-α、iNOS、IL-1β、核转录因子κB （Nuclear factorκB, NF-κB）和α平滑肌激动蛋白（α-smooth muscleprotein, α-SMA）等指标的变化，从组织、分子、基因水平研究肾络通煎剂的作用机制，为中药治疗梗阻性肾病提供理论和实验依据。第一部分“毒”、“瘀”伤肾机制及关联简述了“毒”和“瘀”的概念、分类、形成机制、两者在肾病中的发病机制，以及毒邪和瘀血的相互影响、毒瘀互结在肾病中的作用、毒瘀相关的分子生物学基础及临床意义等内容。大量实验研究表明，肾间质纤维化是各种慢性肾脏疾病的病理表现和共同通路，而炎性损伤在肾间质纤维化的进程中是一种启动和诱发因素。现代医学研究表明，炎性细胞的浸润、炎性介质的释放、促纤维化细胞因子的表达等均可归属于中医“内毒致病”范畴，而细胞外基质在肾脏的积聚是“瘀”的表现，由此可见，以炎性损伤为特征的“毒”为起因，纤维化为表现的“瘀”为结果，二者交互错杂，导致和加重肾间质纤维化，且贯穿于肾脏病的整个病理过程。同时，也总结出“毒”和“瘀”可作为慢性肾脏病的基本病机。在临床上，肾脏病的进展与感染有密切关系，或因感染而诱发，或因感染而加重，且肾病患者易于感染，这种感染所致的炎性损伤在肾间质纤维化的进展中发挥着重要的作用，抗炎治疗可能是治疗靶点。“毒”、“瘀”病机学说的提出为临床治疗慢性肾脏疾病提供了理论依据，对于慢性肾病的进展可能有重要意义。第二部分肾络通对梗阻性肾病大鼠肾脏组织病理形态学的影响方法：48只Wistar大鼠随机分为假手术组（Sham group）、UUO组（UUOgroup）、依普利酮组（EPL group）、肾络通组（SLT group），每组12只。实验动物自由进食和饮水，温度条件控制在（22±2）℃。适应性饲养1WK后，除假手术组（Sham group），其余大鼠按照Iwai T的方法制备单侧输尿管梗阻模型。大鼠给以10%水合氯醛注射后，于左侧中腹部切开皮肤，游离左侧输尿管，分别在输尿管上1/3处和中1/3处用丝线结扎，切断输尿管，逐层缝合皮肤。假手术组仅将输尿管游离但不结扎离断。术后第3天肾脏组织病理显示炎性细胞浸润，第5日后肾间质胶原纤维沉积，术后第10天梗阻侧肾脏明显大于对侧，肾间质大量炎性细胞浸润以及胶原纤维沉积，肾小管上皮细胞变性、浊肿、脱落甚至坏死，肾小管部分萎缩，管腔闭塞或扩张，与文献报道相似，符合肾间质纤维化病理改变，模型复制成功。本次实验成功率为92％，UUO术后大鼠死亡5只，用备用大鼠补足。术后开始给药，依普利酮组给以依普利酮100mg/（kg.d）从饲料中加入，肾络通组给以肾络通煎剂26g/（kg.d）入水瓶饮用，假手术组及UUO组给予等容量生理盐水饮用。均每天1次。连续干预10天。观察一般情况。于实验结束时，称重，断头取血，分离血清，用于指标检测；取左侧（梗阻侧）肾脏称重，计算各组肾重/体重比值，进行肾脏组织HE、MASSON染色，观察组织病理学改变。数据资料结果使用SPSS13.0for windows统计软件分析处理。各组数据比较前先进行正态性及方差齐性检验，满足正态性及方差齐性者，采用方差分析，多组比较采用单因素方差分析（One-wayANOVA），组间比较采用LSD检验。数值变量以均数加减标准差（x±s）表示。显着性差异水平以0.05和0.01为标准。结果：1各组大鼠一般情况比较实验中大鼠死亡5只，用备用大鼠补足。整个实验过程中假手术组大鼠一般情况良好：每日饮食、饮水量稳定，体重逐步增长，毛发有光泽，活动敏捷，对外界刺激反应灵敏。UUO术后1天，造模动物的进食量、饮水量、体重均有所下降。术后6天，UUO组大鼠整体状态欠佳：活动较前明显减少，毛发松散无光泽。与假手数组相比，造模动物体重不增反而下降。UUO手术10天后，造模大鼠体重增长缓慢，且与假手术组有显着性差异（P<0.01, P<0.05）；与UUO组相比，依普利酮组及肾络通组大鼠梗阻侧肾重，肾重/体重指数明显下降（P<0.01, P<0.05）。UUO手术后，造模大鼠进食量、饮水量、24h尿量均有所下降，但各组之间无明显差异（P>0.05）。2各组大鼠肾组织病理形态学改变HE染色显示，假手术组肾脏结构基本正常，肾小管上皮细胞排列整齐，无浊肿，间质无水肿，偶见炎性细胞浸润；UUO组肾间质大量炎性细胞浸润，肾小管明显扩张，上皮细胞变性、浊肿、脱落甚至坏死；依普利酮组及肾络通组小管扩张及上皮细胞水肿坏死与UUO组基本相同，但炎性细胞浸润明显减轻。Masson染色显示，假手术组有少量胶原纤维表达，可见于肾小球/肾小管基底膜及肾间质；UUO组结构紊乱，胶原成分显着增多，以肾间质为主；依普利酮组及肾络通组胶原纤维表达较假手术组增多，但与UUO组相比明显减少。3各组大鼠肾间质炎性细胞计数比较与假手术组比较，UUO组大鼠炎性细胞浸润明显增多（P<0.01）。与UUO组相比，依普利酮组、肾络通组大鼠炎性细胞浸润减少有显着性差异（P<0.01, P<0.05）。与髓质区相比，皮质区炎性细胞浸润明显增多有显着性差异（P<0.01, P<0.05）；与皮质区比较，皮髓交界区质区炎性细胞浸润减少，有显着性差异（P<0.01, P<0.05）。第三部分肾络通对梗阻性肾病大鼠MCP-1、TNF-α、IL-1β、iNOS等炎性介质表达的影响方法：动物分组、模型复制、给药方法同第二部分，共10天。实验结束时留取血清和肾脏标本，采用ELISA测定血清MCP-1含量，放射免疫法测定血清TNF-α、iNOS、IL-1β含量，Real time-PCR、免疫组化、Western blot检测MCP-1、TNF-αmRNA及蛋白的表达。统计学方法同第二部分。结果：1各组大鼠血清MCP-1、TNF-α、iNOS、IL-1β表达比较与假手术组比较，UUO组中血清MCP-1、TNF-α、iNOS、IL-1β含量明显升高，差异有统计学意义（P<0.01, P<0.05）。与UUO组比较，依普利酮组及肾络通组血清MCP-1、TNF-α、iNOS、IL-1β含量均减少，其中以依普利酮组更为明显，差异有统计学意义（P<0.01, P<0.05）。2Real-time PCR检测MCP-1mRNA、TNF-αmRNA的表达与假手术组比较，UUO组中MCP-1mRNA及TNF-αmRNA表达明显增强（P<0.01）。与UUO组比较，依普利酮组及肾络通组MCP-1mRNA及TNF-α mRNA表达均显着下调，其中以依普利酮组更为明显，差异有统计学意义（P<0.01）。3免疫组化检测MCP-1、TNF-α表达假手术组MCP-1、TNF-α呈弱表达， UUO组中MCP、TNF-α表达明显增强，主要表达于肾小管上皮细胞胞浆。与UUO组比较，依普利酮及肾络通组其表达范围及强度均显着减弱。4Western Blot检测MCP-1及TNF-α蛋白表达与假手术组比较，UUO组MCP-1、TNF-α蛋白表达明显上调。与UUO组比较，依普利酮组及肾络通组其表达均被下调，其中以依普利酮组下调更为明显，差异有统计学意义（P<0.01）。第四部分肾络通对梗阻性肾病大鼠血清醛固酮及SGK-1表达的影响方法：动物分组、模型复制、给药方法同第二部分，共10天。实验结束时留取血清和肾脏标本，采用放射免疫分析法检测血清醛固酮含量，Real-time PCR、Western blot测定肾组织SGK-1mRNA及蛋白表达。统计学方法同第二部分。结果：1放射免疫法检测各组大鼠血清醛固酮含量与假手术组比较，UUO组中血清醛固酮含量明显升高，差异有统计学意义（P<0.01）；与UUO组比较，依普利酮组血清醛固酮含量有下降趋势，但无统计学意义（P>0.05），肾络通组血清醛固酮含量明显降低，有统计学差异（P<0.01）。2Real-time PCR检测SGK-1mRNA的表达与假手术组比较，UUO组中SGK-1mRNA表达明显增强。与UUO组比较，依普利酮及肾络通组SGK-1mRNA表达均显着下调。3Western Blot检测SGK-1蛋白表达与假手术组比较，UUO组SGK-1蛋白表达明显上调。与UUO组比较，依普利酮组及肾络通组其表达均被下调，其中以依普利酮组下降更为显着。第五部分肾络通对梗阻性肾病大鼠及α-SMA及NF-κB表达的影响方法：动物分组、模型复制、给药方法同第二部分，共10天。实验结束时留取肾脏标本，采用免疫组化、Western Blot检测α-SMA及NF-кB蛋白表达。统计学方法同第二部分。结果：1免疫组化检测各组大鼠NF-κB、α-SMA表达假手术组NF-κB呈弱表达，主要表达于肾小管上皮细胞；UUO组NF-κB表达明显增强，近曲小管尤为明显；依普利酮组及肾络通组NF-κB表达范围及强度较UUO组均明显减弱。假手术组α-SMA仅表达于血管，肾间质及上皮细胞未见表达；UUO组α-SMA表达明显增强，以扩张的肾小管表达为甚，间质亦可见到阳性表达；依普利酮组及肾络通组α-SMA局部呈中度表达，间质可见少量表达。2Western Blot检测各组大鼠α-SMA、NF-кB表达与假手术组比较，UUO组α-SMA、NF-кB蛋白表达明显上调，差异有统计学意义（P<0.01）。与UUO组比较，依普利酮组及肾络通组其表达均被下调，其中以依普利酮组下调更为明显，差异有统计学意义（P<0.01）。结论：1“毒”和“瘀”是慢性肾病的基本病机，以炎性损伤为特征的“毒”为起因，以纤维化为表现的“瘀”为结果，二者相互关联、相互促进，导致和加重肾间质纤维化，且贯穿于肾脏病的整个病理过程。2结扎单侧输尿管复制肾间质纤维化实验动物模型，肾间质炎性细胞浸润及胶原成分显着增多。肾络通及依普利酮能显着减轻UUO诱导的肾实质损伤，减少炎性细胞浸润，延缓间质纤维化进展。3炎性损伤是梗阻性肾病的重要起始因素，炎性介质在其中发挥重要作用。其中，MCP-1、TNF-α、IL-1β及iNOS等炎性介质是慢性肾脏疾病中介导的肾脏炎症和间质纤维化的重要因子。肾络通和依普利酮能下调其表达，从而抑制梗阻性肾病中炎性损伤和炎性细胞浸润，进而延缓间质纤维化的进展。4醛固酮可通过激活其下游效应介质SGK-1引起肾脏炎性损伤。肾络通和依普利酮能降低血清醛固酮含量，下调SGK-1mRNA和蛋白表达，从而进一步抑制梗阻性肾病炎性损伤和间质纤维化进展。5肾络通和依普利酮可以通过NF-κB通路，下调炎性介质表达，抑制信号传导，从而抑制细胞的表型转化，减轻肾脏炎性损伤，减缓肾间质纤维化的进展。
二、HSPG对培养的人血管壁细胞增殖和PG合成的影响及其可能机制（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、HSPG对培养的人血管壁细胞增殖和PG合成的影响及其可能机制（论文提纲范文）
（1）华蟾素注射液治疗结肠癌腹水的优效人群分析及对VM的作用机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 恶性腹水的中西医研究进展 |
| 1. 恶性腹水的西医研究进展 |
| 1.1 恶性腹水的形成机制 |
| 1.2 恶性腹水的西医诊断 |
| 1.3 恶性腹水的西医治疗 |
| 2. 恶性腹水的中医研究进展 |
| 2.1 恶性腹水的中医病因病机 |
| 2.2 恶性腹水的中医辨证 |
| 2.3 恶性腹水的中医治疗 |
| 3. 结语 |
| 参考文献 |
| 综述二 血管生成拟态(VM)在结肠癌中的研究进展 |
| 1. 结肠癌VM的发现及生物学特性 |
| 2. VM的形成机制 |
| 2.1 肿瘤缺氧微环境与VM |
| 2.2 肿瘤干细胞与VM |
| 2.3 上皮间质转化与VM |
| 2.4 促血管生成相关因子与VM |
| 2.5 VM形成相关信号通路 |
| 3. VM与结肠癌不良预后的相关性 |
| 4. VM与结肠癌的治疗 |
| 5. 结语 |
| 参考文献 |
| 综述三 华蟾素注射液干预肿瘤血管生成作用的研究进展 |
| 1. 肿瘤血管生成的病理机制 |
| 2. 华蟾素注射液的主要化学成分及其抗肿瘤作用 |
| 3. 华蟾素注射液干预肿瘤血管生成的机制 |
| 3.1 VEGF/VEGFR通路抑制作用 |
| 3.2 MMPs/TIMPs通路抑制作用 |
| 3.3 肿瘤血管内皮细胞诱导凋亡作用 |
| 3.4 其他潜在靶点 |
| 4. 结语 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第二部分 临床研究 华蟾素注射液腹腔灌注治疗结肠癌恶性腹水的疗效评价及优效人群分析 |
| 1. 资料与方法 |
| 1.1 研究方法 |
| 1.2 研究对象 |
| 1.3 病例筛选方法 |
| 1.4 治疗方法 |
| 1.5 提取指标 |
| 1.6 疗效评价 |
| 1.7 安全性评价 |
| 1.8 统计方法 |
| 1.9 技术路线图 |
| 2. 研究结果 |
| 2.1 总体资料分析 |
| 2.2 疗效评价 |
| 2.3 安全性评价 |
| 2.4 优效人群特征筛选 |
| 3. 讨论 |
| 3.1 结肠癌恶性腹水的治疗现状 |
| 3.2 优效人群研究的必要性 |
| 3.3 华蟾素注射液治疗结肠癌恶性腹水的潜在机制 |
| 参考文献 |
| 第三部分 实验研究 基于血管生成拟态(VM)研究华蟾素注射液抑制结肠癌血性腹水的机制 |
| 实验一: 华蟾素注射液抑制裸鼠结肠癌血性腹水生成的研究 |
| 1. 实验材料 |
| 2. 实验方法 |
| 3. 实验结果 |
| 4. 讨论 |
| 实验二: 华蟾素注射液体外抑制结肠癌细胞增殖、迁移、侵袭的研究 |
| 1. 实验材料 |
| 2. 实验方法 |
| 3. 实验结果 |
| 4. 讨论 |
| 实验三: 华蟾素注射液体内、体外抑制结肠癌细胞VM形成的研究 |
| 1. 实验材料 |
| 2. 实验方法 |
| 3. 实验结果 |
| 4. 讨论 |
| 实验四: 华蟾素注射液抑制结肠癌VM形成的机制研究 |
| 1. 实验材料 |
| 2. 实验方法 |
| 3. 实验结果 |
| 4. 讨论 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 1. 研究结论 |
| 2. 研究创新性 |
| 3. 不足与展望 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（2）血清PDGF-BB/PDGFR-β配体受体及MCP-1、MMP-9水平与冠心病血瘀证的相关性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一: 动脉粥样硬化中血小板衍生生长因子及其受体的研究进展 |
| 1 PDGF |
| 2 PDGFR |
| 3 PDGF与PDGFR的识别 |
| 4 PDGF/PDGFR与动脉粥样硬化 |
| 5 评述与展望 |
| 参考文献 |
| 综述二: 中医药对PDGF及PDGFR调控作用的研究进展 |
| 1 中药提取物对PDGF及PDGFR的调控作用 |
| 2 单味中药对PDGF及PDGFR的调控作用 |
| 3 中药复方对PDGF及PDGFR的调控作用 |
| 4 中医针灸疗法对PDGF和PDGFR的调控作用 |
| 5 评述与展望 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第二部分 实验研究 |
| 实验一 冠心病患者血清PDGF-BB、PDGFR-β、MCP-1、MMP-9水平及外周血单核细胞PDGFR-βmRNA表达水平的研究 |
| 资料与方法 |
| 结果 |
| 实验二 冠心病血瘀证血清PDGF-BB、PDGFR-β、MCP-1、MMP-9水平及外周血单核细胞PDGFR-βmRNA表达水平的研究 |
| 资料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（3）基于NF-κB通路探究益气凉血生肌方干预兔颈动脉球囊损伤修复的机制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 文献综述 |
| 综述一 介入术后损伤修复过程中炎症反应的研究进展 |
| 1 介入术后生理病理机制 |
| 2 介入术后相关炎症标志物与通路 |
| 3 干预介入术后炎症的相关研究 |
| 4 介入术后炎症反应的治疗 |
| 参考文献 |
| 综述二 中医药对冠状动脉介入术后炎症干预的循证研究进展 |
| 1 中医对PCI术后炎症的认识 |
| 2 中药复方对PCI术后炎症的干预 |
| 3 中成药对PCI术后炎症的干预 |
| 4 中药注射剂对PCI术后炎症的干预 |
| 5 小结 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 材料和方法 |
| 1 实验材料 |
| 2 方法 |
| 结果 |
| 1 动物的一般情况及体重变化比较 |
| 2 超声检测结果比较 |
| 3 病理分析结果比较 |
| 4 Elisa结果比较 |
| 5 流式细胞检测结果比较 |
| 6 免疫荧光结果比较 |
| 7 RT-PCR结果比较 |
| 8 Western blot结果比较 |
| 9 透射电镜观察超微结构比较 |
| 讨论 |
| 1 介入技术运用广泛,但面临诸多挑战 |
| 2 内皮损伤修复是PCI术后的主要过程 |
| 3 VEC及VSMC在内皮损伤修复中发挥着重要作用 |
| 4 TLR4/NF-κB通路是PCI术后炎症重要机制 |
| 5 NO/ET-1是调节血管损伤修复的重要物质 |
| 6 本研究内皮损伤动物模型的选择 |
| 7 益气凉血生肌方促进血管损伤修复 |
| 结论 |
| 创新点 |
| 不足与展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（4）不同品系Apoe-/-小鼠颈动脉结扎后内膜增生的比较及N-乙酰半胱氨酸（NAC）的干预研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略语 |
| 第一部分:C57BL/6-Apoe~(-/-)与C3H-Apoe~(-/-)小鼠颈动脉结扎后动脉内膜增生的差异分析及针对炎症细胞、氧化应激的干预研究 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 研究对象 |
| 2.1.2 主要仪器和试剂 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 动物分组 |
| 2.2.2 小鼠颈动脉结扎动脉硬化模型的建立 |
| 2.2.3 小鼠颈动脉获取及形态学测量 |
| 2.2.4 H&E染色 |
| 2.2.5 油红O染色 |
| 2.2.6 免疫组织化学分析 |
| 2.2.7 ELISA检测血脂 |
| 2.2.8 血中性粒细胞和T淋巴细胞的流式细胞学分析 |
| 2.2.9 ELISA法检测炎症介质 |
| 2.2.10 统计分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 B6-Apoe~(-/-)小鼠与C3H-Apoe~(-/-)小鼠的空腹血脂水平 |
| 3.2 在不干扰颈动脉血流的情况下B6-Apoe~(-/-)小鼠与C3H-Apoe~(-/-)小鼠的颈动脉动脉硬化 |
| 3.3 B6-Apoe~(-/-)小鼠与C3H-Apoe~(-/-)小鼠颈动脉结扎后的颈动脉硬化 |
| 3.4 B6-Apoe~(-/-)小鼠与C3H-Apoe~(-/-)小鼠内膜病变的细胞学分析 |
| 3.5 外周血中性粒细胞和T淋巴细胞的流式细胞学分析 |
| 3.6 抗中性粒细胞抗体干预实验 |
| 3.6.1 抗Ly6G抗体治疗后动脉内膜增生病变形态学测量 |
| 3.6.2 抗Ly6G抗体治疗后内膜增生病变的细胞学分析 |
| 3.7 干扰巨噬细胞分化抗体干预实验 |
| 3.7.1 抗CSF-1R抗体治疗实验动脉内膜增生病变形态学测量 |
| 3.7.2 抗CSF-1R抗体治疗实验动脉内膜增生病变的细胞学分析 |
| 3.8 抗氧化剂NAC治疗实验结果 |
| 3.8.1 NAC治疗实验动脉内膜增生病变形态学测量 |
| 3.8.2 NAC治疗后内膜病变的免疫组织化学分析 |
| 3.8.3 NAC治疗后小鼠血浆炎性因子测定 |
| 4 讨论 |
| 4.1 遗传背景、血流对两个品系Apoe~(-/-)小鼠颈动脉硬化的影响 |
| 4.2 血脂与脂质沉积对两个品系Apoe~(-/-)小鼠颈动脉硬化的影响 |
| 4.3 炎症细胞对颈动脉结扎后颈动脉内膜增生的影响 |
| 4.4 血管平滑肌细胞参与颈动脉结扎后动脉内膜病变形成 |
| 4.5 氧化应激与颈动脉内膜增生 |
| 4.6 血浆炎性细胞因子与颈动脉内膜增生 |
| 5 结论 |
| 第二部分:N-乙酰半胱氨酸(NAC)通过调节氧化应激及炎症反应抑制血管平滑肌细胞的增殖和迁移 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 研究对象 |
| 2.1.2 主要仪器和试剂 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 ox-LDL刺激血管平滑肌细胞 |
| 2.2.2 MTT法检测血管平滑肌细胞的增殖能力 |
| 2.2.3 划痕试验检测血管平滑肌细胞的迁移能力 |
| 2.2.4 流式细胞学方法测量血管平滑肌ROS水平 |
| 2.2.5 ELISA法检测细胞上清液中的MCP-1、TNF-α及 IL-10 的含量 |
| 2.2.6 分光光度法检测血管平滑肌细胞培养液中的一氧化氮(NO)的含量 |
| 2.2.7 统计分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 NAC对血管平滑肌细胞增殖的影响 |
| 3.2 NAC对血管平滑肌细胞迁移能力的影响 |
| 3.3 NAC对血管平滑肌细胞氧化应激的影响 |
| 3.4 NAC对血管平滑肌细胞分泌的炎性因子(MCP-1、TNF-α、IL-10)的影响 |
| 3.5 NAC对血管平滑肌细胞分泌一氧化氮(NO)的影响 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（5）肉苁蓉苯乙醇总苷脂质体抗肝纤维化的作用及机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一部分 肉苁蓉苯乙醇总苷脂质体的制备及评价研究 |
| 1 研究内容与方法 |
| 1.1 仪器与材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第二部分 肉苁蓉苯乙醇总苷脂质体对BSA致大鼠肝纤维化的保护作用研究 |
| 1 研究内容与方法 |
| 1.1 仪器与材料 |
| 1.2 CPhGs脂质体的制备方法 |
| 1.3 空白脂质体的制备 |
| 1.4 肝纤维化大鼠模型的建立与分组 |
| 1.5 血清肝功能指标的检测 |
| 1.6 血清TGF-β、肝纤四项及肝组织HYP检测 |
| 1.7 肝组织标本大体观 |
| 1.8 肝组织病理学检测 |
| 1.9 免疫组化 |
| 1.10 聚合酶链式反应 |
| 1.11 蛋白免疫印迹 |
| 1.12 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第三部分 肉苁蓉苯乙醇总苷脂质体对HSCs增殖、凋亡、周期的影响及分子机制研究 |
| 1 研究内容与方法 |
| 1.1 仪器与材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.3 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间获得的学术成果 |
| 个人简历 |
| 导师评阅表 |
（6）通过体外细胞培养观察血液透析对内皮细胞功能的变化及其可能机制（论文提纲范文）
| 个人简历 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 第一部分 健康者与MHD病人血清对内皮细胞增殖、迁移的影响 |
| 前言 |
| 方法与材料 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第二部分 体外不同环境下内皮细胞的增殖和迁移 |
| 前言 |
| 方法与材料 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第三部分 单次血液透析对内皮细胞增殖、迁移的影响 |
| 前言 |
| 方法与材料 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 中英文缩略词表 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表论文情况 |
（7）雌激素对女性H型高血压发病的影响研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 主要英文缩略词简表 |
| 第1章 前言 |
| 第2章 研究对象与方法 |
| 2.1 研究对象 |
| 2.1.1 对象选择 |
| 2.1.2 样本量计算 |
| 2.2 研究方法 |
| 2.2.1 问卷调查 |
| 2.2.2 人体测量和实验室检测 |
| 2.3 数据统计分析 |
| 2.4 质量控制 |
| 第3章 结果 |
| 3.1 调查对象的一般特征 |
| 3.2 H型高血压的影响因素分析 |
| 3.2.1 单因素分析 |
| 3.2.2 H型高血压的多因素分析 |
| 3.2.3 雌二醇与H型高血压的其他影响因素的交互作用分析 |
| 3.3 女性H型高血压患者雌激素水平情况分析 |
| 3.3.1 各年龄阶段、高血压分级之间的雌激素水平、Hcy水平的比较 |
| 3.3.2 雌激素与Hcy水平、高血压分级的相关性分析 |
| 3.4 颈动脉内膜中层厚度(IMT)与Hcy水平、雌激素水平的相关性分析 |
| 3.4.1 不同IMT分组之间的雌激素、CysC、hs-CRP、Hcy的比较 |
| 3.4.2 IMT与雌激素、CysC、hs-CRP、Hcy的相关性分析 |
| 第4章 讨论 |
| 4.1 H型高血压的影响因素 |
| 4.2 女性H型高血压患者雌激素水平情况分析 |
| 4.3 IMT与Hcy、雌激素等的相关性分析 |
| 4.4 研究的局限性 |
| 第5章 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 作者攻读学位期间的科研成果 |
| 致谢 |
（8）心脏Telocytes协同心脏干细胞治疗缺血性心肌梗死及其机理的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词注释表 |
| 第一章 前言 |
| 1.1 心血管疾病的现状 |
| 1.2 心肌梗死 |
| 1.3 心肌梗死的治疗 |
| 1.4 细胞治疗 |
| 1.5 细胞外泌体(exosome)治疗 |
| 1.6 MicroRNA治疗 |
| 1.7 心脏Telocyte与心脏再生 |
| 1.8 本论文的主要研究内容 |
| 1.9 本论文的创新点 |
| 第二章 心脏Telocytes协同心脏干细胞对缺血性心肌梗死的疗效优于单独细胞移植 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 材料 |
| 2.3 方法 |
| 2.4 结果 |
| 2.5 讨论 |
| 第三章 心脏Telocytes分泌外泌体对缺血性心肌梗死的疗效研究 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 材料 |
| 3.3 方法 |
| 3.4 结果 |
| 3.5 讨论 |
| 第四章 心脏Telocytes外泌体内所含的miRNA-21-5p对缺血性心肌梗死的疗效研究. |
| 4.1 前言 |
| 4.2 材料 |
| 4.3 方法 |
| 4.4 结果 |
| 4.5 讨论 |
| 第五章 细胞、外泌体及miRNA对缺血梗死心肌疗效的相互比较 |
| 5.1 前言 |
| 5.2 方法 |
| 5.3 结果 |
| 5.4 讨论 |
| 第六章 心脏Telocytes分泌外泌体的蛋白组学研究 |
| 6.1 前言 |
| 6.2 材料 |
| 6.3 方法 |
| 6.4 结果 |
| 6.5 讨论 |
| 第七章 老年心脏 Telocytes与年青心脏 Telocytes基因表达芯片的比较与分析 |
| 7.1 前言 |
| 7.2 材料 |
| 7.3 方法 |
| 7.4 结果 |
| 7.5 讨论 |
| 第八章 全文总结 |
| 参考文献 |
| 特别鸣谢 |
| 硕博士期间发表论文清单 |
| 致谢 |
（9）榅桲提取物对高血压大鼠的影响及作用机制的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 榅桲提取物对RHR血压的影响及有效部位的筛选 |
| 1 榅桲不同药用部位对RHR血压及血液流变学的影响 |
| 1.1 材料与方法 |
| 1.1.1 实验材料 |
| 1.1.2 实验方法 |
| 1.1.3 统计学分析方法 |
| 1.2 结果 |
| 2 榅桲叶提取物对RHR血压及相关指标的影响 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 实验材料 |
| 2.1.2 实验方法 |
| 2.1.3 统计学分析方法 |
| 2.2 结果 |
| 3 榅桲叶抗高血压有效部位筛选及抗氧化作用的实验研究 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 实验材料 |
| 3.1.2 实验方法 |
| 3.1.3 统计学分析方法 |
| 3.2 结果 |
| 4 榅桲叶化学成分的初步分析 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 实验材料 |
| 4.1.2 实验方法 |
| 4.2 结果 |
| 5 讨论 |
| 6 小结 |
| 第二部分 榅桲总黄酮对SHR血压及主要靶器官的影响 |
| 1 榅桲叶总黄酮提取分离纯化及含量测定 |
| 1.1 材料与方法 |
| 1.1.1 实验材料 |
| 1.1.2 实验方法 |
| 1.2 结果 |
| 2 榅桲叶总黄酮对SHR血压的影响 |
| 2.1 材料及方法 |
| 2.1.1 实验材料 |
| 2.1.2 实验方法 |
| 2.1.3 统计学分析方法 |
| 2.2 结果 |
| 3 榅桲叶总黄酮对SHR心脏及其它主要靶器官的影响 |
| 3.1 材料及方法 |
| 3.1.1 实验材料 |
| 3.1.2 实验方法 |
| 3.1.3 统计学分析方法 |
| 3.2 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第三部分 榅桲总黄酮对SHR血压及心脏功能影响的主要机制研究 |
| 1 榅桲总黄酮对SHR肾素血管紧张素-醛固酮系统的影响 |
| 1.1 材料与方法 |
| 1.1.1 材料 |
| 1.1.2 检测方法 |
| 1.1.3 统计学分析方法 |
| 1.2 结果 |
| 2 榅桲总黄酮对SHR炎症因子的影响 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 材料 |
| 2.1.2 检测方法 |
| 2.1.3 统计学分析方法 |
| 2.2 结果 |
| 3 榅桲总黄酮对SHR大鼠血管内皮功能的影响 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 材料 |
| 3.1.2 检测方法 |
| 3.1.3 统计学分析方法 |
| 3.2 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 综述 中药抗高血压活性成分及作用机制研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间获得的学术成果 |
| 个人简历 |
| 导师评阅表 |
（10）肾络通对梗阻性肾病大鼠炎性介质表达的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩写 |
| 引言 |
| 第一部分 “毒”、“瘀”伤肾机制及关联 |
| 前言 |
| 1 毒与肾病 |
| 2 瘀与肾病 |
| 3 毒瘀相关在肾病中的作用机制 |
| 4 毒瘀病机学说的临床意义 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 肾络通对梗阻性肾病大鼠肾脏组织病理形态学的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第三部分 肾络通对梗阻性肾病大鼠 MCP-1、TNF-α、IL-1β、iNOS 等炎性介质表达的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第四部分 肾络通对梗阻性肾病大鼠血清醛固酮及 SGK-1 表达的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第五部分 肾络通对梗阻性肾病大鼠α-SMA 及 NF-κB 表达的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 综述一 炎性损伤在梗阻性肾病小管间质损害中的作用 |
| 参考文献 |
| 综述二 中医药防治梗阻性肾病的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
四、HSPG对培养的人血管壁细胞增殖和PG合成的影响及其可能机制（论文参考文献）
- [1]华蟾素注射液治疗结肠癌腹水的优效人群分析及对VM的作用机制研究[D]. 王一同. 北京中医药大学, 2021(01)
- [2]血清PDGF-BB/PDGFR-β配体受体及MCP-1、MMP-9水平与冠心病血瘀证的相关性研究[D]. 张广辉. 北京中医药大学, 2020(04)
- [3]基于NF-κB通路探究益气凉血生肌方干预兔颈动脉球囊损伤修复的机制[D]. 贾文浩. 北京中医药大学, 2020(04)
- [4]不同品系Apoe-/-小鼠颈动脉结扎后内膜增生的比较及N-乙酰半胱氨酸（NAC）的干预研究[D]. 赵健. 中国医科大学, 2020(01)
- [5]肉苁蓉苯乙醇总苷脂质体抗肝纤维化的作用及机制研究[D]. 张石蕾. 新疆医科大学, 2020(07)
- [6]通过体外细胞培养观察血液透析对内皮细胞功能的变化及其可能机制[D]. 李熙惠. 广西医科大学, 2019(08)
- [7]雌激素对女性H型高血压发病的影响研究[D]. 张影. 南华大学, 2019(01)
- [8]心脏Telocytes协同心脏干细胞治疗缺血性心肌梗死及其机理的研究[D]. 廖肇福. 暨南大学, 2019
- [9]榅桲提取物对高血压大鼠的影响及作用机制的研究[D]. 周文婷. 新疆医科大学, 2014(05)
- [10]肾络通对梗阻性肾病大鼠炎性介质表达的影响[D]. 王筝. 河北医科大学, 2014(09)