一、牙周病与血清骨钙素之间的关系（论文文献综述）
廖丹,葛颂[1]（2020）在《淫羊藿苷与补肾固齿丸对大鼠慢性牙周炎牙槽骨重建的比较研究》文中指出目的观察淫羊藿苷（icariin,ICA）与补肾固齿丸改善大鼠慢性牙周炎牙槽骨吸收情况,探讨ICA用于治疗慢性牙周炎的效果及可能机制。方法建立大鼠牙周炎模型后,随机分为慢性牙周炎组（P组）、ICA低剂量组（L组）、ICA高剂量组（H组）以及补肾固齿丸组（B组）。各组分别给药1个月、2个月,通过检测血清骨转换标志物血清骨钙素（osteocalcin,OCN）,同时采用显微CT（micro computed tomography,Micro-CT）扫描后三维重建,检测特定位点骨参数及记录釉-牙骨质界-牙槽嵴顶（cement-to-enamel junction-alveolar bone crest,CEJ-ABC）的距离为牙槽骨吸收值,组织学切片评价ICA对大鼠实验性牙周炎牙槽骨修复重建的影响。结果 H组、L组及B组与P组相比,血清OCN均有所降低（P <0.05）;H组、L组及B组的骨体积分数、骨小梁数目较P组明显增大（P <0.05）。H组、B组与P组相比,骨小梁厚度明显增大（P <0.05）,骨小梁分离度明显减小（P <0.05）;L组相应骨参数变化趋势与H组一致,但仅在给药2个月时骨小梁分离度与P组差异有统计学意义（P <0.05）。对牙槽骨吸收值测量分析,相较于P组,L组、H组、2个月时的B组CEJ-ABC均明显降低,差异有统计学意义（P <0.05）。结论 ICA与补肾固齿丸能改善实验性大鼠慢性牙周炎的牙槽骨吸收情况,其机制可能与调节血清骨钙素水平有关。
安雅男[2]（2020）在《破骨细胞炎症通路激活和胞葬作用抑制介导糖尿病性骨质疏松的发病机制研究》文中研究说明随着生活水平日益提高,糖尿病（DM）已经成为最常见的威胁人类和动物健康的内分泌代谢紊乱性疾病,且人和动物患糖尿病的症状相似,均伴随着严重并发症的发生。其中,糖尿病性骨质疏松（DOP）已然成为目前讨论的热点问题。DOP是一种系统性的代谢性骨病,是以骨量减少、骨质微观结构退化为特征的全身性骨骼疾病。目前发现DOP与高血糖症、钙磷代谢紊乱和胰岛素缺乏等因素有关。然而,其发病机制尚不清楚,严重影响其有效防治。DOP与体内炎症存在一定的联系。活性氧（ROS）是氧正常代谢的天然副产物,而高浓度ROS却会扰乱氧化剂与抗氧化剂的平衡,进而导致炎性疾病的发生。NLRP3炎性小体是一种蛋白质复合物,研究发现它不仅与炎性疾病有关,而且与许多代谢性疾病有关,并发现NLRP3炎性小体在机体骨吸收中起到非常重要的作用。核因子κB（NF-κB）是一种转录因子,可调节多个基因的表达并控制各种细胞功能,包括炎症信号传导等。丝裂原活化蛋白激酶（MAPKs）可以控制多种细胞活动,包括基因表达、有丝分裂等。特别是,MAPKs中ERK、p38和JNK在调节炎症和免疫反应中起重要作用。巨噬细胞是关键的免疫细胞,当组织受到损害时,中性粒细胞会迅速蓄积并经历凋亡而通过巨噬细胞清除凋亡细胞的过程称为胞葬作用。未能清除的凋亡细胞会加剧体内的炎症发生,因此胞葬作用在调节机体炎症反应以及促进炎症消退中起到关键作用。破骨细胞是一种巨大的多核细胞,起源于单核巨噬细胞/单核系造血前体细胞,被认为是治疗骨质疏松的靶细胞之一,在骨吸收过程中发挥重要作用。而伴侣动物的自发糖尿病模型较啮齿动物与人类临床糖尿病更相似,并且犬和人类有更相似的染色体和基因结构,更合适作为人类疾病转化医学模型。因此本研究以破骨细胞为靶细胞,以人工诱导糖尿病性骨质疏松大鼠和自发糖尿病性骨质疏松犬为疾病模型,连同人医临床样本为对象,考察高糖是否能够通过破骨细胞ROS的产生、NLRP3炎性小体介导的炎症激活及胞葬作用被抑制共同增强破骨细胞骨吸收,并且在分子以及病理水平上深入探讨了人和动物糖尿病性骨质疏松症的发病机制。首先,我们在国内外首次发现破骨细胞NLRP3炎性小体介导的炎症激活是糖尿病性骨质疏松的发病因素。利用倒置显微镜对分离的破骨细胞诱导情况进行检测;借助荧光酶标仪对ROS产生情况进行探查;通过Western blot技术对炎症相关通路蛋白MAPKs（p-ERK、p-p38、p-JNK）、NF-κB（核NF-κB、p-IκB、IKK）以及NLRP3炎症小体（ASC、Caspase-1、IL-18、IL-1β、NLRP3）的表达水平进行分析;使用ELISA对IL-18、IL-1β的分泌情况进行考查;应用各通路抑制剂处理探究ROS、MAPKs通路、NF-κB通路和NLRP3炎症小体之间的上下游关系。结果表明,经TRAP染色证实,分离到的SD大鼠骨髓巨噬细胞（BMMs）经M-CSF和RANKL诱导后得到的细胞均为成熟的破骨细胞;高糖能够诱导破骨细胞ROS产生且该ROS产生呈NOX2依赖性;高糖能够诱导破骨细胞MAPKs通路蛋白、NF-κB通路蛋白和NLRP3炎症小体蛋白的表达以及IL-18、IL-1β的分泌,且以上最佳诱导时间为36 h,最佳诱导浓度为35 mM;DPI（ROS抑制剂）能够显着抑制MAPKs通路蛋白、NF-κB通路蛋白和NLRP3炎性小体蛋白表达以及IL-18、IL-1β分泌;且PD98059（ERK抑制剂）、SP600125（JNK抑制剂）和SB203580（p38抑制剂）能够显着抑制NF-κB通路蛋白和NLRP3炎症小体蛋白表达以及IL-18、IL-1β分泌,但不能抑制ROS产生;BAY11-7082（NF-κB抑制剂）能够显着抑制NLRP3炎症小体蛋白表达以及IL-18、IL-1β分泌,但不能抑制ROS的产生以及MAPKs通路蛋白表达;而Ac-YVAD-cmk（Caspase-1抑制剂）对其它通路均不存在抑制作用。综上所述,高糖通过诱导破骨细胞ROS产生并激活MAPKs/NF-κB/NLRP3炎症通路诱导破骨细胞炎症发生,且ROS产生发生在MAPKs、NF-κB和NLRP3上游;MAPKs位于NF-κB和NLRP3上游;而NF-κB位于NLRP3炎性小体上游。其次,在国际上,我们率先阐明破骨细胞炎症激活以及胞葬作用抑制共同促进破骨细胞骨吸收能力的增强,是糖尿病性骨质疏松发生的主要因素。应用流式细胞术对破骨细胞胞葬作用的发生情况进行检测;利用ELISA对LXA 4的表达情况进行考查;借助Western blot技术对MertK蛋白的表达水平进行分析,通过Ac-YVAD-cmk处理探究高糖诱导破骨细胞炎症发生与胞葬作用之间的关系;使用扫描电子显微镜对破骨细胞骨吸收能力进行观察,并采用Ac-YVAD-cmk、胰岛素和LXA 4处理及基因沉默NLRP3解析胞葬作用与炎症的发生与骨吸收之间的关系。结果显示,高糖能够显着抑制破骨细胞胞葬作用的发生和LXA 4的分泌以及MertK蛋白的表达,而Ac-YVAD-cmk处理能够显着逆转高糖的上述抑制作用;高糖能够诱导破骨细胞骨吸收能力的增强,而Ac-YVAD-cmk、胰岛素和LXA 4处理、基因沉默NLRP3却能够显着抑制该增强。综上所述,高糖通过激活破骨细胞NLRP3炎性小体介导的炎症及抑制胞葬作用共同增强破骨细胞骨吸收。再次,我们通过链脲佐菌素（STZ）诱导建立了糖尿病性骨质疏松大鼠模型,在体内验证了破骨细胞炎症反应以及胞葬作用被抑制是糖尿病性骨质疏松发生的机制,并且在国内外率先发现胞葬作用增强剂LXA 4能够作为治疗糖尿病性骨质疏松的潜在药物。利用ELISA对建模鼠检测破骨细胞及骨组织标记物;采用双能X射线吸收仪探查骨密度和骨矿盐;应用HE染色考查骨小梁等骨微结构完整性;借助TRAP染色测定骨组织中破骨细胞含量;通过激光共聚焦显微镜对骨组织中Cathepsin K、p-ERK、NF-κB、NLRP3以及MertK进行共定位;使用Western blot以及ELISA分析骨组织炎症相关通路蛋白p-ERK、p-p38、p-JNK、核NF-κB、p-IκB、IKK、ASC、Caspase-1、IL-18、IL-1β、NLRP3和MertK蛋白以及炎症细胞因子IL-18、IL-1β和TNF-α表达情况。结果表明,STZ建模组鼠血清中TRACP-5b、Cathepsin K以及尿液中脱氧吡啶啉的含量显着增加,而胰岛素和骨钙素的含量显着降低,且组织中骨密度和骨矿盐的含量也显着降低;病理组织切片显示,STZ建模组骨组织中各个骨小梁之间更为离散,数目减少并排列不整齐,且破骨细胞的含量显着增多;STZ建模组组织中破骨细胞能够与炎症通路相关蛋白以及MertK蛋白进行共定位;各炎症通路相关蛋白表达量以及炎性细胞因子的分泌量显着增加,但MertK表达显着降低,而LXA4和胰岛素处理均逆转了上述现象。综上所述,破骨细胞NLRP3炎症通路激活以及胞葬作用被抑制介导了大鼠糖尿病性骨质疏松发生。最后,我们针对人和犬糖尿病性骨质疏松临床病例样本,更进一步验证了在体内破骨细胞炎症反应以及胞葬作用被抑制是糖尿病性骨质疏松发生的机制。我们用与上述STZ诱导糖尿病性骨质疏松大鼠模型相同的实验方法,分别对人和犬的糖尿病性骨质疏松临床样本进行相关指标的检测和分析。结果发现,糖尿病性骨质疏松症病人和病犬体内骨组织中破骨细胞数量显着增多,且均能检测到炎症的激活以及胞葬作用的抑制。此结果与前面的体外实验结果及与STZ诱导糖尿病性骨质疏松大鼠模型的相应结果均一致。总之,本研究结果表明,高糖激活ROS/MAPKs/NF-κB/NLRP3炎症通路以及抑制胞葬作用介导破骨细胞骨吸收能力的增强是糖尿病性骨质疏松症的主要发病原因,并且发现胞葬作用增强剂LXA 4能够作为治疗糖尿病性骨质疏松的潜在药物。这些结果为更深入地探究糖尿病性骨质疏松症的发病机理以及为以后有针对性地治疗糖尿病性骨质疏松症奠定了重要的理论基础。
王庆锋[3]（2020）在《TGR5对成骨细胞分化的影响及相关机制研究》文中提出背景骨是由成骨细胞和破骨细胞调节的一种精细的动态器官,在调节骨周转率中起着关键作用。成骨细胞对骨形成很重要,破骨细胞负责骨吸收。成骨细胞来源于间充质干细胞和成骨前细胞,通过成骨分化形成。成骨分化功能障碍导致正常骨重塑或骨翻转功能受损,并伴有多种骨代谢紊乱,包括骨质疏松症。骨质疏松症的主要病理特征为骨密度降低、骨稳态崩溃、骨脆性增加。成骨细胞的成熟是一个复杂的生理过程,由细胞增殖、分化、矿化等多个步骤调控。前体细胞成功的分化和矿化成功能性成骨细胞被认为是骨形成的关键步骤。多种细胞内信号通路被报道参与成骨细胞分化和矿化过程。例如,AMPK活化的蛋白激酶（AMP-activated protein kinase,AMPK）可刺激内皮一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase,eNOS）磷酸化,增加成骨前细胞MC3T3-E1一氧化氮（nitric oxide,NO）的产生,促进成骨细胞分化和矿化,提高成骨细胞活性,促进骨形成。AMPK/eNOS通路的激活导致RUNT相关转录因子2（runt-related transcription factor 2,Runx-2）的表达,该转录因子通过调节碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）、骨钙素（osteocalcin,OCN）、骨黏连蛋白（osteonectin）、骨桥蛋白（osteopontin）和Ⅰ型胶原的表达参与成骨细胞成熟。促进成骨分化被认为是治疗骨质疏松症等骨疾病的重要治疗策略。G蛋白偶联受体TGR5是G蛋白偶联受体（G-protein-coupled receptor,GPCR）家族的重要成员。它最初被鉴定为胆汁酸的膜受体。据报道,TGR5在调节胆汁酸和能量稳态以及葡萄糖代谢方面发挥着关键作用。TGR5存在于多种组织和细胞中,通过异三聚体G蛋白转导细胞外信号,具有多种药理特性。例如,最近报道TGR5激活在抑制脂多糖（LPS）诱导的全身急性胃炎症中起关键作用,该过程主要是通过抑制IκBα/NF-κB信号通路的激活完成的。也有报道称TGR5在治疗肾脏炎症相关疾病中具有抑制NF-κB和STAT3信号的作用。TGR5在氧化偶氮甲烷（azoxymethane,AOM）小鼠模型中也通过减轻神经炎症和改善预后显示其具有神经保护作用。然而,关于TGR5在成骨分化中的作用的信息以前很少有报道。目的本课题拟通过体内和体外实验探究TGR5对成骨细胞分化和骨骼发育形成的影响,以及参与调控成骨细胞正常分化的具体作用机制,不仅研究TGR5在骨形成过程中的生理功能,为骨代谢的分子机制提供了新的见解,也为临床治疗骨相关疾病提供了新的理论基础和靶点。方法正常成骨细胞分化障碍与骨质疏松等骨丢失相关疾病有关。G蛋白偶联受体TGR5被认为是胆汁酸和能量稳态的重要调节因子。关于TGR5对成骨细胞骨形成和基质矿化的影响,以往报道较少。在本研究中,我们首先利用RNA-seq检测了 β-GP/AA诱导前成骨细胞系MC3T3-E1前后基因表达差异,确定了目的基因TGR5可能参与调控β-GP/AA诱导的成骨细胞的分化与成熟,能够促进成骨细胞前体细胞向成骨细胞的分化。然后,我们利用TGR5激动剂GPBARA和siRNA技术证明了 TGR5的活性能够调控MC3T3-E1成骨细胞分化相关基因（ALP、OCN、Osx）、成骨细胞分化转录因子Runx2的表达,影响细胞ALP活性及基质钙化。之后,我们通过进一步的机制研究发现TGR5通过激活AMPK信号通路促进MC3T3-E1向成骨细胞的分化。最后,我们通过TGR5缺失的转基因小鼠模型体内证明TGR5通过影响AMPK信号通路对小鼠骨骼的发育和成骨细胞的分化产生影响。结果（1）β-GP/AA诱导前成骨细胞系MC3T3-E1前后基因表达差异β-甘油磷酸/抗坏血酸（β-glycerophosphate/ascorbicacid,β-GP/AA）能够诱导成骨细胞的分化和形成。我们利用前成骨细胞系MC3T3-E1作为成骨细胞前体细胞（osteoblastprecursors,OBPs）,该细胞能够诱导分化成成骨细胞。我们用4 mMβ-GP和25 μg/mlAA分别处理MC3T3-E1 24h、48h和72h后,收取不同组的RNA,送公司行二代测序。RNA-seq和生物反应路径分析（Ingenuity Pathway Analysis,IPA）发现β-GP/AA诱导24h有1488个基因表达上调,诱导48h有1417个基因表达上调,诱导72h有337个基因表达上调,其中TGR5是三组中表达上调最明显的。因此,我们推测TGR5可能参与调控β-GP/AA诱导的成骨细胞的分化与成熟,能够促进成骨细胞前体细胞向成骨细胞的分化。（2）β-GP/AA 诱导促进 MC3T3-E1 TGR5 的表达TGR5在不同类型的细胞和组织中表达。然而,目前尚不清楚TGR5是否在MC3T3-E1细胞中表达。因此,我们通过RT-PCR和western blot检测了 TGR5是否在MC3T3-E1细胞中表达。小鼠MIN6细胞作为TGR5表达的阳性对照[16]。与预期一样,通过RT-PCR和western blot分析,我们在MC3T3-E1细胞的RNA水平和蛋白水平分别检测到了 TGR5的表达。接下来,我们发现在成骨培养基（含4mMβ-GP和25 μg/mlAA的α-MEM）培养的MC3T3-E1细胞中,TGR5的表达从第3天到第14天逐步增加,且呈时间依赖性。这些结果提示TGR5可能是MC3T3-E1细胞成骨分化过程中的一个重要因素,说明TGR5参与MC3T3-E1细胞向成骨细胞的分化。（3）TGR5激动剂能够促进MC3T3-E1细胞向成骨细胞的分化GPBARA作为TGR5的特异性激动剂被广泛应用于TGR5的激活研究[17]。前面已经证明TGR5可能参与MC3T3-E1细胞成骨细胞的分化,下面我们利用TGR5特异性激动剂做进一步的验证。我们利用含TGR5激动剂GPBARA（3μM）的成骨培养基培养MC3T3-E1细胞,然后测定成骨细胞ALP活性、茜素红S染色及成骨细胞分化标志物基因表达情况,用于检测成骨细胞分化情况。结果发现:与对照组相比,GPBARA（3μM）能够显着提高MC3T3-E1的ALP活性,且差异具有统计学意义（p<0.05）。相应地,茜素红S染色结果表明,与对照组相比,添加GPBARA（3μM）能够显着促进MC3T3-E1细胞在第14天的矿化作用,且差异具有统计学意义（p<0.05）。同时,RT-PCR结果表明,TGR5激动剂GPBARA（3μM）的使用能够显着增强成骨细胞相关标记基因的表达,包括ALP、OCN、Osx和Col-I,且差异具有统计学意义（p<0.05）。（4）TGR5能够促进MC3T3-E1成骨细胞特异性转录因子Runx2的表达与成骨细胞分化相关的标记基因的表达主要受转录因子Runx-2调控。结果发现,与对照组相比,GPBARA（3μM）处理能够显着促进MC3T3-E1Runx2的表达,且差异具有统计学意义（p<0.05）。（5）TGR5敲低能够抑制MC3T3-E1向成骨细胞的分化为了进一步验证TGR5在成骨分化中的生物学功能,通过TGR5 siRNA转染敲除TGR5的表达。western blot证明TGR5敲除成功。重要的是,TGR5的沉默部分阻止了 ALP活性增加、基质矿化以及成骨细胞分化标记基因的表达,且差异均具有统计学意义（p<0.05）。这些结果均提示TGR5可能在成骨分化中起重要作用。（6）TGR5通过激活AMPK信号通路促进成骨细胞的分化eNOS 的磷酸化和 AMP 活化蛋白激酶（AMP-activated protein kinase,AMPK）产生NO在成骨细胞分化过程中起关键作用。因此,我们检测了 GPBARA（3μM）是否能够影响MC3T3-E1eNOS/NO信号通路。结果发现:GPBARA（3μM）能够显着促进MC3T3-E1eNOS的磷酸化,且具有时间依赖性。DAF-FMDA染色用于检测MC3T3-E1NO的产生。结果表明,GPBARA处理将MC3T3-E1NO的产生时间从1h增加到6h。此外,我们还发现GPBARA（3μM）能够促进MC3T3-E1AMPK和ACC的磷酸化,且具有时间依赖。因此,我们推测TGR5通过激活AMPK信号通路促进MC3T3-E1向成骨细胞的分化。（7）AMPK抑制剂能够抑制MC3T3-E1向成骨细胞的分化为了进一步证实AMPK在调节GPBARA诱导的成骨分化作用中的作用,我们使用了特定的AMPK抑制剂化合物C来处理MC3T3-E1。利用条件性成骨培养基培养MC3T3-E1细胞,培养时间为14天。结果发现,复合物C的存在抑制了 GPBARA诱导的ALP活性升高、基质矿化和成骨细胞分化标记基因表达。同时我们还发现,使用复合物C阻断AMPK的活化,可以抑制GPBARA诱导的Runx-2表达。这些结果表明,TGR5在成骨分化中的作用是由AMPK介导的。（8）在骨骼形成过程中TGR5是成骨细胞分化必不可少的为了体内证明TGR5对小鼠骨骼发育和成骨细胞分化的影响,我们构建了 TGR5缺失的转基因小鼠,通过原位杂交分析TGR5的表达对骨骼形成的影响。结果发现:在E14.5,与TGR5野生型小鼠相比,TGR5缺失的小鼠ECM矿化的面积明显较少,且差异均具有统计学意义（p<0.05）。Von Kossa染色用于检测骨骼中的钙含量以及ECM的矿化程度。与TGR5野生型小鼠相比,TGR5缺失的小鼠骨骼中的钙含量更低,ECM的矿化程度更低,且差异均具有统计学意义（p<0.05）。阿尔新蓝染色发现TGR5缺失的小鼠骨骼ECM中大部分为软骨一类细胞,且差异均具有统计学意义（p<0.05）。此外,我们还发现与TGR5野生型小鼠相比,TGR5缺失的小鼠骨骼中成骨细胞分化的相关基因OCN、Col-Ⅰ的表达也显着降低,成骨细胞分化的转录因子Runx2的表达也显着降低,且差异均具有统计学意义（p<0.05）。因此,在骨骼形成和发育过程中,TGR5能够影响骨骼中钙的沉积,调控成骨细胞分化相关基因的表达。（9）TGR5通过调控AMPK信号通路影响骨骼发育前面己经证明了 TGR5主要通过激活AMPK信号通路促进成骨细胞的分化,我们通过尾静脉注射的方式给TGR5缺失的小鼠给予AMPK激动剂GSK621（2mg/kg）注射,结果发现AMPK激动剂能够促进TGR5缺失小鼠骨骼的发育,也会促进成骨细胞分化相关基因OCN、Col-Ⅰ以及转录因子Runx2的表达。因此,在骨骼形成和发育过程中,TGR5能够通过AMPK信号通路影响骨骼的发育,调控成骨细胞分化相关基因的表达。结论总之,TGR5能够通过调控AMPK信号通路影响成骨细胞相关基因的表达,进而影响成骨细胞的分化和骨骼的发育。本研究不仅阐明了 TGR5在骨形成过程中的生理功能,为骨代谢的分子机制提供了新的见解,也为临床治疗骨相关疾病提供了新的理论基础和靶点。
郭振国[4]（2020）在《益生乳酸菌对绝经后女性骨质疏松影响的临床研究》文中提出目的在这项随机、双盲、安慰剂对照、单中心临床试验中,研究对比益生乳酸菌治疗女性骨质疏松患者前后、治疗后组间同时期骨代谢标志物指标（碱性磷酸酶（BALP）、钙（Ca）、磷（P）、骨钙素（OC）、维生素D（VD）、I型胶原氨基端前肽（PICP）、B-胶原降解产物（B-CTX）、甲状旁腺素（PTH））、骨密度（BMD）、炎性指标（降钙素原（PCT）、白介素-6（IL-6））、口服钙剂出现的便秘副作用,并评估是否有明显差异,为预防、治疗骨质疏松疾病提供临床新依据。方法从2018年09月至2019年06月收集内蒙古医科大学附属医院门诊部和住院部骨质疏松病例共150例,然后根据课题纳入和排除标准筛选出符合标准60例女性患者（平均年龄62.4±6.69岁,平均身高161.59±6.88cm,平均体重62.59±9.77Kg）,分为2组,每组30例。在干预前（基线）采集患者静脉血,离心后留取血清送检于本院检验科,由负责该课题项目检验科医生测量各位患者血清中骨代谢标志物、炎性指标化验值,然后每天按照药物及课题说明,实验组口服抗骨质疏松常规药物+益生乳酸菌治疗,而对照组口服抗骨质疏松常规药物+安慰剂治疗,在口服治疗满24周（6月）时,由负责该课题项目的科室护士采集血液并分离血清,然后检验科医生测量实验组、对照组患者血清骨代谢标志物和炎性化验值,并且由负责该课题项目的本院核医学科医生为课题组患者做骨密度检查。还需要在基线、24周（6月）时间点为各位病例填写课题相关调查问卷,记录患者生活日常状况和相关的临床症状变化情况。最后对比干预前后、治疗后组间同时期的观察指标,骨代谢标志物指标（碱性磷酸酶（BALP）、钙（Ca）、磷（P）、骨钙素（OC）、维生素D（VD）、I型胶原氨基端前肽（PICP）、B-胶原降解产物（B-CTX）、甲状旁腺素（PTH））、炎性指标（降钙素原（PCT）、白介素-6（IL-6））、骨密度（BMD）、口服钙剂出现的便秘副作用,评估有无统计学及临床意义。结果筛选分组的两组患者年龄、骨密度、骨代谢标记物、炎性指标基线水平相近。实验组治疗后病例骨密度较基线无显着变化（P=0.892）;治疗后病例骨代谢标志物BALP较基线有显着变化（P=0.033）,B-CTX较基线有显着变化（P=0.029）;治疗后病例炎性指标IL-6较基线有显着变化（P=0.033）。结论益生乳酸菌干预口服骨化三醇加复合维生素D钙片治疗绝经后女性骨质疏松患者方面有积极促进作用,可以减缓绝经后妇女的骨转换速度,可以改善肠道菌群失衡,恢复肠道正常生理功能,进而促进营养摄入及药物吸收,可以减轻钙剂导致便秘的副作用,可以减轻肠道炎症,从而起到抗骨质疏松作用。
王译凡[5]（2019）在《慢性牙周炎和IgA肾病大鼠模型的建立及其相关性初步分析》文中认为牙周炎是危害口腔健康的常见病和引起成人失牙的主要原因,在我国有较高的患病率。同时牙周炎也是最常见的慢性感染性病灶,与黏膜免疫相关,可引起全身炎性反应。近年来,关于牙周炎和其他系统疾病互相影响的研究越来越多。比如牙周炎与冠心病、糖尿病、肺部疾病、早产、肥胖等疾病具有相关性。慢性肾脏病是一类疾病的统称,指不同病因造成的肾损伤超过三个月,或者肾小球滤过率小于60ml/min/m2超过三个月。慢性牙周炎和慢性肾脏病有许多共同的危险因素,比如糖尿病、高血压、高脂血症、感染及炎症、年龄、吸烟等,这吸引了越来越多的学者研究这两种疾病之间的相关性。IgA肾病是目前全世界最常见的原发性肾小球疾病。近期越来越多的研究表明牙周炎同慢性肾脏病之间的密切联系,国内外研究多为流行病学研究和临床描述,论证力度较弱,不能完全证明慢性牙周炎和慢性肾脏病之间的因果联系,慢性牙周炎导致IgA肾病发生发展的确切机制还有待研究证实。目的:通过建立大鼠慢性牙周炎和IgA肾病复合模型,利用牙周指标如龈出血指数、探诊深度、附着丧失和牙周组织HE染色切片,与肾脏病理染色指标、尿蛋白指标、血清CRP和IL-6水平等初步探讨慢性牙周炎和IgA肾病之间的关系。方法:选择SD大鼠80只,通过正畸用钢丝结扎和牙周致病菌感染方法建立牙周炎模型,BSA灌胃、皮下注射CC14、尾部静脉注射LPS结合的方法建立IgA肾病模型,12周末检测大鼠牙周指标、肾脏临床和病理指标,以及血清CRP和IL-6的水平,进行统计学分析。结果:在成功建模的基础上,CP+IgAN组的各项牙周临床指标,如龈出血指数、探诊深度与附着丧失,和CP组比较,上升幅度都具有显着差异,P<0.001;CP+IgAN组的肾组织病理和免疫荧光评分也较IgAN组严重,P<0.001。同时,CP组的肾脏病理出现部分肾组织炎性改变,免疫荧光染色评分比正常对照组高,P<0.05;IgAN组大鼠的龈出血指数评分、探诊深度及附着丧失较正常对照组有一定的上升,部分大鼠出现牙龈炎甚至轻微的牙周炎。通过测定血清CRP和IL-6的水平,CP组大鼠、IgAN组大鼠、CP+IgAN组大鼠的血清CRP水平和正常对照组相比,均有显着上升,P<0.05,CP+IgAN组血清CRP平均水平比IgAN组增高,P<0.05;CP组和CP+IgAN组IL-6水平较正常对照组和IgAN组升高,P<0.05,CP+IgAN组IL-6水平比CP组显着增高,P<0.05。结论:通过建立可靠的动物模型,说明IgA肾病对牙周炎的发展可能有促进作用,牙周炎也可能影响肾病的发生发展,慢性牙周炎和IgA肾病之间存在一定的联系,牙周炎-IL-6-CRP-肾病可能作为一条牙周病和肾病互相影响其发生发展的有效途径之一。
郭莉莉,张莹,潘多[6]（2019）在《胰岛素控制对糖尿病大鼠正畸牙齿移动的影响》文中进行了进一步梳理目的观察对糖尿病大鼠实施胰岛素控制对其正畸牙齿移动产生的影响。方法纳入90只SD大鼠,随机分为3组,每组30只,分别设置为空白对照组、糖尿病模型组、胰岛素控制组。牵磨牙近中移动后第7、14、21天,分别采集标本,检测3组不同时间的血清骨钙素水平,以及颌骨骨钙素水平。结果经检测与对比,3组第7、14、21天的血清骨钙素水平组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。经检测与对比,糖尿病模型组第14、21天的远中颌骨骨钙素水平明显高于胰岛素控制组和空白对照组,胰岛素控制组第14天的远中颌骨骨钙素水平明显高于空白对照组（P<0.05）。糖尿病模型组第7、14天的近中颌骨骨钙素水平明显高于胰岛素控制组与空白对照组,胰岛素控制组第14天的近中颌骨骨钙素水平明显高于空白对照组（P<0.05）。其余不同时间进行比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论对糖尿病大鼠实施正畸牙齿移动过程中应用胰岛素控制可获得理想效果。
张岳乔[7]（2019）在《甲状旁腺激素对骨质疏松大鼠拔牙窝愈合的影响》文中认为目的通过制作骨质疏松SD大鼠牙拔除术模型,愈合过程中给予甲状旁腺激素（PTH）进行干预,观察大鼠拔牙窝新生骨组织的骨密度（BMD）、组织形态学变化,检测拔牙窝骨钙素（OC）、胰岛素样生长因子-1（IGF-1）的表达情况。探讨甲状旁腺激素对骨质疏松大鼠拔牙窝愈合的影响,为骨质疏松患者拔牙术后进行药物干预提供实验依据。方法1骨质疏松模型的制备:选取12周龄健康雌性SD大鼠80只,各40只随机分为实验组与空白对照组。实验组大鼠维甲酸100mg/kg灌胃,每天1次。空白对照组大鼠等量生理盐水灌胃,每天1次。两周后测量大鼠胫骨近端的骨密度（BMD）。P<0.05,差异有统计学意义,说明实验组大鼠骨密度明显降低,骨质疏松模型制作成功。2大鼠拔牙创模型制备:40只骨质疏松大鼠腹腔麻醉,拔除左侧上颌第一磨牙。将拔牙后的大鼠随机平均分为两组,实验组大鼠20只,甲状旁腺激素（PTH）皮下注射20μg/kg,每天1次。对照组大鼠20只,注射等量的生理盐水,每天1次。于注射PTH后的第2周、4周、8周对大鼠进行分批处死,每次6只。将大鼠拔牙窝周围牙槽骨取1cm左右小段,剔除软组织,进行骨密度检测。随后将标本固定、脱钙、包埋后切片,进行HE染色和免疫组化染色,检测OC和IGF-1的表达情况。运用MV-Image软件进行采图,Image Pro Plus 6.0软件对免疫组化图片进行平均光密度值（MOD）测算。实验数据应用SPSS23.0进行统计学处理,所得结果以平均值±标准差（）的形式表示。选用单因素方差分析和两独立样本t检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果1维甲酸灌胃2周后,大鼠胫骨近端骨密度降低,做两独立样本t检验,得出P<0.05,差异有统计学意义,骨质疏松模型制备成功。2肉眼观察大鼠拔牙窝愈合情况,相同时间点实验组大鼠比对照组略好。3拔牙术后2周,实验组骨密度高于对照组,P<0.05,差异有统计学意义。观察HE染色切片,实验组拔牙窝内有大量的纤维样骨组织出现,可见少量的成骨细胞。对照组尚存在一些炎细胞,纤维样的骨组织很少,几乎见不到成骨细胞。实验组OC和IGF-1免疫组化平均光密度值（MOD）均高于对照组,P<0.02,差异有统计学意义。4拔牙术后4周,实验组BMD高于对照组,P<0.05,差异有统计学意义。观察HE染色切片,实验组骨小梁较对照组粗,实验组骨小梁间隙较对照组窄,实验组成骨细胞数量较对照组略少,而骨细胞数量比对照组多。实验组OC和IGF-1免疫组化平均光密度值（MOD）均高于对照组,P<0.01,差异有统计学意义。5拔牙术后8周,实验组BMD高于对照组,P<0.05,差异有统计学意义。观察HE染色切片,实验组和对照组大鼠骨小梁排列有序,实验组骨小梁排列致密,对照组排列疏松。实验组骨小梁的宽度比对照组粗大,骨小梁间隙比对照组窄。实验组OC和IGF-1免疫组化平均光密度值（MOD）均高于对照组,P<0.01,差异有统计学意义。结论1维甲酸灌胃法可以成功制备SD大鼠骨质疏松模型。2甲状旁腺激素可提高骨质疏松大鼠拔牙窝OC和IGF-1的表达。3甲状旁腺激素能促进骨质疏松大鼠拔牙窝的愈合。图30幅;表4个;参147篇。
刘连勇[8]（2018）在《2型糖尿病患者羧化与非羧化骨钙素研究及17β-雌二醇对OVX大鼠骨质疏松影响的分子机制研究》文中研究说明第一章:2型糖尿病患者血清羧化与非羧化骨钙素水平及骨钙素基因遗传变异的研究研究背景:近年有研究者提出骨骼是一个内分泌器官,参与调节全身能量代谢。在糖骨代谢相互影响中,骨钙素（osteocalcin,OC）作为“能量信使”发挥重要作用。动物实验发现OC可以促进胰岛细胞分泌,改善胰岛素抵抗。部分临床试验也得到相似的结论,但有临床研究提出OC水平与血糖水平及糖尿病的发生无显着相关性。2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus,T2DM）与骨质疏松症（osteoporosis,OP）均为多基因复杂疾病,糖骨代谢有相互影响,OC水平是否受OC基因多态性影响,目前相关研究也较少。为了进一步分析OC与糖代谢关系及OC水平与OC基因多态性的关系,进一步寻找防治T2DM的新靶点,我们开展相关研究。研究目的:分析中国汉族人群血清骨钙素（OC）、羧化不全骨钙素（under carboxylated osteocalcin,ucOC）和羧化骨钙素（carboxylated osteocalcin,cOC）水平与糖代谢的相互关系,探讨2型糖尿病（T2DM）患者OC基因多态性与OC水平的关系。研究方法:研究纳入中国汉族人群456名T2DM患者及224名正常对照人群,常规进行体格检查及生化、骨代谢、糖代谢等实验室检查,同时检测研究对象的血清羧化与非羧化骨钙素水平以及OC的9个单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism,SNP）位点（rs1543294、rs1800247、rs759330、rs2842880、rs933489、rs2241106、rs2758605、rs2277872 和 rs 12563631）。研究结果:（1）T2DM组血清OC、ucOC和cOC、ucOC/cOC均显着低于正常对照组。（2）正常对照组人群cOC水平与糖代谢指标无显着相关性。T2DM人群cOC水平与糖化血红蛋白（Hemoglobin A1c,HbA1c）呈负相关。（3）校正年龄、体重指数（Body mass index,BMI）、HbA1c等指标后,T2DM患者骨钙素SNPRs933489位点CC基因型的血清非cOC水平显着低于TT基因型,其它SNP位点各基因型间OC水平的差异无统计学意义。研究结论:本研究显示,T2DM患者血清OC、羧化和非羧化骨钙素水平均低于非T2DM患者,而且cOC水平与HbA1c呈负相关,OC基因常见遗传变异没有影响OC水平。第二章:17β-雌二醇通过抑制EphA2/ephrin A2信号通路减轻OVX大鼠骨质疏松的实验研究研究背景:雌性激素是一种甾类激素,对循环、再生和心血管系统有重要影响,通过抑制骨吸收和增加骨形成对骨稳态影响显着。雌激素有3种类型,17β-雌二醇（17β-estradiol,17β-E2）、雌酮及雌三醇,由卵巢分泌雌二醇具有最强的雌激素作用,雌激素缺乏可能导致绝经后妇女的早期和晚期骨质疏松症。现有研究证明雌激素和孕激素替代对预防绝经后女性骨量减少有效,但由于该方法具有较多副作用,因此疗效受到限制。我们若能够通过调控若干个骨重建信号通路,进一步掌握成骨细胞与破骨细胞的作用机制,则能帮助我们在临床上治疗骨质疏松症。近些年对Eph/Ephrin通路不断深入探索,发现其可调控破骨细胞及成骨细胞的分化,具有双向调节功能,而EphrinA2和EphA2信号能够在起始阶段调节骨骼重建,破骨细胞前体中的EphrinA2和EphA2能够增强多核破骨细胞的分化,而成骨细胞上的EphA2能通过上调RhoA形成抗成骨细胞形成信号,但17β-雌二醇是否抑制EphA2/ephrin A2信号通路尚未完全阐明,故针对该问题设计了本研究。本研究是针对17β-雌二醇对去卵巢大鼠骨质疏松的作用及其分子机制的研究。本研究共分为两个部分,第一部分:选取21周雌性大鼠,分为假手术组（Sham）、卵巢切除组（Ovariectomy,OVX）及卵巢切除+17β-雌二醇组（OVX+E2）,并测定体重、血清钙（calcium,Ca）、尿钙（urinary calcium,UCa）、肌酐（Creatinine,Cr）、碱性磷酸酶（bone specific alkaline phosphatase,b-ALP）、抗酒石酸酸性磷酸酶-5b（bone resorption item tartrate-resistant acid phosphatase-5b,TRAP-5b）浓度、1 型原胶原 N-端前肽（procollagen type I N-terminal propeptide,P1NP）、β-Ⅰ型胶原交联 C 末端肽（β-C-terminal cross-linked telopeptides of type Ⅰ collagen,p-CTX）浓度;测定胫骨的骨密度及组织病理形态。第二部分:采用实时定量逆转录-聚合酶链反应（real time-Polymerase chain reaction,RT-PCR）测定三组中骨代谢关键相关基因:碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）、抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP）,Runt 相关转录因子 2（runt-related gene 2,Runx2）,Osterix,Collal,护骨素（osteoprotegerin,OPG）和核因子kB受体活化因子配体（Receptor activator of NF-kB ligand,RANKL）的 mRNA 水平;采用 qRT-PCR 和免疫印迹测定Sham、OVX及OVX+E2三组中EphA2和ephrinA2的表达,并测定降低EphA2和ephrinA2表达对破骨细胞分化的影响。第一部分:17β-雌二醇对去卵巢大鼠骨质疏松的影响研究目的:1.探讨17β-雌二醇对去卵巢大鼠的体重影响及骨转换指标的影响;2.探讨17β-雌二醇对去卵巢大鼠骨密度和骨组织形态学的影响。研究方法:1.1.选取21周大小的雌性Sprague-Dawley大鼠,分为3组:Sham（n=10）、OVX组（n=10）及OVX+E2组（n=10）;对于OVX+E2组,每天对大鼠通过灌胃给予17β-雌二醇悬浮液,使用量按照1mL/100g。2.处理0、2、4、6周后,分别测量三组大鼠的体重,并进行比较。3.处理0、2、4、6周后,使用生化分析仪测定三组大鼠的血清钙、尿钙、肌酐浓度,ELISA测定血清中b-ALP和TRAP-5b水平,采用化学发光法测定P1NP、-βCTX。4.采用双能X线吸收仪测定左侧胫骨的骨密度。5.采用苏木精（Hematoxylin&Eosin,HE）染色测定胫骨的组织病理形态,使用光学显微镜和影像分析仪测定静态参数包括骨体积/组织体积（bone volume per tissue volume,BV/TV）、骨小梁厚度、骨小梁数量、骨小梁分离度。研究结果:1.OVX组大鼠体重增加显着高于Sham组,17β-雌二醇治疗后,大鼠体重增加受到抑制,说明17β-雌二醇能够抑制OVX诱导的体重增加。2.OVX+E2组大鼠血清钙浓度显着高于OVX组,OVX组尿Ca/Cr显着增加,17β-雌二醇治疗后,比值下降;OVX组b-ALP、TRAP-5b、P1NP、β-CTX浓度较对照组显着升高,17β-雌二醇治疗后,显着下降。3.给药后的4、8周,三组间的胫骨骨密度有显着差异,和Sham组相比,OVX显着降低胫骨骨密度,和OVX相比,OVX+E2组胫骨骨密度显着增加。4.OVX组大鼠的BV/TV、骨小梁厚度、骨小梁数量显着低于Sham组,17β-雌二醇的治疗抑制这些变化,OVX组骨分离度增加,而17β-雌二醇有效的抑制OVX引起的骨质量变化。研究结论:本研究表明,卵巢切除能导致大鼠体重增加,血清钙浓度、尿Ca/Cr值、b-ALP、TRAP-5b、P1NP、β-CTX浓度升高,17β-雌二醇能消除这些影响;OVX组的BV/TV、骨小梁厚度、骨小梁数量显着降低,以及骨小梁分离度的显着升高主要是由于小梁的穿孔变薄和损失,而17β-雌二醇能够减弱这些影响。第二部分:17β-雌二醇对骨代谢影响的机制研究研究目的:1.探讨17β-雌二醇对骨代谢相关基因表达水平的影响;2.探讨17β-雌二醇是否通过EphA2/ephrinA2通路抑制破骨细胞的形成。研究方法:1.采用实时定量聚合酶链反应（RT-PCR）测定Sham组、OVX组、OVX+E2组骨代谢关键相关基因ALP,TRAP,Runx2,Osterix,Colla1,OPG和NF-kB配体受体激活剂RANKL的mRNA水平。2.采用qRT-PCR和免疫印迹分别测定Sham、OVX及OVX+E2三组中EphA2和ephrinA2的表达;3.采用siRNA转染技术沉默EphA2和ephrinA2,加入RANKL和巨噬细胞集落刺激因子（macrophage colony-stimulating factor,M-CSF）培养后,测定破骨细胞数目。研究结果:1.OVX 组中 ALP、TRAP、RANKL 表达显着高于 Sham 组,OVX+E2 组 ALP、TRAP、RANKL表达显着低于OVX组。2.OVX 组中 Runx2、Osterix、Col1a1,表达显着低于 Sham 组,OVX+E2 组 ALP、TRAP、RANKL表达显着高于OVX组。3.三组中OPG表达无显着差异。4.OVX组EphA2和ephrinA2的表达显着高于Sham组,OVX+E2组中EphA2和ephrinA2的表达显着高于OVX组;5.RANKL和M-CSF能够促进破骨细胞分化,EphA2和ephrinA2沉默显着降低破骨细胞分化。研究结论:本研究表明,17β-雌二醇能通过抑制TRAP和RANKL表达抑制破骨细胞的骨吸收功能,并通过刺激Runx2、Osterix和Col1a1表达诱导成骨细胞的骨形成功能;17β-雌二醇能够抑制OVX诱导EphA2和ephrinA2的表达水平升高,进而抑制破骨细胞的分化。
毕云天[9]（2018）在《维生素K3和枯草芽孢杆菌对肉仔鸡骨骼健康的影响及其互作效应》文中研究说明本试验旨在研究饲粮中添加枯草芽孢杆菌和VK3对VK缺乏的肉仔鸡生产性能、血液指标、屠宰性能以及骨骼健康的影响。试验选用720只爱拔益加肉仔鸡,公母各半,按照3×2×2因子设计,分成12个处理组,每组3个重复,每个重复20只鸡（公母各半）。饲粮中VK3的添加水平分别是0、0.5和4 mg/kg;枯草芽孢杆菌PB6菌株（BS）的添加量分别是0和500 g/t;公母鸡分栏网上饲养,鸡只自由采食和饮水。所有肉鸡用不添加VK3的日粮预饲3天,然后开始正式试验,试验期为42 d。结果表明:1.肉仔鸡生长性能（1）性别显着地影响了0-21 d肉仔鸡的生长性能。公鸡的42 d体重、21-42d平均日增重（ADG）和平均日采食量（ADFI）均显着地高于母鸡（P<0.05）。（2）添加VK3影响了21 d肉仔鸡的空腹体重和0-21 d ADG（P<0.05）。VK3添加水平与性别对0-21 d ADFI存在互作效应（P<0.05）,公鸡日粮中添加0.5 mg/kg VK3平均日采食量最高,而母鸡日粮中添加4 mg/kg VK3平均日采食量最高。（3）日粮中添加500 g/t BS显着地增加了42 d体重和21-42 d日增重（P<0.05）。2.肉仔鸡血清生化指标（1）BS提高了21 d骨钙素（OCN）、骨源性碱性磷酸酶（BALP）水平（P<0.05）,以及提高了42 d OCN水平（P<0.01）。BS与性别对肉仔鸡BALP水平提高有显着地互作效应（P<0.01）。（2）在21 d,日粮中添加4.0 mg/kg VK3提高了血清中谷草转氨酶（AST）的活性（P<0.05）;公鸡血清中的总胆红素（TB）显着高于母鸡,但是TP、ALB、AST、ALT和Ca含量显着地低于母鸡（P<0.05）;VK3、BS和性别对总胆固醇（TC）提高存在互作效应（P<0.05）,VK3和性别对葡萄糖含量提高存在互作效应（P<0.05）,在公鸡日粮中添加4.0 mg/kg VK3降低了血清中葡萄糖（GLU）含量（P<0.05）;BS和性别对血清中的磷存在互作效应（P<0.05）,不添加枯草芽孢杆菌的情况下,母鸡血清中磷含量高于公鸡（P<0.05）;VK3和BS对CREA的含量存在互作效应（P<0.05）,不添加枯草芽孢杆菌的情况下,添加4.0 mg/kg VK3增加了血清中CREA含量,在添加枯草芽孢杆菌的情况下,添加4.0 mg/kg VK3降低了血清中肌酐的含量。（3）在42 d,枯草芽孢杆菌和性别对血清中总蛋白和白蛋白含量存在互作效应（P<0.05）,在不添加枯草芽孢杆菌的情况下,公鸡血清中的总蛋白含量高于母鸡,在添加BS的情况下,公鸡血清的总蛋白含量低于母鸡;在添加BS的情况下,母鸡血清中的白蛋白含量也高于公鸡;VK3、枯草芽孢杆菌和性别对血清中谷草转氨酶和碱性磷酸酶的活性存在互作效应（P<0.05）,在不添加枯草芽孢杆菌的情况下,添加0.5 mg/kg VK3的母鸡血清中谷草转氨酶的活性最高,添加4.0 mg/kg VK3的母鸡血清中碱性磷酸酶的活性最高。VK3和枯草芽孢杆菌对血清中谷丙转氨酶的活性存在互作效应（P<0.05）,在不添加益生菌的情况下,添加0.5 mg/kg VK3显着增加了血清中谷丙转氨酶的活性。母鸡血清中的TG高于公鸡（P<0.05）;添加BS降低了血清中CREA的含量（P<0.05）。BS和性别对血清中钙含量存在互作效应（P<0.05）,在添加BS的情况下,母鸡的血清钙含量高于公鸡（P<0.05）。3.肉仔鸡胫骨重及钙磷含量（1）BS降低了21 d腿肌率,但是增加了股骨重、股骨长度、胫骨重、胫骨长度和胫骨直径（P<0.05）;公鸡的股骨重、股骨直径、胫骨重、胫骨长度和胫骨直径显着地高于母鸡（P<0.05）;BS提高了42 d胫骨直径（P<0.05）;公鸡的42 d胸肌率低于母鸡,但是股骨和胫骨重量、长度和直径高于母鸡（P<0.05）;42 d添加枯草芽孢杆菌能够显着增加胫骨中粗灰分以及钙元素的含量（P<0.05）。（2）性别分别与VK3和枯草芽孢杆菌对42 d腿肌率存在互作效应（P<0.05）,公鸡日粮中添加4.0 mg/kg VK3降低了腿肌率,母鸡日粮中添加0.5和4.0 mg/kg VK3提高了腿肌率;在肉仔鸡生长前期21 d,日粮中添加0.5mg/kg和4.0 mg/kg VK3均极显着地增加了胫骨中粗灰分的含量（P<0.05）;添加4.0 mg/kg VK3极显着增加了胫骨中钙、磷元素的含量（P<0.05）（3）日粮中添加0 mg/kg、0.5 mg/kg VK3时添加枯草芽孢杆菌能极显着提升骨骼钙磷含量比（P<0.05）。母鸡胫骨钙磷元素含量均显着低于公鸡（P<0.05）。枯草芽孢杆菌与VK3的添加对胫骨中粗灰分、钙元素以及钙磷比有显着的互作效应（P<0.05）。4.肉仔鸡骨骼相关mRNA水平的影响（1）在21 d,日粮中添加0.5mg/kg VK3上调了RUNX2 mRNA水平（P<0.001）;BS下调了RUNX2 mRNA水平,下调了CYP3A4 mRNA水平（P<0.05）;与母鸡相比,下调了公鸡的RUNX2 mRNA水平（P<0.05）。UNX2mRNA水平极显着降低,而VK3和枯草芽孢杆菌以及与性别的互作影响下显着下调了OCN mRNA水平（P<0.05）。（2）在42 d,日粮中添加0.5mg/kg VK3上调了RUNX2 mRNA水平（P<0.001）;BS上调了CYP3A4、RUNX2、ALPL的mRNA水平（P<0.05）,上调了OCN mRNA水平（P<0.001）;与母鸡相比,下调了公鸡的OCN mRNA水平（P<0.05）。综上所述,饲粮中在VK缺乏时添加枯草芽孢杆菌可以提高肉仔鸡的生产性能,提高了骨钙素、骨源性碱性磷酸酶含量、屠宰率、及骨骼钙磷的水平,从而改善了肉仔鸡的骨骼健康状况;添加VK3提高肉仔鸡的生产性能,VK3和枯草芽孢杆菌对生产性能存在互作效应;VK3可以显着的提高胫骨中钙、磷元素的含量骨骼健康的影响,VK3和枯草芽孢杆菌对骨骼钙磷含量存在互作效应。
毓天昊,贾兴亚,薛燕青,战德松,阎旭[10]（2017）在《骨质疏松老年无牙颌患者全口义齿重衬与骨转化标志物的相关性》文中进行了进一步梳理背景:患有骨质疏松的老年无牙颌患者剩余牙槽嵴往往形态不佳,修复难度较大,目前尚无相应参考指标来反映此类患者剩余牙槽嵴吸收的情况和指示重衬等临床处理的频率。目的:分析患有骨质疏松的老年无牙颌患者全口义齿重衬频率与血清中骨钙素和Ⅰ型胶原羧基端交联肽两种骨转化标志物水平之间的相关性,以期为临床全口义齿修复提供参考。方法:按照纳入标准随机选取50例已行全口义齿修复并患有骨质疏松的老年无牙颌患者,对其进行相关问卷调查并查阅病史确定义齿重衬频率,同时采集患者空腹静脉血,采用电化学发光免疫法测量血清中骨钙素与Ⅰ型胶原羧基端交联肽的水平,通过Pearson相关性检验的统计学方法来分析重衬频率与骨钙素和Ⅰ型胶原羧基端交联肽之间的关系。结果与结论:患者的义齿重衬频率与血清中骨钙素水平之间有显着的正相关关系（r=0.517,P<0.01）,而其与血清中Ⅰ型胶原羧基端交联肽水平并未观察到显着相关性（r=0.278,P=0.051>0.05）,但二者有着相近的变化趋势。说明对于患有骨质疏松的老年无牙颌患者来说,检测血清中骨转化标志物水平有助于全口义齿修复疗效预后的评估和诊疗决策的制定。
二、牙周病与血清骨钙素之间的关系（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、牙周病与血清骨钙素之间的关系（论文提纲范文）
（1）淫羊藿苷与补肾固齿丸对大鼠慢性牙周炎牙槽骨重建的比较研究（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物、试剂、器械与设备 |
| 1.2 建模方法 |
| 1.3 组织学观察建模情况 |
| 1.4 ICA与补肾固齿丸治疗大鼠实验性牙周炎 |
| 1.4.1 实验分组 |
| 1.4.2 血清骨转换标志物测定 |
| 1.5 Micro-CT三维影像学分析 |
| 1.5.1 设备及方法 |
| 1.5.2 检测指标 |
| 1.6 组织学观察 |
| 1.7 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 大鼠牙周炎模型的建立 |
| 2.2 给药后各组血清骨转换指标的测定 |
| 2.3 Micro-CT扫描结果 |
| 2.3.1 三维重建结果 |
| 2.3.2 ROI骨参数定量分析 |
| 2.3.3 各组牙槽骨吸收值比较分析 |
| 2.4 HE染色 |
| 2.5 硬组织切片甲苯胺蓝染色 |
| 3讨论 |
（2）破骨细胞炎症通路激活和胞葬作用抑制介导糖尿病性骨质疏松的发病机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 英文缩写词表 |
| 引言 |
| 第一篇 文献综述 |
| 第一章 糖尿病性骨质疏松的研究进展 |
| 1.1 糖尿病性骨质疏松的研究背景 |
| 1.2 糖尿病性骨质疏松的流行病学 |
| 1.3 糖尿病性骨质疏松发病机制的研究现状 |
| 1.4 糖尿病性骨质疏松的治疗 |
| 第二章 炎症的研究进展 |
| 2.1 炎症的概述 |
| 2.2 ROS |
| 2.3 炎症相关通路 |
| 第三章 胞葬作用的研究进展 |
| 3.1 胞葬作用的概述 |
| 3.2 胞葬作用的特征 |
| 3.3 胞葬作用的信号 |
| 3.4 胞葬作用与炎症之间的关系 |
| 3.5 胞葬作用参与疾病 |
| 第四章 破骨细胞与骨质疏松症的研究进展 |
| 4.1 破骨细胞概述 |
| 4.2 破骨细胞与骨质疏松症的关系 |
| 第二篇 研究内容 |
| 第一章 高糖诱导破骨细胞ROS产生并激活MAPKs/NF-κB/NLRP3炎症通路 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.3 实验结果 |
| 1.4 讨论 |
| 1.5 小结 |
| 第二章 高糖激活NLRP3炎性小体介导的炎症与其对破骨细胞胞葬抑制作用共同增强破骨细胞骨吸收 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.3 实验结果 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 破骨细胞NLRP3炎症通路激活和胞葬作用抑制介导大鼠糖尿病性骨质疏松发生 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.3 实验结果 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 糖尿病性骨质疏松症发生机制的人与犬临床确证 |
| 4.1 实验材料 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.3 实验结果 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 导师简介 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 |
| 致谢 |
（3）TGR5对成骨细胞分化的影响及相关机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 1. 材料与方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 细胞培养 |
| 1.3 主要试剂及仪器 |
| 1.4 主要实验试剂配制 |
| 1.5 实时定量聚合酶链反应(PCR) |
| 1.6 Western-blot |
| 1.7 碱性磷酸酶(ALP)活性的测定 |
| 1.8 矿化试验茜素红S染色 |
| 1.9 测量一氧化氮(NO)的产生 |
| 1.10 siRNA构建及细胞转染 |
| 1.11 统计学分析 |
| 2. 结果 |
| 2.1 β-GP/AA诱导前成骨细胞系MC3T3-E1前后基因表达差异 |
| 2.2 β-GP/AA诱导促进MC3T3-E1 TGR5的表达 |
| 2.3 TGR5激动剂能够促进MC3T3-E1细胞向成骨细胞的分化 |
| 2.4 TGR5能够促进MC3T3-E1成骨细胞特异性转录因子Runx2的表达 |
| 2.5 TGR5敲低能够抑制MC3T3-E1向成骨细胞的分化 |
| 2.6 TGR5通过激活AMPK信号通路促进成骨细胞的分化 |
| 2.7 AMPK抑制剂能够抑制MC3T3-E1向成骨细胞的分化 |
| 2.8 在骨骼形成过程中TGR5是成骨细胞分化必不可少的 |
| 2.9 TGR5通过调控AMPK信号通路影响骨骼发育 |
| 3. 讨论 |
| 1. 成骨细胞: 来源和发生 |
| 2. 成骨细胞的生长和分化取决于一系列生长因子和信号通路 |
| 3. 促使成骨细胞分化的各种机械信号 |
| 4. 机械刺激作为骨疾病治疗的方案 |
| 5. 成骨细胞和破骨细胞的相互作用 |
| 全文总结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述成骨细胞的调控网络及其与骨相关疾病的关系 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 |
| 致谢 |
（4）益生乳酸菌对绝经后女性骨质疏松影响的临床研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 1.前言 |
| 1.1 研究意义 |
| 1.1.1 骨质疏松症 |
| 1.1.2 流行病学 |
| 1.2 研究现状 |
| 1.2.1 肠道菌群 |
| 1.2.2 益生菌 |
| 1.2.3 益生菌与临床疾病 |
| 1.2.4 益生菌与骨质疏松症 |
| 1.3 研究目标 |
| 1.4 研究内容 |
| 1.4.1 益生乳酸菌对绝经后女性骨质疏松患者骨性能的影响 |
| 1.4.2 益生乳酸菌对绝经后女性骨质疏松患者炎性指标的影响 |
| 1.4.3 益生乳酸菌是否可以促进抗骨质疏松吸收、增强抗骨质疏松作用 |
| 1.4.4 益生乳酸菌是否可以改善绝经后妇女口服钙剂出现便秘副作用 |
| 2.材料和方法 |
| 2.1 研究设计 |
| 2.2 实验对象 |
| 2.3 随机和盲法 |
| 2.4 研究过程 |
| 2.5 统计学处理 |
| 3.结果 |
| 4.结论 |
| 5.讨论 |
| 参考文献 |
| 综述 益生菌对骨质疏松影响的临床研究进展 |
| 参考文献 |
| 缩略语表 |
| 攻读学位期间发表文章情况 |
| 个人简历 |
| 致谢 |
（5）慢性牙周炎和IgA肾病大鼠模型的建立及其相关性初步分析（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 全文小结 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表文章情况 |
| 攻读学位期间申请专利情况 |
| 致谢 |
（6）胰岛素控制对糖尿病大鼠正畸牙齿移动的影响（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 主要实验试剂与仪器 |
| 1.3 方法 |
| 1.3.1 实验分组 |
| 1.3.2 糖尿病模型制备 |
| 1.3.3 分组处理 |
| 1.3.4 标本采集 |
| 1.4 观察指标 |
| 1.5 统计方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 实验动物大体情况 |
| 2.2 不同时间3组血清骨钙素水平检测与比较 |
| 2.3 不同时间3组颌骨骨钙素水平检测与比较 |
| 3 讨论 |
（7）甲状旁腺激素对骨质疏松大鼠拔牙窝愈合的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 第1章 实验研究 |
| 1.1 材料与方法 |
| 1.1.1 材料与主要设备 |
| 1.1.2 实验方法 |
| 1.2 结果 |
| 1.2.1 骨密度 |
| 1.2.2 HE染色切片 |
| 1.2.3 OC免疫组化 |
| 1.2.4 IGF-1 免疫组化 |
| 1.3 讨论 |
| 1.3.1 骨质疏松模型建立 |
| 1.3.2 双能X线测量BMD结果分析 |
| 1.3.3 拔牙窝愈合过程和影响因素 |
| 1.3.4 HE组织学染色结果分析 |
| 1.3.5 OC免疫组化分析 |
| 1.3.6 IGF-1 免疫组化分析 |
| 1.4 小结 |
| 1.5 不足与展望 |
| 参考文献 |
| 第2章 综述 骨质疏松症的治疗和最新进展 |
| 2.1 骨质疏松概述 |
| 2.2 膜内成骨与软骨内成骨 |
| 2.3 骨质疏松用药治疗史回顾与最新进展 |
| 2.4 甲状旁腺激素相关肽类似物：特里帕肽与阿巴拉帕肽 |
| 2.5 蛋白质和多肽类 |
| 2.6 G蛋白偶联受体 |
| 2.6.1 G蛋白偶联受体是骨质疏松的代谢药物靶点 |
| 2.6.2 在骨骼发育和成骨代谢中,钙敏感受体(CaSR)和PTH1R之间的相互作用 |
| 2.7 活性氧(ROS) |
| 2.8 维生素K |
| 2.8.1 骨中维生素K的生理作用 |
| 2.8.2 维生素K和骨重建 |
| 2.8.3 维生素K和骨密度(BMD) |
| 2.8.4 维生素K和骨折 |
| 2.8.5 主要的局限性 |
| 2.9 硬化蛋白抑制剂 |
| 2.10 双磷酸盐类 |
| 2.11 其他Wnt靶向抑制剂 |
| 2.12 中药类：桔梗素D |
| 2.13 新药开发的现状与前景展望 |
| 2.14 小结 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 导师简介 |
| 作者简介 |
| 学位论文数据集 |
（8）2型糖尿病患者羧化与非羧化骨钙素研究及17β-雌二醇对OVX大鼠骨质疏松影响的分子机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一章: 2型糖尿病患者血清羧化与非羧化骨钙素水平及骨钙素基因遗传变异的研究 |
| 1. 研究背景 |
| 2. 材料与方法 |
| 3. 结果 |
| 4. 讨论 |
| 5. 结论 |
| 参考文献 |
| 第二章: 17β-雌二醇通过抑制EphA2/ephrin A2信号通路减轻OVX大鼠骨质疏松的实验研究 |
| 第一部分 17β-雌二醇对去卵巢骨质疏松的影响 |
| 1. 研究背景 |
| 2. 材料与方法 |
| 3. 结果 |
| 4. 讨论 |
| 5. 小结 |
| 第二部分 17β-雌二醇对骨代谢影响的机制研究 |
| 1. 研究背景 |
| 2. 材料与方法 |
| 3. 结果 |
| 4. 讨论 |
| 5. 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 综述参考文献 |
| 缩略词表 |
| 攻读学位期间公开发表的论文和编着 |
| 致谢 |
（9）维生素K3和枯草芽孢杆菌对肉仔鸡骨骼健康的影响及其互作效应（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩写词表(Abbreviations) |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 研究目的与意义 |
| 1.2 VK对骨骼的作用国内外研究进展 |
| 1.2.1 VK的定义 |
| 1.2.2 国内外的研究中VK对骨骼的作用机制 |
| 1.2.3 VK在畜禽上的应用 |
| 1.2.4 影响VK使用效果的因素 |
| 1.3 枯草芽孢杆菌的作用及对骨骼影响的国内外研究进展 |
| 1.3.1 枯草芽孢杆菌在畜禽上的应用 |
| 1.3.2 影响枯草芽孢杆菌使用效果的因素 |
| 1.4 小结与展望 |
| 1.5 研究目标和内容 |
| 第二章 试验研究 |
| 试验一 枯草芽孢杆菌和VK_3对肉仔鸡生长性能的影响 |
| 1.1 材料和方法 |
| 1.1.1 试验材料 |
| 1.1.2 试验动物和设计 |
| 1.1.3 试验饲粮 |
| 1.1.4 饲养管理 |
| 1.1.5 生产性能测定及方法 |
| 1.1.6 数据分析 |
| 1.2 结果 |
| 1.3 讨论 |
| 1.3.1 枯草芽孢杆菌对VK_3缺乏肉仔鸡生产性能的影响 |
| 1.3.2 VK对VK_3缺乏肉仔鸡生产性能的影响 |
| 1.4 小结 |
| 试验二 枯草芽孢杆菌和VK_3对肉仔鸡血清生化指标的影响 |
| 2.1 材料和方法 |
| 2.1.1 试验材料 |
| 2.1.2 试验动物和设计 |
| 2.1.3 试验饲粮 |
| 2.1.4 饲养管理 |
| 2.1.5 样品采集 |
| 2.1.6 测定指标及方法 |
| 2.1.7 数据分析 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 血清生化指标 |
| 2.2.2 血浆激素水平与酶活指标 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 枯草芽孢杆菌对VK_3缺乏肉仔鸡血清生化指标的影响 |
| 2.3.2 枯草芽孢杆菌对VK_3缺乏肉仔鸡血清血液激素水平的影响 |
| 2.4 小结 |
| 试验三 枯草芽孢杆菌和VK_3对肉仔鸡骨骼影响 |
| 3.1 材料和方法 |
| 3.1.1 试验材料 |
| 3.1.2 试验动物和设计 |
| 3.1.3 试验饲粮 |
| 3.1.4 饲养管理 |
| 3.1.5 样品采集 |
| 3.1.6 测定指标及方法 |
| 3.1.7 数据分析 |
| 3.2 结果 |
| 3.2.1 枯草芽孢杆菌对VK_3缺乏肉仔鸡屠宰性能和骨骼特性的影响 |
| 3.3 讨论 |
| 3.3.1 枯草芽孢杆菌对VK_3缺乏肉仔鸡屠宰性能和骨骼的影响 |
| 3.3.2 枯草芽孢杆菌对VK_3缺乏肉仔鸡钙磷指标的影响 |
| 3.4 小结 |
| 试验四 枯草芽孢杆菌和VK_3对肉仔鸡骨骼相关基因mRNA水平的影响 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 试验材料 |
| 4.1.2 试验动物和设计 |
| 4.1.3 试验饲粮 |
| 4.1.4 饲养管理 |
| 4.1.5 样品采集 |
| 4.1.6 测定指标及方法 |
| 4.1.7 数据分析 |
| 4.2 结果 |
| 4.3 小结 |
| 4.3.1 芽孢杆菌对VK_3缺乏的肉仔鸡骨骼的mRNA水平表达量影响 |
| 4.4 结论 |
| 第三章 结论与建议 |
| 1.主要结论 |
| 2.创新点 |
| 3.有待进一步研究问题 |
| 参考文献 |
| 附表 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间的成果 |
（10）骨质疏松老年无牙颌患者全口义齿重衬与骨转化标志物的相关性（论文提纲范文）
| 0引言Introduction |
| 1 对象和方法Subjects and methods |
| 1.1 设计 |
| 1.2 时间及地点 |
| 1.3 对象 |
| 1.4 方法 |
| 1.4.1 全口义齿重衬频率的统计 |
| 1.4.2 骨密度测定 |
| 1.4.3 骨转化标志物的检测 |
| 1.5 结局观察指标 |
| 1.6 统计学分析 |
| 2 结果Results |
| 2.1 参与者基本信息 |
| 2.2 不同干扰因素对于义齿重衬频率、血清骨钙素及Ⅰ型胶原羧基端交联肽水平的影响 |
| 2.3 全口义齿重衬频率与血清中骨钙素和Ⅰ型胶原羧基端交联肽水平的相关性分析 |
| 3 讨论Discussion |
四、牙周病与血清骨钙素之间的关系（论文参考文献）
- [1]淫羊藿苷与补肾固齿丸对大鼠慢性牙周炎牙槽骨重建的比较研究[J]. 廖丹,葛颂. 口腔疾病防治, 2020(12)
- [2]破骨细胞炎症通路激活和胞葬作用抑制介导糖尿病性骨质疏松的发病机制研究[D]. 安雅男. 吉林大学, 2020(08)
- [3]TGR5对成骨细胞分化的影响及相关机制研究[D]. 王庆锋. 苏州大学, 2020(06)
- [4]益生乳酸菌对绝经后女性骨质疏松影响的临床研究[D]. 郭振国. 内蒙古医科大学, 2020(03)
- [5]慢性牙周炎和IgA肾病大鼠模型的建立及其相关性初步分析[D]. 王译凡. 中国人民解放军医学院, 2019(03)
- [6]胰岛素控制对糖尿病大鼠正畸牙齿移动的影响[J]. 郭莉莉,张莹,潘多. 糖尿病新世界, 2019(09)
- [7]甲状旁腺激素对骨质疏松大鼠拔牙窝愈合的影响[D]. 张岳乔. 华北理工大学, 2019(01)
- [8]2型糖尿病患者羧化与非羧化骨钙素研究及17β-雌二醇对OVX大鼠骨质疏松影响的分子机制研究[D]. 刘连勇. 苏州大学, 2018(04)
- [9]维生素K3和枯草芽孢杆菌对肉仔鸡骨骼健康的影响及其互作效应[D]. 毕云天. 武汉轻工大学, 2018(01)
- [10]骨质疏松老年无牙颌患者全口义齿重衬与骨转化标志物的相关性[J]. 毓天昊,贾兴亚,薛燕青,战德松,阎旭. 中国组织工程研究, 2017(22)