一、猪传染性萎缩性鼻炎油佐剂二联灭活疫苗受欢迎(论文文献综述)
李洪广[1](2010)在《兔支气管败血波氏杆菌PRN基因缺失突变株的构建及特性研究》文中研究指明支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)是一种重要的病原菌,可广泛感染家畜、野生动物和实验动物呼吸道上皮,能引起猪、马、猫、狗、兔、小鼠、豚鼠等哺乳动物的呼吸道疾病,常导致感染动物发生鼻炎和支气管肺炎。人也有感染该菌的报道,尤其是小孩和免疫力缺陷的人群。该菌在兔群中感染率非常高,危害家兔健康,严重影响实验兔质量和家兔养殖业。百日咳杆菌粘附素(pertactin,PRN)是prn基因编码的一种具有抗原保护性的Bb外膜蛋白成分,也是其重要的黏附因子。PRN是Bb最重要是黏附因子和抗原成分之一,也是已经广泛使用的商品化百日咳疫苗的主要成分。目前,国内外在猪萎缩性鼻炎的研究中,对波氏杆菌的研究较为深入,但对家兔波氏杆菌的研究较少,特别是到目前为止,国内外有关兔波氏杆菌缺失突变株的研究仍未见报道。我们利用自杀性质粒构建兔支气管败血波氏杆菌PRN缺失突变株来研究PRN的功能以及在Bb的致病机理中的作用,旨在为Bb减毒活疫苗的研究提供理论依据。主要试验和结果如下:1.兔支气管败血波氏杆菌PRN基因缺失突变株的构建运用基因重组方法将庆大霉素抗性基因(GM)连接到PCR扩增的PRN1和PRN2 2个目的基因片段之间,并插入到pUC18载体中,构建出带GM标志的载体pUC18-PRN1GMPRN2,从此载体切下这3个片段,再将之克隆到pMEG-375自杀性载体中,构建自杀性载体pMEG375- PRN1GMPRN2,将自杀性载体转化到宿主菌SM-10中,宿主菌SM-10与受体菌Bb固相滤膜交配,自杀性载体转移到受体菌,根据同源重组原理,抗性筛选得到基因缺失突变株,记为Bb (ΔPRN)。2.PRN突变株生物学特性和免疫原性的研究为了研究PRN突变株BbΔPRN的生物学特性,通过与野生株WT进行比较,对其进行了遗传稳定性、生长特性、溶血特性、细胞粘附特性等研究,试验结果显示:该缺失突变株能够稳定遗传;与野生株相比,突变株生长速度慢,溶血活性、对HeP-2细胞的粘附能力没有明显差异。小鼠毒力试验结果显示,基因缺失株BbΔPRN的LD50约为野毒菌株的LD50的2倍,说明PRN基因缺失后Bb菌毒力下降。小鼠免疫原性试验结果显示,基因缺失株BbΔPRN可以对小鼠起保护作用。用不同剂量突变株对小鼠进行免疫,并于免疫后21天用野生菌进行攻毒,试验结果显示,BbΔPRN可以产生强有力的免疫力,说明突变株具有良好的免疫原性,有望成为疫苗候选株。本实验通过自杀性质粒成功构建了兔支气管败血波氏杆菌PRN基因缺失突变株,突变株遗传稳定。与野生株相比,突变株生长速度明显变慢,溶血特性和对Hep-2细胞的粘附能力没有变化,毒力约下降了一倍。免疫保护试验结果显示,突变株具有良好的免疫原性,为减毒活疫苗的研究奠定了基础。
程抱林[2](2007)在《猪瘟、口蹄疫疫苗同步免疫方法研究》文中研究表明猪瘟(Classical swine fever,CSF),是由猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)引起的一种高度接触传染的病毒性疾病。口蹄疫(Foot-and-mouth disease,FMD),是由口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)引起的偶蹄兽的一种急性、烈性、高度接触性人畜共患传染病。猪瘟、口蹄疫都被世界动物卫生组织(OIE)列为A类传染病,我国将这两种动物疫病列为一类动物疫病。至今尚无特效的治疗药物,疫苗预防仍是我国防治猪瘟、口蹄疫的主要手段,被列为强制免疫项目。但过去在进行猪瘟和口蹄疫强制免疫时,主要采用猪瘟和口蹄疫两种疫苗间隔7-10d分两次注射的不同步的免疫方法,防疫周期长、成本高,费时费工,防疫效果和防疫密度均得不到保证。本研究通过对猪瘟、口蹄疫疫苗同步免疫和分步免疫的免疫反应进行观测。结果发现,同步免疫有免疫不良反应的占23.3%,分步免疫有免疫不良反应的占21%,差异不显着。猪瘟、口蹄疫同步免疫时,在免疫后10d、20d、30d、40d、50d、60d对二病的平均抗体合格率分别为38%、78%、85%、45%、32%、25%;猪瘟、口蹄疫分步免疫时,在免疫后10d、20d、30d、40d、50d、60d对二病的平均抗体合格率分别为38%、80%、84%、41%、30%、23%,两种免疫方法免疫效果基本一致,有效保护时间均在30d左右。结果表明猪瘟、口蹄疫疫苗联合免疫无明显相互干扰作用。猪瘟、口蹄疫疫苗同步免疫后30d加强免疫一次,结果表明:首免后30d、60d、90d、120d、150d的平均抗体合格率分别为81%、86%、81%、69%、47%,二免后抗体维持时间长,有效保护时间至少在90d以上。二免对首免有加强作用,猪瘟、口蹄疫疫苗两次同步免疫比一次同步免疫效果好。对于同步免疫和加强免疫,不同免疫剂量的免疫效果表明:在进行猪瘟、口蹄疫疫苗同步免疫时,猪瘟疫苗首免2头份和二免2头份、口蹄疫疫苗首免1头份和二免1头份,免疫效果最好。本试验对猪瘟、口蹄疫疫苗同步免疫的免疫不良反应、免疫效果、加强免疫、免疫剂量进行了研究,为今后进一步开展猪瘟、口蹄疫疫苗与其他疫苗联合免疫研究奠定了基础。
杨旭夫[3](2001)在《猪传染性萎缩性鼻炎油佐剂二联灭活疫苗受欢迎》文中研究说明 本品用于预防猪传染性萎缩性鼻炎,在免疫效力和鼻腔清菌力上优于国外同类产品,达到国际领先水
丛明善,初秀[4](1999)在《我国兽医科学事业的发展和成就》文中指出 1949年建国以来,兽医事业有了很大发展,全国从中央到地方建立了兽医行政机构、事业机构和各种企业,建立健全了兽医科学研究体系。兽医科技队伍空前壮大。兽医教育事业发展较快,全国性和地方性的农业院校都设有动物医学专业,培养了大量兽医人才。他们在各自的工作岗位上作出了很大贡献。
二、猪传染性萎缩性鼻炎油佐剂二联灭活疫苗受欢迎(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、猪传染性萎缩性鼻炎油佐剂二联灭活疫苗受欢迎(论文提纲范文)
(1)兔支气管败血波氏杆菌PRN基因缺失突变株的构建及特性研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
缩略词表(Abbreviation) |
第一部分 文献综述 |
第一章 支气管败血波氏杆菌的研究进展 |
1 支气管败血波氏杆菌及其危害 |
2 支气管败血波氏杆菌病原学 |
2.1 抗原结构及生物学活性 |
2.1.1 丝状血凝素(filamentous hemagglutinin,FHA) |
2.1.2 百日咳杆菌粘附素(pertactin,PRN) |
2.1.3 气管定居因子(tracheal colonization factor,TCF) |
2.1.4 菌毛(fimbriae) |
2.1.5 腺苷环化酶溶血素(adenylate cyclase-hemolisin,AC-Hly) |
2.1.6 气管细胞毒素(tracheal cytotocin) |
2.1.7 皮肤坏死毒素(dermonecrotic toxin,DNT) |
2.1.8 Ⅲ型分泌系统 |
2.1.9 鞭毛(flagellin) |
3 流行病学和致病机理 |
4 防治 |
4.1 免疫接种 |
4.2 药物预防 |
4.3 综合防制 |
第二章 基因敲除的研究进展 |
1 基因敲除技术的原理 |
2 打靶载体 |
2.1 基因插入型载体(Gene-insertionveetor) |
2.2 基因置换型载体(Gene-replacementveetor) |
3 DNA转化技术 |
3.1 显微注射转化法(Mieroinjeetion) |
3.2 Ca~(2+)诱导热激转化法(Ca~(2+)transformation) |
3.3 电击转化法(Electroporation) |
3.4 PEG印介导转化法(PEG mediated transformation,PEG) |
3.5 农杆菌介导转化法(Agrobaeterium tumefaeiens mediated transformation,ATMT) |
3.6 基因枪介导转化法(Particle gun) |
4 同源重组细胞筛选方法研究 |
4.1 基因结构分析法 |
4.2 遗传筛选法 |
5 基因敲除的应用 |
5.1 基因功能和基础理论研究方面 |
5.2 分子免疫方面 |
5.3 病理模型和基因治疗方面 |
参考文献 |
第二部分 试验部分 |
第一章 兔支气管败血波氏杆菌PRN基因缺失突变株的构建 |
摘要 |
1 材料与方法 |
1.1 材料 |
1.1.1 菌种与质粒 |
1.1.2 酶与主要试剂 |
1.1.3 主要仪器与设备 |
1.2 方法 |
1.2.1 引物设计 |
1.2.2 PRN基因的克隆 |
1.2.3 上下游同源臂的克隆 |
1.2.4 抗性基因GM克隆 |
1.2.5 自杀性载体pMEG-375重组质粒的构建 |
1.3 固相滤膜杂交 |
1.4 氯霉素富集法筛选突变株 |
1.5 突变株的鉴定 |
2 结果 |
2.1 pm、p1、p2、GM基因的克隆 |
2.2 自杀性载体pMEG-375-P1P2GM重组质粒的构建 |
2.3 突变株的筛选 |
2.3.1 筛选第一次重组的细菌 |
2.3.2 氯霉素富集法筛选第二次重组的细菌 |
2.4 突变株的鉴定 |
2.4.1 PCR鉴定 |
2.4.2 核苷酸鉴定 |
3 讨论 |
参考文献 |
ABSTRACT |
第二章 兔支气管败血波氏杆菌PRN突变株生物学特性和免疫原性的研究 |
摘要 |
1 材料与方法 |
1.1 材料 |
1.1.1 主要试剂 |
1.1.2 仪器 |
1.1.3 实验动物 |
1.2 试验方法及内容 |
1.2.1 遗传稳定性试验 |
1.2.2 菌落形态和溶血活性的比较 |
1.2.3 生长速率的比较 |
1.2.4 细胞粘附试验 |
1.2.5 突变株对小鼠的毒力试验 |
1.2.6 突变株对小鼠的免疫效力试验 |
2 结果 |
2.1 遗传稳定性试验 |
2.2 菌落形态和溶血活性的比较 |
2.3 生长速率的比较 |
2.4 细胞粘附实验 |
2.5 突变株对小鼠的毒力试验 |
2.6 小鼠的免疫效力试验 |
3 讨论 |
参考文献 |
ABSTRACT |
全文总结 |
致谢 |
(2)猪瘟、口蹄疫疫苗同步免疫方法研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
缩略词(ABBREVIATION) |
1 文献综述 |
1.1 猪瘟 |
1.1.1 猪瘟概述 |
1.1.2 猪瘟病原 |
1.1.3 流行病学 |
1.1.4 临床症状 |
1.1.5 病理变化 |
1.1.6 诊断 |
1.1.7 防制 |
1.2 猪瘟免疫 |
1.2.1 猪瘟流行新特点 |
1.2.2 猪瘟疫苗研究进展 |
1.2.3 猪瘟一般免疫程序 |
1.2.4 猪瘟免疫效果研究 |
1.3 口蹄疫 |
1.3.1 口蹄疫概述 |
1.3.2 口蹄疫病原 |
1.3.3 流行病学 |
1.3.4 临床症状 |
1.3.5 病理变化 |
1.3.6 诊断 |
1.3.7 防制 |
1.4 口蹄疫免疫 |
1.4.1 口蹄疫流行情况 |
1.4.2 口蹄疫疫苗研究进展 |
1.4.3 猪口蹄疫一般免疫程序 |
1.4.4 猪口蹄疫免疫效果研究 |
1.5 疫苗的同步免疫 |
2 研究的背景与意义 |
3 材料与方法 |
3.1 材料 |
3.1.1 试验动物 |
3.1.2 试验疫苗 |
3.1.3 试验试剂 |
3.1.4 试验用品 |
3.2 方法 |
3.2.1 疫苗接种和血清采集 |
3.2.2 免疫反应观测 |
3.2.3 抗体测定 |
3.2.4 结果分析 |
4 结果与分析 |
4.1 同步免疫和分步免疫不良反应观察 |
4.2 同步免疫与分步免疫免疫效果 |
4.3 同步免疫与同步免疫后30d加强免疫免疫效果 |
4.4 同步免疫和加强免疫时不同免疫剂量的免疫效果 |
5 讨论 |
5.1 同步免疫与分步免疫发生不良反应分析 |
5.2 同步免疫与分步免疫免疫效果分析 |
5.3 同步免疫后加强免疫免疫效果分析 |
5.4 同步免疫不同免疫剂量免疫效果分析 |
5.5 不足分析 |
5.6 建议 |
6 结论 |
参考文献 |
致谢 |
四、猪传染性萎缩性鼻炎油佐剂二联灭活疫苗受欢迎(论文参考文献)
- [1]兔支气管败血波氏杆菌PRN基因缺失突变株的构建及特性研究[D]. 李洪广. 南京农业大学, 2010(08)
- [2]猪瘟、口蹄疫疫苗同步免疫方法研究[D]. 程抱林. 华中农业大学, 2007(02)
- [3]猪传染性萎缩性鼻炎油佐剂二联灭活疫苗受欢迎[J]. 杨旭夫. 畜牧兽医科技信息, 2001(01)
- [4]我国兽医科学事业的发展和成就[J]. 丛明善,初秀. 畜牧兽医科技信息, 1999(17)