一、雌激素与阿尔茨海默病（论文文献综述）
陈超,郭清,李红,商亚珍[1]（2021）在《雌激素与阿尔茨海默病》文中研究指明阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）是1906年一名德国精神病学家Alzheimer首先提出的,而后以其名字正式命名。它是一种普遍发生的神经退行性疾病,主要表现为不适当的社会行为和情绪、人格的改变,以及认知功能的进行性下降,严重的记忆丧失[1]。到2050年,我国60岁以上老年人将是2010年的2.52倍,老年人口的增加势必会增大老年痴呆患病人群数量,这就使我们急需一种防治老年痴呆的方法。
甄艳杰[2]（2021）在《槲皮素对Aβ25-35诱导的PC12细胞线粒体途径凋亡的保护作用及机制研究》文中认为阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）以进行性神经功能丧失、认知障碍和执行力障碍为主要临床表现。流行病学研究表明女性的发病率明显高于男性,推测AD的发生可能与女性雌激素水平有关,AD的病因和发病机制非常复杂,临床中常用雌激素替代治疗（estrogen replacement therapy,ERT）可明显减轻妇女绝经期症状,但绝经后妇女的临床试验数据显示雌激素疗法存在不良反应,使其在临床治疗中的应用具有局限性,植物雌激素引起了人们的广泛关注。研究发现与雌激素化学结构类似的植物雌激素用于神经退行性相关疾病的治疗时,植物雌激素不仅具有雌激素样神经保护作用同时降低不良反应的发生,因此有望成为预防和治疗AD的药物。槲皮素（quercetin,Que）是天然黄酮类植物雌激素,有独特的神经保护作用,且无明显毒性和不良反应。本研究以Aβ25-35诱导PC12细胞损伤建立AD体外模型,探讨槲皮素在线粒体途径凋亡过程中发挥的神经保护作用及其分子机制。用Aβ25-35作用PC12细胞24h后分别加入阳性对照药0.1μmol·L-1的17β-E2、50μmol·L-1的Gen和40、60、80μmol·L-1的Que继续孵育24h。MTT法检测雌激素耗竭条件下槲皮素对PC12细胞AD损伤模型活性的影响;Mito Tracker Red线粒体荧光探针观察线粒体形态变化;2,6-DPIP还原法测定琥珀酸脱氢酶活力;分光光度法测定Na+-K+-ATP酶活力;Rhodamine 123荧光染料检测线粒体跨膜电位;ELISA双抗体夹心法测定胞内细胞色素C浓度;分光光度法检测Caspase-3活性,免疫荧光染色检测槲皮素对Aβ25-35损伤PC12细胞雌激素受体两种亚型ERα、ERβ和p-AMPK蛋白的表达,Western blot检测损伤PC12细胞中ERα和ERβ,AMPK信号通路介导的线粒体途径凋亡蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3、Cyt-C、p-AMPK、t-AMPK蛋白表达量的变化。并使用雌激素受体拮抗剂ICI182,780,AMPK的特异性抑制剂Compound C探讨槲皮素发挥神经保护作用的分子机制。实验结果显示,20μmol·L-1浓度的Aβ25-35作用PC12细胞24h后能显着降低细胞的存活率（P<0.01）,阳性对照药17β-E2、Gen和Que组与模型对照组相比均能显着增加细胞的存活率（P<0.05）。Que能改善线粒体形态;提高线粒体琥珀酸脱氢酶活力和Na+-K+-ATP酶活力;稳定Aβ25-35诱导的PC12损伤细胞的线粒体跨膜电位;抑制Caspase-3活性;减少细胞色素C的释放。结果表明,Que通过改善PC12细胞线粒体形态、稳定线粒体膜电位及膜通透性、提高细胞线粒体活力,抑制Aβ诱导的PC12细胞损伤和线粒体功能异常。免疫荧光染色和Western blot结果显示,与模型组相比,槲皮素提高ERα和p-AMPK蛋白表达量（P<0.05）,对于ERβ蛋白表达量虽有增加但无显着性差异（P>0.05）并且在Western blot实验中实验组凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax表达比值增加及Caspase-3、Cytochrome C蛋白表达下降（P<0.05）。当槲皮素雌激素受体受到ICI182,780抑制后,p-AMPK蛋白表达下降（P<0.05）,Bcl-2/Bax比值下降及Caspase-3、Cytochrome C蛋白表达增加（P<0.05）。当Compound C作用于槲皮素后,Bcl-2/Bax比值下降及Caspase-3、Cytochrome C蛋白表达增加（P<0.05）。槲皮素通过信号通路抑制Aβ25-35诱导的PC12损伤细胞线粒体途径凋亡发挥神经保护作用,并且与ERα结合可以介导AMPK信号通路的激活,进而发挥神经保护效应。
杨梦[3]（2021）在《骨碎补对去势诱导AD模型大鼠学习记忆障碍的治疗作用及可能机制研究》文中指出目的:通过动物行为学实验、形态学实验以及生物化学实验等研究方法探讨骨碎补水煎液对去势诱导AD模型大鼠学习记忆功能障碍的治疗作用及其可能机制研究。方法:雌性SD大鼠60只,随机分为假手术组、模型组、中药组（骨碎补低、中、高剂量组）、戊酸雌二醇组,除假手术组外,余均切除双侧卵巢,假手术组、模型组灌服等体积的双蒸水,中药组灌服相应浓度的骨碎补水煎液,阳性对照组灌服相应剂量的戊酸雌二醇混悬液。灌胃8周,第8周进行水迷宫训练及测试,再进行灌流和脑组织取材。尼氏染色法检测实验大鼠脑海马CA1和CA3区尼氏小体形态、数量;同时采用高尔基染色法观察实验大鼠脑海马区神经树突形态、复杂性及树突棘的密度;免疫印迹法检测实验大鼠脑海马组织中雌激素受体（ERβ）、凋亡蛋白（Caspase 3）、突触蛋白（NMDAR-2B）及相关蛋白（GSK-3β、ERK1/2）的表达水平。结果:1.水迷宫实验结果提示,与模型组比较,骨碎补低中高剂量组及阳性组能缩短去势诱导AD大鼠逃避潜伏期且增加穿越平台次数（P<0.05）;2.尼氏染色结果显示,与模型组比较,骨碎补中剂量组可提高去势诱导AD大鼠脑海马CA1、CA3区尼氏小体数量（P<0.05）,着色加深;3.与模型组比较,高尔基染色结果显示骨碎补低高剂量组能提高去势诱导AD模型大鼠脑海马树突复杂性和树突棘密度;4.与模型组比较,免疫印迹法结果显示骨碎补高剂量组ERβ表达量明显提高;该药低、中、高剂量组及阳性组可提高突触蛋白NMDAR-2B表达量（P<0.05）;同时低、中、高剂量组均可抑制GSK-3β活性（P<0.05）;而中剂量组Caspase 3表达量显着下降（P<0.05）。结论:骨碎补很有可能是通过提高AD模型大鼠脑海马组织中ERβ表达,降低GSK-3β活性及Caspase-3的表达,同时上调NMDAR-2B表达量,进而改善神经元受损情况,最终逆转了去势诱导的AD模型大鼠认知功能障碍。
邱璇[4]（2021）在《有氧运动调控雌激素对阿尔茨海默病的神经保护作用》文中指出阿尔茨海默病（AD）是一种慢性进行性神经系统变性疾病,已成为当前影响老年人身体健康的常见痴呆类型疾病,占所有痴呆病例的60%～70%[1],全球AD患者高达3 560万例,且女性多于男性,预计到2030年患者将达6 570万例,2050年将有1.2亿患者[2]。在中国,随着老龄化进程的加剧,AD的患病率逐年上升,有数据报道截至2010年AD患者已高达569万例,发病率为6.25%[3],预计到2050年AD患病人数将是2010年的
杨艳艳[5]（2021）在《雌激素对血管性痴呆大鼠认知功能及凋亡自噬相关蛋白和Wnt/β-catenin信号通路的影响》文中指出血管性痴呆（Vascular dementia,VD）是由各种脑血管疾病（缺血或出血或急慢性缺氧性脑血管病等）导致脑功能障碍而引起的一组获得性认知功能障碍临床综合征。随着全球人口老龄化时代的到来,脑血管病患病人数逐年增多,VD已成为仅次于阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）导致认知功能障碍的第二大病因。迄今为止,VD的发病机制尚未完全明确,治疗方面主要是控制相关的心脑血管危险因素及伴随症状,缺乏确切有效的治疗药物。因此,深入探讨VD的发病机制,并寻求有效的VD防治药物显得尤为重要和迫切。雌激素是一种类固醇激素,不仅影响女性生殖系统,还能调节糖脂代谢、骨代谢,保护心血管系统。脑是雌激素作用的靶器官之一,雌激素受体广泛分布于海马、大脑皮层、下丘脑、基底前脑等与认知相关的区域。流行病学资料显示,脑卒中发病率在绝经前女性中明显低于同年龄阶段男性,但绝经后男女发病率无明显差异。近年研究发现,应用雌激素替代治疗的绝经后女性,其痴呆的发病率明显降低,表明雌激素可能是一种有希望的治疗VD的新方法。在中枢神经系统中,海马是学习记忆、信息处理和信号传输的重要部位,当海马受到缺血缺氧损伤时,细胞内多条信号转导通路出现异常,细胞凋亡及自噬同时激活,从而加速神经元的死亡。Wnt/β-catenin信号通路是一条在中枢神经系统发育过程中发挥重要作用的关键性通路,而且也参与各种细胞内程序,包括细胞增殖、存活、分化、调亡,是调控细胞生长、增殖分化的关键途径。但到目前为止,在血管性痴呆模型中,雌激素能否通过调节海马神经元凋亡、自噬及Wnt/β-catenin信号通路,从而影响VD大鼠学习记忆能力的文献报道很少。基于上述研究背景,本研究选取雌性SD大鼠,采用双侧卵巢切除术（Ovariectomy,OVX）联合双侧颈总动脉结扎术（Bilateral common carotid artery occlusion,BCCAO）制备去势VD大鼠模型,应用雌激素连续干预8周,采用Morris水迷宫评估大鼠学习和记忆能力的改善情况,采用HE染色和透射电子显微镜观察雌激素对海马神经元形态学影响,采用免疫组织化学染色和Western blot法观察雌激素对细胞凋亡、自噬相关蛋白的表达影响。在此基础上,进一步探讨雌激素发挥神经保护作用是否与激活Wnt/β-catenin信号转导通路有关,为雌激素改善认知障碍的作用机制提供更全面的理论依据。第一部分 去卵巢血管性痴呆大鼠模型的建立及雌激素对去卵巢血管性痴呆大鼠认知功能的影响目的:通过OVX联合BCCAO的方法,建立去势大鼠VD动物模型,通过行为学评估VD大鼠学习记忆能力,观察雌激素对VD大鼠认知功能的影响。方法:1.清洁级成年健康雌性SD大鼠48只,随机分为假手术组（sham组）、模型组（model组）、雌激素早期治疗组（E2-early组）、雌激素晚期治疗组（E2-later 组）。2.假手术组大鼠仅切除卵巢周围少量脂肪组织,其余三组大鼠予OVX术切除双侧卵巢。OVX术后1周,假手术组大鼠接受BCCAO假手术,其余三组大鼠接受BCCAO制备VD模型。3.E2-early组大鼠于BCCAO术后第一天开始接受17β-雌二醇（E2）腹腔注射,100 μg/kg/day,溶剂为芝麻油;E2-later组大鼠于BCCAO术后一周开始接受E2腹腔注射,100 ug/kg/day;假手术组和模型组大鼠分别接受等量芝麻油腹腔注射。每组大鼠每天腹腔注射一次,连续8周。4.最后一次给药的次日,对大鼠进行Morris水迷宫实验,评估大鼠的空间学习记忆能力。前5天为定位航行实验,第6天为空间探索实验。结果:1.定位航行实验将逃逸潜伏期（escape latency）即SD大鼠从入水到上台的时间,作为评估大鼠空间学习能力的指标。随着训练天数的增加,四组大鼠的平均逃逸潜伏期逐渐缩短,统计学显示同组各时间点逃逸潜伏期具有显着性差异（F=173.481,P<0.01）。在定位航行实验的第1天,四组大鼠的逃逸潜伏期尚无明显差异;在定位航行实验的第2～5天,模型组大鼠逃逸潜伏期较假手术组明显增加（第2天,P<0.05;第3～5天,P<0.01）。雌激素干预后,E2-early组大鼠逃逸潜伏期较模型组明显缩短（第3天和第4天,P<0.05;第5天,P<0.01）。E2-later组仅在第5天逃逸潜伏期较模型组明显缩短（P<0.05）。2.空间探索实验在实验的第6天,撤除平台,记录大鼠120秒内在原平台象限停留时间占总时间的百分比（目标象限时间百分比）、原平台象限路程占总路程的百分比（目标象限路程百分比）以及穿越原平台所在位置的次数（穿台次数）,作为评估大鼠空间记忆能力的指标。模型组大鼠目标象限时间百分比和路程百分比均明显缩短,表明BCCAO导致了大鼠记忆缺陷,而E2-early组大鼠目标象限时间百分比和路程百分比均较模型组明显增多。模型组大鼠穿台次数较假手术组显着减少;E2-early组大鼠穿台次数较模型组明显增加。虽然E2-later组大鼠的目标象限时间百分比、目标象限泳程百分比、穿台次数均高于模型组,但差异无统计学意义。3.四组大鼠游泳轨迹的变化大鼠初入水时随机游动寻找水下平台,游泳轨迹多在水迷宫边缘。随着训练天数增加,假手术组、雌激素治疗组大鼠寻台方式逐渐变为趋向式,尤其是假手术组大鼠的游泳轨迹甚至接近直线模式,而模型组大鼠直至训练结束,寻台方式仍多为边缘模式,反映出模型组大鼠出现了明显的认知功能损害。结论:1.通过OVX联合BCCAO方法能够成功建立去势VD大鼠模型,能模拟慢性脑低灌注造成的学习及记忆功能障碍。2.雌激素治疗可以明显改善VD大鼠的学习和记忆能力,并且早期雌激素干预比晚期雌激素干预更有效。第二部分 雌激素对血管痴呆性大鼠海马组织形态学的影响目的:观察VD大鼠海马神经元病理形态学的改变以及雌激素不同给药时机对VD大鼠海马神经元形态学的影响。方法:行为学测试结束后,大鼠麻醉,心脏采血,采用ELISA法测定各组大鼠血清雌二醇数值。灌注固定,断头取脑,制备标本,光镜下HE染色和透射电镜观察海马CA1区神经元细胞形态学变化。结果:1.血清雌二醇浓度的测定结果模型组大鼠血清中雌激素的浓度较假手术组和雌激素治疗组均显着降低。雌激素治疗组和假手术组比较,血清中雌激素的浓度差异无统计学意义。2.大鼠海马CA1区神经元HE染色结果假手术组大鼠海马CA1区椎体神经元细胞数量丰富,排列紧密,细胞轮廓清晰,形状规则饱满,核仁清晰,染色质分布均匀。模型组大鼠海马CA1区椎体神经元排列松散紊乱,胞体缩小,大部分胞体呈多角形或梭形,细胞核固缩深染,核仁模糊甚至完全消失,胞浆周围空晕。经雌激素治疗后的大鼠,尤其是E2-early组,海马CA1区椎体神经元细胞损伤较轻,细胞排列相对致密,细胞结构相对完整,核仁清晰,偶见核固缩的神经元。E2-later组海马CA1区神经元细胞数量减少,排列较为松散,多数细胞形态模糊,可见少部分核固缩变性的神经元。3.大鼠海马CA1区神经元超微结构改变假手术组大鼠海马CA1区神经元细胞核形态规则饱满,双层膜结构清晰,核内染色质分布均匀,胞浆内细胞器丰富,超微结构完整,只有少量神经元内可见自噬小体。模型组大鼠海马CA1区神经元细胞轮廓异型,核固缩,核周隙变大,核膜溶解内陷,核内异染色质增多,并凝集成块边聚化,胞浆内细胞器明显减少,残存的线粒体肿胀呈空泡样,粗面内质网扩张断裂,自噬小体增多。雌激素干预后,细胞核和细胞器的超微结构损伤明显减轻,细胞核形态正常,细胞器清晰。值得注意的是,与E2-early组相比,E2-later组大鼠海马CA1区神经元的超微结构损伤仍较为明显。结论:VD大鼠的海马CA1区神经元细胞出现了显着的组织病理学变化。经过雌激素治疗后,尤其是早期治疗组,海马神经元的损伤明显减轻,雌激素可能以一种治疗时间依赖的方式发挥其作用。第三部分 雌激素对血管性痴呆大鼠海马神经元凋亡和自噬相关蛋白表达的影响目的:观察VD大鼠海马组织中凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、caspase-3及自噬相关蛋白LC3Ⅱ、Beclin1的表达,进一步观察雌激素对神经元凋亡及自噬的调控作用,探讨雌激素发挥神经保护作用的机制。方法:1.动物分组及干预方式同第一部分。2.采用免疫组化的方法检测大鼠海马组织CA1区Bcl-2、Bax、caspase-3、Beclin1阳性细胞的表达,采用免疫荧光染色观察大鼠海马组织中LC3Ⅱ阳性细胞的表达。采用蛋白质免疫印迹技术检测大鼠海马组织中Bcl-2、Bax、caspase-3、LC3Ⅱ、Beclin1 蛋白的表达变化。结果:1 免疫组化方法检测大鼠海马Bcl-2、Bax、caspase-3、Beclin1的表达变化1.1 光镜下Bcl-2免疫阳性产物呈棕黄色颗粒,神经元胞浆和胞核均有定位。与假手术组相比,模型组海马CA1区神经元Bcl-2的IOD/area值明显降低（P<0.05）。与模型组相比,E2-early组Bcl-2的IOD/area值显着增高（P<0.05）,而E2-later组Bcl-2的IOD/area值虽较模型组有增高,但无统计学差异。1.2 光镜下Bax免疫阳性产物呈棕黄色颗粒,主要定位于神经元胞浆。与假手术组相比,模型组海马CA1区神经元Bax的IOD/area值明显增高（P<0.05）。与模型组相比,E2-early组Bax的IOD/area值显着降低（P<0.05）,而E2-later组Bax的IOD/area值虽较模型组有所降低,但无统计学差异。1.3 光镜下caspase-3免疫阳性产物为棕色颗粒,神经元胞浆及胞核均有定位。与假手术组相比,模型组海马CA1区caspase-3的IOD/area值明显增高（P<0.05）。与模型组相比,E2-early组caspase-3的IOD/area值显着降低（P<0.05）,而E2-later组caspase-3的IOD/area值虽较模型组有降低,但无统计学差异。1.4 光镜下Beclin1免疫阳性产物为棕黄色颗粒,定位于神经元胞浆。与假手术组相比,模型组海马CA1区Beclinl的IOD/area值显着增加（P<0.01）。与模型组相比,E2-early 组及 E2-later 组 Beclinl 的 IOD/area 值均显着降低（P<0.01 E2-early组vs.Model组;P<0.05 E2-later组vs.Model组）,但E2-early组与E2-later组之间差异无统计学差异。2 免疫荧光观察大鼠海马LC3Ⅱ的表达LC3Ⅱ蛋白在本实验中标记为黄绿色荧光。荧光显微镜观察假手术组神经元细胞免疫荧光表达较微弱,模型组LC3Ⅱ免疫荧光强度明显增加（P<0.01）。与模型组比较,E2-early组和E2-later组LC3Ⅱ免疫荧光表达强度均显着减少（P<0.01 E2-early 组 vs.Model 组;P<0.05 E2-later组vs.Model组）,但E2-early组与E2-later组之间差异无统计学差异。3 Western blot 结果3.1 模型组大鼠海马中Bcl-2、Bax、caspase-3、LC3Ⅱ、Beclinl蛋白的表达3.1.1 与假手术组相比,模型组Bcl-2蛋白表达量显着下降（P<0.05）,Bax蛋白、caspase-3蛋白表达量均显着升高（均P<0.05）,有统计学意义。3.1.2 与假手术组对比,模型组LC3Ⅱ蛋白及Beclin1蛋白表达量显着升高（均P<0.05）,有统计学意义。3.2 雌激素对 VD 大鼠海马 Bcl-2、Bax、caspase-3、LC3Ⅱ、Beclin1蛋白表达的影响3.2.1 与模型组相比,E2-early组及E2-later组Bcl-2蛋白表达量均显着增加（均P<0.05）,Bax蛋白表达量均显着下降（均P<0.05）,caspase-3蛋白表达量均显着下降（均P<0.05）,有统计学差异。3.2.2 与模型组相比,E2-early组及E2-later组LC3Ⅱ蛋白表达量显着下降（均P<0.05）,E2-early组及E2-later组Beclin1蛋白表达量明显下降（P<0.01 E2-early组vs.Model组;P<0.05 E2-later 组 vs.Model 组）,有统计学差异。结论:VD大鼠海马神经元细胞凋亡增加及自噬被激活,导致海马神经元变性及死亡。雌激素可以通过减轻海马神经元凋亡及下调自噬的激活来改善海马损伤。第四部分 雌激素对血管性痴呆大鼠海马组织Wnt/β-catenin信号通路的影响目的:观察雌激素对VD大鼠Wnt/β-catenin信号转导通路的影响,并对其分子生物学机制进行探讨。方法:1.清洁级成年健康雌性SD大鼠48只随机分为四组:假手术组（sham组）、模型组（model组）、雌激素组（E2组）、雌激素+Wnt通路抑制剂组（E2+DKK1 组）。2.模型组大鼠仅切除卵巢周围少量脂肪组织,其余三组大鼠予OVX术。OVX术后1周,模型组、E2组、E2+DKK1组接受BCCAO手术制备VD模型,假手术组行BCCAO假手术。E2+DKK1组大鼠于BCCAO术后第一天接受侧脑室置管术。3.E2组大鼠及E2+DKK1组大鼠分别于BCCAO术后第1天开始接受17β-雌二醇腹腔注射,100 μg/kg/day,溶剂为芝麻油,假手术组大鼠和模型组大鼠分别接受等量芝麻油腹腔注射。每日1次,连续7天。重组人类DKK1蛋白用于阻断Wnt/β-catenin信号转导通路。E2+DKK1组大鼠于BCCAO术后第1天和第4天接受侧脑室注射DKK1 10 μl,浓度为1μg/μl。4.BCCAO术后7天后取材,光镜下HE染色及透射电镜观察海马CA1区神经元细胞形态学变化,免疫组化法及Western blot技术检测海马组织中β-catenin、Cyclin D1、GSK-3β 的蛋白表达。结果:1.光镜下大鼠海马CA1区神经元HE染色结果假手术组大鼠海马CA1区神经元细胞排列致密有序,胞核规则饱满,核仁清晰。模型组大鼠海马CA1区神经元排列紊乱,胞体缩小呈梭形或多角形,胞核深染、固缩,核仁消失。E2组大鼠海马CA1区神经元损伤明显减轻,神经元排列整齐,大部分细胞形态清晰,少部分神经元细胞形态模糊,偶见核固缩的神经元。E2+DKK1组大鼠海马CA1区神经元排列松散紊乱,大部分神经元细胞形态模糊,胞核形状不规则,深染、固缩,胞浆周围发现空晕,胞间距较大。2.透射电镜下大鼠海马CA1区神经元超微结构的改变假手术组大鼠海马CA1区神经元细胞核形态规则饱满,双层膜结构清晰,核内染色质分布均匀,胞浆内细胞器丰富,超微结构完整。模型组大鼠海马CA1区神经元细胞轮廓异型,核固缩,核周隙变大,核膜溶解内陷,核内异染色质增多,并凝集成块边聚化,胞浆内细胞器溶解消失。E2组大鼠海马CA1区神经元细胞核形态正常,双层核膜模糊,胞浆内细胞器虽然较丰富,但内质网明显扩张,高尔基体及线粒体均明显肿胀。E2+DKK1组大鼠海马CA1区神经元固缩,形态不规则,核膜溶解断裂,核内异染色质增多,并凝集成块边聚化,胞浆内细胞器明显减少,糖原颗粒消失,线粒体消失,残存的内质网及高尔基体明显扩张。3免疫组化法观察大鼠海马β-catenin、Cyclin D1及GSK-3β的表达3.1光镜下β-catenin免疫阳性产物呈棕黄色颗粒,定位于神经元胞浆。模型组大鼠海马CA1区β-catenin的IOD/area值较假手术组显着降低（P<0.05）。经过雌激素治疗后,E2组较模型组的β-catenin的IOD/area值显着增高（P<0.05）,而给予Wnt通路抑制剂后,E2+DKK1组与模型组相比较,β-catenin的IOD/area值虽有所增高,但无统计学差异,E2+DKK1组的IOD/area值较E2组显着降低（P<0.05）。3.2光镜下GSK-3β免疫阳性产物呈棕黄色颗粒,定位于神经元胞浆。模型组大鼠海马CA1区GSK-3β的IOD/area值较假手术组显着增高（P<0.01）。经过雌激素治疗后,E2组较模型组的GSK-3β的IOD/area值显着降低（P<0.01）,而给予Wnt通路抑制剂后,E2+DKK1组与模型组相比较,GSK-3β的IOD/area值虽有所降低,但无统计学差异,E2+DKK1组的IOD/area值较E2组显着增加（P<0.05）。3.3光镜下Cyclin D1免疫阳性产物呈棕黄色颗粒,定位于神经元胞浆。模型组大鼠海马CA1区Cyclin D1的IOD/area值较假手术组显着降低（P<0.01）。经过雌激素治疗后,E2组较模型组的Cyclin D1的IOD/area值显着增加（P<0.01）,而给予Wnt通路抑制剂后,E2+DKK1组与模型组相比较,CyclinD1的IOD/area值虽略所增加,但无统计学差异,E2+DKK1组的IOD/area值较E2组显着降低（P<0.01）。4 Western blot 结果4.1 模型组:与假手术组相比,大鼠海马组织β-catenin蛋白表达量均显着减少（P<0.05）,Cyclin D1蛋白表达量显着减少（P<0.01）,GSK-3β蛋白表达量显着增加（P<0.01）。4.2 E2组:与模型组比较,经雌激素干预治疗后,这种趋势得到了明显逆转,β-catenin蛋白表达量显着增加（P<0.05）,Cyclin D1蛋白表达量显着增加（P<0.01）,GSK-3β蛋白表达量显着减少（P<0.01）。4.3 E2+DKK1组:与单独给予雌激素治疗相比,同时给予DKK1,大鼠β-catenin蛋白表达量显着减少（P<0.01）,Cyclin D1蛋白表达量显着减少（P<0.05）,GSK-3β蛋白表达量显着增加（P<0.05）。结论:雌激素治疗可减轻VD大鼠海马神经元损伤,给予Wnt通路抑制剂DKK1,使得雌激素的保护作用明显减弱,表明雌激素可能是通过激活Wnt/β-catenin信号通路发挥其作用。第五部分 雌激素替代治疗对手术绝经患者术后认知功能的影响目的:探究雌激素替代治疗对手术绝经患者术后认知功能的影响。方法:选取河北省人民医院妇科2019年1月至2020年1月收治的42例因良性病变行子宫及双侧卵巢切除患者为研究对象（术前均未绝经）,年龄48～54岁,分为两组,实验组为自愿接受雌激素治疗的患者22例,给予戊酸雌二醇片口服6个月;对照组20例,不接受激素治疗。比较用药后6个月两组患者血清雌二醇水平及认知功能变化。结果:治疗后实验组患者血清雌二醇水平较对照组显着增加（P<0.05）,蒙特利尔认知评估量表（Montreal cognitive assessment,MoCA）评分较对照组显着增加（P<0.05）。结论:雌激素替代治疗有助于改善手术绝经患者术后认知功能。
王旭,姚璇,马素亚,时晶[6]（2021）在《复方苁蓉益智胶囊治疗阿尔茨海默病作用机制的网络药理学研究》文中提出目的利用网络药理学技术研究复方苁蓉益智胶囊（CCYC）治疗阿尔茨海默病（AD）的潜在作用机制。方法利用TCMSP、BATMAN-TCM数据库、TCMID数据库、化学专业数据库查找复方苁蓉益智胶囊中5味中药的化学成分并进行活性成分筛选;利用SwissTargetPrediction数据库获取活性成分的作用靶点,搜索GeneCards数据库、OMIM数据库、TTD数据库结合文献查找获取阿尔茨海默病的疾病靶点。取活性成分靶点和阿尔茨海默病疾病靶点的交集,得到复方苁蓉益智胶囊治疗阿尔茨海默病的潜在靶点。利用String数据库构建蛋白质-蛋白质互作网络。采用Metascape平台进行靶点GO富集分析和KEGG富集分析,通过Cytoscape3.7.1软件构建"单味药-关键成分-靶点-通路"网络并进行分析。结果肉苁蓉含有最多的关键成分,荷叶有最多的潜在靶点。APP、MAPK1、MAPK3、ESR2、ESR1、EGFR、DRD2、ACHE可能是复方苁蓉益智胶囊治疗阿尔茨海默病的重要靶点,涉及的主要通路和过程主要包括神经递质受体活性、神经递质水平调控、多巴胺能突触、胆碱能突触等。结论肉苁蓉和荷叶在复方苁蓉益智胶囊复方中占主要地位,复方苁蓉益智胶囊治疗阿尔茨海默病的机制可能是减少Aβ的产生及tau蛋白形成、调节雌激素受体及表皮生长因子受体、调控多巴胺能及胆碱能系统。
张春雨[7]（2020）在《内蒙古蒙、汉族人群阿尔茨海默病相关因素的病例-对照研究》文中进行了进一步梳理目的 了解内蒙古自治区社区蒙、汉族65岁及以上人群阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）的危险因素分布特点;探讨AD危险因素的分布特征;探讨ApoE、TOMM40、PVRL2、BIN1 基因在蒙古族散发性AD（sporadic AD,SAD）患者中的变化规律,以及19号染色体单倍体型及基因环境交互作用。方法1、选取内蒙古自治区30个社区的全部65岁及以上的5150个蒙古族、汉族个体进行AD危险因素探索性研究;2、采用病例对照研究方法,进行AD危险因素的病例-对照分析,评估相关因素对AD的影响;3、收集蒙古族SAD患者51 1例,对照组为认知功能正常的健康体检者392例,应用聚合酶链反应及测序技术和病例-对照研究方法对AD组与对照组的基因型和等位基因频率进行分析;并应用单倍体分析和MDR方法研究蒙古族SAD患者基因环境间的交互作用。结果 1、单因素分析结果显示在蒙古族65岁及以上以上人群中,年龄、性别、职业、接受教育、婚姻、家庭结构、糖尿病史、高血压病史、舒张压,冠心病史和骨关节病史在两组间的差异具有统计学意义（P<0.05）;在汉族65岁及以上人群中年龄、性别、生育胎次、职业、接受教育、低收入、婚姻、家庭结构、吸烟饮酒史、体育锻炼、规律饮茶、低体重、腹型肥胖、慢性呼吸系统疾病,冠心病史和骨关节病史在两组间的差异具有统计学意义（P<0.05）;2、（1）基因多态性分析表明蒙古族SAD组与对照组相比,ApoE各基因型分布频率差异具有统计学意义（P=0.000）,并且ApoE ε4携带状态在两组间的分布存在显着差异（P=0.000）。（2）PVRL2 rs6857、rs6859、rs3852861,TOMM40 rs157580、rs2075650,ApoE rs709449的基因型和等位基因频率在AD组和对照组的分布具有显着差异（P<0.005）;ApoE rs405509的基因型和等位基因频率在AD组和对照组的分布差异具有统计学意义（P<0.05）;在校正了 ApoE ε4携带状态后,上述各SNPs位点基因型和等位基因频率在ApoE ε4+/-组分布差异并不具有统计学意义。BIN1 rs6733839、rs744373基因型和等位基因频率在AD组和对照组的分布未见差异（P>0.05）。（3）19号染色体单倍体分析发现:PVRL2 rs6857、TOMM40rs157580、2075650间存在连锁不平衡,携带CGA单倍体者的AD发病风险较低,而TAG携带者的AD发病风险较高;TOMM40 rs2075650、APOE rs405509和rs769449之间存在连锁不平衡,携带GTC单倍体者AD的患病风险较低,携带AGT者AD的发病风险较高;TOMM40 rs6857、rs6859、rs157580之间也存在连锁不平衡,携带AGG者AD的发病风险较低,携带GTA者AD的发病风险较高。（4）运用多因子降维法对蒙古族AD基因环境间的交互作用分析发现,ApoEε4、教育、TOMM40rs157580、BIN1rs6733839 之间存在交互作用,其中,ApoEε4、教育与蒙古族SAD显着相关。结论1.蒙古族65岁及以上人群中,年龄、性别、生育胎次、糖尿病史、高血压病史、舒张压水平,冠心病史和骨关节病史是AD的可能危险因素,非农牧业职业、接受教育、已婚、与配偶子女同住是AD的可能保护因素;在汉族人群中年龄、性别、低收入、多次生育、吸烟史、低体重、慢性呼吸系统疾病,冠心病史和骨关节病史是可能危险因素,非农牧业职业、接受教育、已婚、与配偶子女同住,规律饮茶、锻炼是AD的可能保护因素。2.进一步验证ApoE基因多态性与蒙古族SAD易感性相关,ApoEε4等位基因是蒙古族SAD的危险因素。3.首次对蒙古族AD人群19号染色体进行单倍体型分析发现PVRL2 rs6857、TOMM40 rs 157580 和 rs2075650 间存在连锁不平衡;TOMM40 rs2075650、APOE rs405509和rs769449之间存在连锁不平衡,TOMM40rs6857、rs6859、rs157580之间也存在连锁不平衡,内蒙古蒙古族人群APOE、TOMM40、PVRL2、BIN1基因多态性与SAD的易感性相关。4.首次构建出了蒙古族AD发病的最优环境-基因交互模型,即ApoEε4,教育,TOMM40 rs157580,BIN1rs6733839与蒙古族AD发病显着相关,多因素Logistic回归分析显示ApoEε4、教育水平与蒙古族SAD的发生显着相关。
马少博[8]（2020）在《芝麻素对雌性APP/PS1阿尔兹海默症小鼠认知功能障碍的改善作用与机制》文中指出随着当今社会发展,老龄化趋势逐渐加剧,老年人健康问题愈发引起人们的关注。神经退行性疾病作是一种会导致神经细胞的退化和死亡的疾病,如阿尔兹海默症,是威胁老年健康问题的主要因素,女性因为绝经期后雌激素匮乏,女性阿尔兹海默症患病率远大于男性。近年来,利用天然食品功能组分干预神经退行性疾病已成为食品分子营养领域的研究热点。芝麻素是一种从芝麻中提取的木质素,属于植物雌激素,具有抗抑郁和神经保护作用。本研究为了解芝麻素作为一种植物雌激素在减轻认知障碍中的作用机制提供了线索,并提出了补充芝麻素可能的有益阶段。本文主要研究内容如下所述:（1）以6月龄和9月龄的雌性APP/PS1模型小鼠,探讨了芝麻素对小鼠认知障碍的改善作用。试验采用芝麻素（0.05%,w/w）对小鼠进行12周干预,通过新物体识别测试行为学检测手段对实验动物的学习记忆能力及认知功能进行评价,试验结果显示芝麻素能够改善12月龄的雌性APP/PS1小鼠的认知障碍,但没有改善9月龄的小鼠的认知障碍。（2）以6月龄和9月龄的雌性APP/PS1模型小鼠,探究了芝麻素对APP/PS1小鼠脑内β淀粉样蛋白聚集和神经炎症的干预作用,实验结果表明芝麻素显着地改善小鼠脑部β淀粉样蛋白聚集,抑制胶质细胞的过度激活及相关炎症因子如IL-1β和IBA-1等表达,并且显着促进突触后密度蛋白95（PSD-95）表达,增强突触可塑性,改善神经损伤。此外,芝麻素还能显着降低12月龄小鼠脑部淀粉样前体蛋白（APP）表达并且增加了9月龄和12月龄小鼠脑部重组人胰岛素降解酶（IDE）,从而抑制β淀粉样蛋白的合成和对β淀粉样蛋白的降解。通过蛋白免疫印迹实验结果显示,芝麻素补充能够激活小鼠脑内AKT-PI3K信号通路。（3）以SH-SY5Y细胞为研究对象,探讨了芝麻素发挥神经保护作用的相应机制。在体外实验中,以20μM的Aβ25-35及0-50μM浓度梯度的芝麻素处理SH-SY5Y细胞,结果表明芝麻素显着抑制Aβ25-35诱导在SH-SY5Y细胞中的神经毒性反应。之后使用ERβ拮抗剂PHTPP对细胞ERβ进行抑制,来探究芝麻素通过与ERβ结合发挥神经保护作用的机制。试验以20μM的Aβ25-35、1μM的ERβ拮抗剂PHTPP和25μM的芝麻素处理SH-SY5Y细胞,发现芝麻素通过ERβ-AKT-PI3K信号通路调节PSD-95和IDE的表达,从而减轻Aβ25-35诱导的神经毒性。综上所诉,芝麻素能干预阿尔兹海默症引起的小鼠认知记忆障碍和小鼠脑内β淀粉样蛋白聚集、神经炎症,揭示了食品功能组分芝麻素对阿尔兹海默症的干预作用和潜在可能的相应机制。
梁克山[9]（2019）在《P38MAPK抑制剂、雌二醇和TPX2对痴呆鼠模型海马神经细胞损害的保护作用及认知功能的影响》文中认为引言痴呆是以认知功能进行性减退为特征的综合征,是一种渐进的、退化的脑部疾病,导致认知和情感功能的丧失,最常见于记忆,而其他功能如语言、行为以及最显着的执行功能也常常受损。据估计,全世界约有2400万人患有痴呆症,到2040年,这一数字将增加3至4倍。大约60%是阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）,10%～20%为血管性痴呆（vascular dementia,VaD）,分别占痴呆的第一、二位,其发病机制尚未完全明了。AD特征性病理改变为颞叶海马出现β淀粉样蛋白沉积形成的细胞外老年斑和tau蛋白过度磷酸化形成的神经细胞内神经原纤维缠结,VaD是由于缺血、出血、低灌注、栓塞、小血管病等血管因素及事件致认知领域损害。在影像学方面,AD是以海马、颞、顶叶皮质萎缩为主的弥漫性萎缩,VaD表现为认知相关区（额叶、颞叶、海马、顶叶、角回、丘脑等）的血管事件（梗死、出血、脑白质病变、腔隙性梗死）。除家族史和一些躯体疾病外,导致痴呆的危险因素主要有:年龄、性别、较低教育、经济水平等。两者在临床表现上各有特点。但在临床实际工作中常难以鉴别。有证据表明,相当部分的AD具有脑血管方面的病理改变,这可能是老龄化的表现之一,也有可能是AD与VaD混合状态的表现之一。同样地,VaD患者脑组织病理检查可以发现诸如老年斑之类AD改变,这可能是混合性痴呆的结果,与正常的老年化进程有关。这就导致人们对这两种疾病的关系和鉴别产生了浓厚的兴趣,这些问题的研究有助于对痴呆发生的病理机制有更加深人的了解,对临床干预策略的制定有很大的推动作用。海马是神经系统中与人类的学习与记忆关系密切的重要功能区,大脑的海马体不但是老年痴呆最早最重要的病变区域,而且也是血管性痴呆的重要受损部位,以往的研究表明,海马神经元凋亡在AD和VaD的发病中均起着重要的作用,并且对缺血低灌注损伤具有明显的易感性。阿尔茨海默氏病（阿尔茨海默病）是一种进行性神经退行性疾病,最终导致神经元不可逆性损伤以及各种智力缺陷,包括认知和记忆。AD已成为重要的公共卫生问题,其症状主要包括躯体、认知、情绪功能的障碍,以及长期的认知和感觉功能退化,这些均明显影响患者的生活质量。当前已有大量有关AD发生和发展方面的研究,并已取得显着成绩,但是这些研究仍然无法提供有效的疾病诊断和治疗技术。这种紧迫的需求激发了神经科学界及医疗行业对AD治疗方法发展的兴趣。根据经典的淀粉样蛋白假说,相对于其他各种淀粉衍生物,Aβ1-42在AD的发病中起着重要的作用。Aβ1-42是由淀粉样前体蛋白（APP）裂解产生的β-分泌酶和γ-分泌酶。Aβ蛋白过量导致淀粉样斑块的形成和各种神经功能障碍包括炎性级联反应的激活启动,tau蛋白磷酸化的推广,氧化应激的增加,细胞内的信号转导通路的管制,突触可塑性的损伤及诱导神经元的凋亡和细胞死亡。越来越多的证据表明,雌二醇可能既促进又会损害记忆相关的过程,因此,雌激素在AD病理过程中所扮演的确切的角色仍然是难以捉摸的。目前,通过向脑内立体定向注射Aβ1-42建立AD小鼠模型。切除小鼠双侧卵巢来观察17β-雌二醇（E2）对AD不同阶段的治疗（早期和晚期）的影响,国内外少见报道,对这一课题的进一步研究无疑具有重要意义。充分证据表明,妇女绝经后循环系统中雌激素水平会突然下降,造成氧化应激风险加大和神经退行过程加快,尤其是那些AD的高危人群。另一方面,实验研究表明,雌性动物（OVX）切除卵巢后的雌激素治疗可改善其学习和记忆过程,提高其在旋臂迷宫和对象识别中的认知能力。在临床情况下,绝经后5年内保持较高雌二醇水平的女性与保持稳定低雌二醇水平的女性相比,前者表现出更优的行为能力。此外,具有较高内源性雌激素水平的绝经后妇女在斯特鲁普任务和空间工作记忆,延迟回忆和数字排序测试方面的能力更为出色。同样,正在服用激素替代疗法的妇女在非空间工作记忆和空间工作记忆任务有更好的反应。然而,也有报道指出雌激素对绝经后妇女认知能力的负面影响。旨在了解这些差异的研究结果表明,若提前应用雌二醇,暴露于Aβ蛋白的神经元所受损伤会显着减少,而若同时或于暴露Aβ蛋白5天后应用雌二醇,神经元则无法获得雌二醇所带来的保护,甚至所受损伤会转而加剧。总之,在阿尔茨海默病的病理过程中雌激素起着微妙又重要的作用,可在不同阶段施加积极或消极的影响。因此,本实验通过研究AD不同病理阶段的17β-雌二醇（E2）治疗（早期和晚期）,全面了解E2在AD病理过程中的角色和评估E2作为预防药物的意义。海马是神经系统中与人类的学习与记忆关系密切的重要功能区,大脑的海马体不但是老年痴呆最先最重要的病变区域,而且也是血管性痴呆的重要受损部位,以往的研究表明,海马神经元凋亡在AD和VaD的发病中均起着重要的作用,但SB202190和SB203580对海马神经元凋亡因子表达和学习记忆能力的影响却少有报道,特别是SB202190和SB203580对海马神经元凋亡和Bcl-2、Caspase-3表达影响的研究国内外未见有报道。为了探讨海马神经元凋亡在AD和VaD中的致病机制以及对认知功能的影响,历时6年课题组做了以下3项课题:1.应用雌二醇对AD痴呆小鼠模型海马神经细胞元凋亡的保护作用机制和认知功能影响进行了研究,本研究利用切除双侧卵巢的小鼠,经侧脑室内注射Aβ1-42的方法建立阿尔茨海默病（AD）模型,并给予雌二醇（E2）治疗,研究Aβ1-42诱导的海马神经毒性及分子机制,评价E2拮抗Aβ1-42诱导的海马神经毒性的效果和分子机制。2.应用p38MAPK抑制剂对VaD痴呆大鼠模型海马神经细胞凋亡的保护作用机制和认知功能影响进行了研究,在这项研究中,我们研究了 SB203580、SB202190对血管性痴呆大鼠海马细胞凋亡和学习记忆能力的影响。观察了 p38 MAPK抑制剂对脑细胞凋亡的保护作用,并借助海马依赖性水迷宫试验检测了大鼠的空间参考学习和记忆能力。3.应用TPX2研究对阿尔茨海默病模型大鼠神经细胞凋亡的保护作用机制。借助海马依赖性水迷宫试验检测了大鼠的空间参考学习和记忆能力。TUNEL染色检测脑组织细胞凋亡,H E染色观察各组脑组织细胞,Western blot检测ERK和p38 MAPK的表达,采用RT-PCR方法检测MAPK、ERK和p21中mRNA的表达水平。观察了 TPX2对经β1-42处理脑组织的细胞凋亡有保护作用,进一步通过抑制MAPK、ERK和p38蛋白的表达而探讨了其作用机理。总之,课题组通过以上3项研究,旨在进一步阐明p38MAPK抑制剂和雌二醇对痴呆鼠模型海马神经元凋亡的保护作用机制以及对痴呆模型认知功能的影响。第一部分 雌二醇治疗对小鼠阿尔茨海默病模型海马神经元发生及认知功能障碍的早期保护作用目的:本研究利用切除双侧卵巢的小鼠,经侧脑室内注射Aβ1-442的方法建立阿尔茨海默病（AD）模型,并给予雌二醇（E2）治疗。检测Aβ1-42诱导的神经毒性及分子机制;评价E2拮抗Aβ1-42诱导的神经毒性的效果和分子机制。方法:1.双侧卵巢切除术:所有小鼠双侧卵巢切除并立即皮下植入药物,可以持续释放药物60天,内含有E2 0.18毫克。2.动物模型的制备:AD模型组小鼠Aβ1-42（4μg/mouse）,缓慢注射（0.5μl/min）;安慰剂组小鼠注射等量生理盐水（4μg/mouse）。3.BrdU注射:BrdU连续3次腹腔注射,间隔6小时,给药剂量为50mg/kg。4.雌二醇治疗:（1）早期E2治疗:注射BrdU后第7天双侧海马注射Aβ1-42,后给予7天雌二醇皮下注射,3 μg/day。（2）后期E2治疗:注射BrdU后第7天双侧海马注射Aβ1-42,7天后再给予7天雌二醇皮下注射,3 μ g/day。5.Morris水迷宫实验:计算每组小鼠平均游泳速度、延迟时间。在实验的第8天,撤去隐蔽的水面下平台,观察并记录小鼠的游泳速度及登台潜伏期。6.免疫染色:采用NeuN和BrdU免疫染色检测海马神经的生成。7.ELISA检测:检测促黄体生成激素（LH）、促卵泡激素（FSH）、雌激素（Estrogen）、孕酮（Progesterone）血清水平。8.RT-PCR:从大脑样本中取出海马组织,在冰上用剪刀将其剪碎。总mRNA采用Trizol试剂提取和RNA反转录与PrimeScriptTMRT试剂盒。9.Western blotting检测信号通路蛋白的表达:从大脑样本中取出海马组织,在冰上用剪刀将其剪碎。蛋白样品的提取采用放射免疫沉淀试验（RIPA）缓冲液。10.cAMP浓度测定:海马组织,在冰上用剪刀将其剪碎。组织颗粒在裂解缓冲液中裂解10分钟,在4℃、14000 rpm离心10分钟,收集上清液并用LANCETM cAMP 384试剂盒测定环磷酸腺苷（cAMP）浓度。11.透射电子显微镜:腹腔麻醉后小鼠,经心脏用2.5%戊二醛灌注并取出海马组织,海马组织继续用2.5%戊二醛固定过夜,在4℃,四氧化锇固定2小时后制作超薄切片（60 nm）,用丙酮脱水和醋酸铀染色。结果:1.小鼠海马注射Aβ1-42后,进行Morris水迷宫测试评,估认知功能,特别是空间学习和记忆能力（图1A）。在培训第1-2天,接受Aβ1-42注射的“老年”鼠在发现可见平台的游泳速度或时间延迟上与对照组相比没有差异,这表明空间学习能力不是在Aβ1-42注射后立即受到影响（P>0.05,n=10;见图1A）。相反,改为隐藏平台培训的第3-7天,Aβ1-42小鼠比对照组小鼠时间延迟更长,这些差异在5-7天显着,这表明记忆功能是在Aβ1-42注射后5天开始明显受损（P<0.01,n=10;见图 1A）。从迷宫中去掉平台后,观察小鼠在每个象限停留的时间比例（图1B）。Aβ1-42小鼠在象限虚拟平台的位置所花费的时间百分比明显减少。在本研究中,通过NeuN和BrdU染色标记海马神经元（图1C）,染色结果显示Aβ1-42模型组小鼠BrdU注射后21到28天,NeuN、BrdU 阳性细胞数量均显着减少（P<0.01,n=10;图1D）。这些结果表明,小鼠海马神经元在接受Aβ1-42注射后发生严重损害。2.为评估E2对AD小鼠病理过程中早期阶段的影响,在造模后立即给予E2治疗（图2C）。与单纯对照组相比,接受E2治疗的对照组海马神经元再生无明显变化,而Aβ1-42小鼠接受E2治疗与未接受E2治疗比较,NeuN和BrdU 阳性细胞显着增加（P<0.01,n=3;图2D）。此外,给予E2治疗后,AD小鼠找到隐藏平台的潜伏期显着降低（P<0.01,n=10;图2A）,在撤出平台的象限所停留的时间比例明显升高（P<0.01,n=10;图2B）。这些研究结果表明,在Aβ1-42小鼠AD病理过程的早期阶段,雌激素治疗增加海马元神经再生并促进认知功能的恢复。3.为评估E2对AD小鼠病理过程中后期阶段的影响,在造模后第7天开始给予E2治疗（图2C）。无论是对照组还是模型组,E2治疗均没有改善海马神经元再生,NeuN和BrdU阳性细胞没有明显变化（P>0.05,n=3;见图3D）。此外,给予E2治疗,并没有降低AD小鼠找到隐藏平台的潜伏期（P>0.05,n=10;见图3A）。在撤出平台的象限停留时间比例没有明显升高（P>0.05,n=10;见图3B）。4.通过测定LH、FSH、雌激素和孕激素的血清水平,确认E2的效果。在E2治疗前FSH,LH,雌激素或孕激素水平没有显着差异（P>0.05,n=6;图4A-D）,但在E2治疗后LH、FSH、雌激素水平显着增加,而孕酮水平明显下降（P<0.01,n=6;图 4A-D）。在早期给与雌二醇的Aβ1-42小鼠,TrkB、BDNF的mRNA及蛋白水平显着上调,而P75NTR表达水平减少（P<0.01,n=3;图4E,F）。这些结果表明,E2诱导的神经发生,至少部分通过BDNF/TrkB通路。对这一途径的下游因子进行了检测（图4E,F）和结果与以前的研究结果相一致,STAT3/CREB/ERK信号通路的激活明显增加（P<0.01,n=3;图4E,F）。本研究还对cAMP水平进行评估,以确认BDNF/TrkB下游信号通路的活化（图4D）。5.与后期E2治疗及未给予E2治疗比较,在早期给与雌二醇的A β 1-42小鼠,NO和ROS的水平明显降低（P<0.01,n=3;图5A）。相应的细胞死亡相关的Cytochrome-c/Bax/Bcl-2/acspase-3 信号通路因子活化下调（P<0.01,n=3;图5B-C）。这些结果表明,E2降低AD病理过程早期阶段海马区的细胞的氧化应激及死亡通路相关因子的活化,促进认知功能的恢复。6.与后期E2治疗及未给予E2治疗比较,在早期给与雌二醇的Aβ1-42小鼠,胶质细胞增生显着降低（P<0.01,n=3:图6A,B）。E2介导的炎症反应,上调抗炎信号通路的因子活化（CD206,FIZZ1,1、TGFβ）并下调促炎信号通路因子的活化（IL-1β,TNF 和 IL-6。P<0.01,n=3;图 6C-E）。7.在本研究中,使用透射电镜观察海马突触的超微结构。与后期E2治疗及未给与E2治疗比较,发现在早期给与雌二醇的Aβ1-42小鼠,突触的数量显着增加（P<0.01,n=3;图7A）。为了进一步探讨E2对不同类型突触的作用,采用Western blot对海马NMDA受体和AMPAR受体水平进行分析。NMDA受体（GluN1和GluN2）水平没有明显影响,而AMPAR受体水平（GluA1 GluA2）明显增加（P<0.01,n=3;图7B,C）。此外,还有重要的突触后蛋白Hevin和SPARC表达明显增加（P<0.01,n=3;图7B,C）,这两种蛋白在突触的生成及功能方面起着重要作用。结论:1.Aβ1-42小鼠认知功能减退与海马区神经元发生有关。小鼠海马神经元在接受Aβ1-42注射后发生严重损害,海马神经元损害在认知功能障碍方面起到重要作用。2.AD早期阶段E2可增加海马神经元再生并促进认知功能的恢复,而后期阶段E2治疗对的海马神经元再生及认知功能无改善。3.AD早期阶段E2治疗上调Aβ1-42小鼠海马神经元再生相关信号通路。4.AD早期阶段E2治疗可减少氧化应激、下调细胞死亡相关的信号通路活性。5.AD早期阶段E2治疗抑制Aβ1-42小鼠海马小胶质细胞过度增生。6.AD早期阶段E2治疗可增加海马神经元突触受体数量。第二部分 P38MAPK抑制剂对血管性痴呆大鼠海马细胞凋亡的保护作用及学习记忆能力的影响目的:本研究利用应用双侧颈总动脉结扎法（2-VO法）制作血管性痴呆（VaD）大鼠模型,经侧脑室内注射SB202190和SB203580的方法对VaD大鼠学习记忆能力进行研究,观察p38MAPK抑制剂对VaD大鼠海马依赖的Morris水迷宫的认知功能所起的作用,并通过研究海马神经元凋亡、海马区P38MAPK磷酸化变化及Bcl-2和Caspase-3表达,研究SB202190和SB203580对血管性痴呆大鼠海马区的神经保护机制,探讨海马神经元凋亡在血管性痴呆的发病机制中所起的作用。方法:利用应用双侧颈总动脉结扎法（2-VO法）制作血管性痴呆（VaD）大鼠模型,随机分为SB202190治疗组、SB203580治疗组、对照组和假手术组。假手术组只分离出双侧颈总动脉并不对其结扎,作为两血管法VaD模型的正常对比。治疗组采用侧脑室注射给药方式分别给予P38MAPK抑制剂SB202190、SB203580,对照组和假手术组采用侧脑室注射给药方式给予等量二甲基亚矾（DMSO）,注射药物2周后用Morris水迷宫法测试各组大鼠的学习记忆能力的变化。注射药物后应用TUNEL法检测海马区神经元凋亡,应用蛋白印迹（Western blot）法检测大鼠海马区P38MAPK磷酸化变化,免疫荧光法和激光共聚焦显微镜观察大鼠海马区Bcl-2和Caspase-3表达,以探讨SB202190和SB203580对血管性痴呆大鼠海马区的神经保护机制。结果:1.本研究对平台逃避潜伏期、空间学习、大鼠的SB203580或SB202190治疗效果均进行了研究。结果表明,SB203580和SB202190治疗组平台逃避潜伏期与假手术组和对照组相比明显缩短（**P<0.01）,说明大鼠的空间学习能力得以提高。2.给予SB203580和SB202190治疗5天后我们还观察到海马磷酸化激活P38 MAPK表达水平在各治疗组间差异显着（**P<0.01,SB203580治疗组或SB202190组治疗VS假手术组和对照组）。结果显示,SB203580或SB202190治疗后p38MAPK的表达显着降低。SB203580和SB202190治疗组间无显着差异。3.SB203580和SB202190有助于海马神经元抵抗慢性缺血诱导的细胞凋亡。为了探索SB203580和SB202190是否对血管性痴呆大鼠体外海马细胞凋亡和学习记忆能力有效,本实验用HT22细胞测试SB203580和SB202190的治疗效果。与对照组相比,用SB203580或SB202190治疗后实验组海马神经元凋亡减少。实验也证实了在体内SB203580、SB202190对海马细胞凋亡和血管性痴呆大鼠学习记忆能力是有疗效的。侧脑室注射SB203580和SB202190治疗五天后,处死大鼠,与对照组、SB203580和SB202190组相比,假手术组TUNEL阳性细胞数（脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导缺口末端标记,绿色荧光）显着下降（**P<0.01）。然而,SB203580和SB202190组与对照组相比,前者TUNEL阳性细胞数目显着降低;而且SB203580组与SB202190组相比,前者TUNEL 阳性细胞较少。总之,SB203580和SB202190有助于海马神经元抵抗慢性缺血诱导的细胞凋亡。4.本实验研究了 SB203580和SB202190对VaD大鼠海马区施加的抗凋亡能力。脑室注射五天后,处死大鼠获取VaD大鼠海马标本。SB203580或SB202190培养48小时后,进行实验计算实验组凋亡细胞的数量（n=3）。P38MAKA培养后,HT22细胞出现皱缩,碎裂成膜结合凋亡小体,很快被邻近细胞吞噬。P38MAKA能够减少HT22细胞的凋亡。而SB203580或SB202190治疗组凋亡的HT22细胞数量均显着低于对照组。5.在VaD大鼠模型的海马标本上进行了 P38 MAKA和凋亡相关基因之间的关系研究。我们对P38MAKA诱导细胞凋亡相关的mRNA的表达水平进行了分析。与假手术组和对照组相比,细胞凋亡抑制基因BAX和Bcl-2在VaD大鼠海马经SB203580 或 SB202190 治疗后表达增加。caspase-8、caspase-3 和 caspase-9 的表达在SB202190或SB203580治疗组比对照组均显着降低。但SB202190治疗组细胞凋亡抑制基因Bax和Bcl-2的表达比SB203580组略高,这表明SB202190可通过抑制P38 MAKA的活性而减少细胞凋亡,依赖线粒体的凋亡途径可以由慢性缺血激活。6.大鼠经SB203580和SB202190治疗存活时间延长 实验组其余VaD大鼠模型继续存活以观察治疗的远期疗效。假手术组和对照组大鼠在第30天处死。相反,约30%SB202190组和60%SB203580组的动物最后需要处死（**P<0.01）。这说明与SB203580相比,SB202190治疗可进一步延长大鼠的存活时间。其中,相对于SB203580,SB202190较好的治疗效果体现在VaD大鼠显着的生存优势（**P<0.05）结论1.P38MAPK抑制剂SB202190和SB203580,能提高或改善VaD大鼠的学习记忆能力。2.本研究给予VaD大鼠P38MAPK抑制剂治疗后p38MAPK的表达显着降低,有效减少海马神经元细胞凋亡,促进记忆障碍重建,且耐受性良好。3.SB203580和SB202190通过抑制P38 MAKA的活性而减少细胞凋亡,有助于海马神经元抵抗慢性缺血诱导的细胞凋亡,依赖线粒体的凋亡途径可以由慢性缺血激活。4.大鼠经SB203580和SB202190治疗存活时间延长,与SB203580相比,SB202190治疗可进一步延长大鼠的存活时间。第三部分 TPX2对阿尔茨海默病模型大鼠神经细胞凋亡的保护作用机制的研究目的:研究TPX2对阿尔茨海默病模型大鼠神经细胞凋亡的保护作用机制。方法:将90只大鼠随机分为药物组、对照组和空白组,每组30只。在药物治疗组和空白组大鼠用1 0%水合氯醛麻醉（0.5ml/100g剂量）,在大鼠双侧海马区域的准确位置注入Aβ1-425ul（浓度1μg/ul）建立模型。将配置的TPX2抑制剂制成溶液。模型建立后,各组大鼠分别给予不同的治疗方法;药物组大鼠将TPX2-siRNA溶液连接10μl微量注射器给予侧脑室注射10μl,对照组大鼠给予侧脑室注射等量1%DMSO溶液。空白组为正常健康组,本组大鼠未作任何手术或药物治疗。大鼠脑组织分为两个部分,一部分是固定、脱水、石蜡包埋、制成约5um厚度的切片。TUNEL染色检测脑组织细胞凋亡,HE染色观察各组脑组织细胞,Western blot检测ERK、MAPK和p38的表达水平,采用RT-PCR方法检测MAPK、ERK和p38中mRNA的表达水平。结果:一周后,TUNEL染色显示在药物组脑组织细胞凋亡率明显高于对照组和空白组,差异具有统计学意义（P<0.05）;使用TPX2抑制剂后,药物组TPX2的mRNA表达水平显着低于对照组,差异具有统计学意义（P<0.05）,分别检测MAPK和p38蛋白的mRNA表达水平,药物组MAPK水平显着高于对照组及空白组,差异具有统计学意义（P<0.05）;Western blot灰度值比较中发现,MAPK和p38的表达水平无显着差异,其差异不具有统计学意义（P>0.05）。然而,在药物组中,MAPK、p38表达水平明显高于对照组,空白组MAPK灰度值则明显下降,其差异具有统计学意义（P<0.05）。结论:因此,TPX2通过抑制MAPK、ERK和p38蛋白的表达抑制经Aβ1-42处理的脑组织细胞发生凋亡,对其有保护作用。
白钰如（Rebecca Yuk-Yu）[10]（2019）在《针灸治疗老年性痴呆（AD）的网状Meta分析及取穴规律探讨》文中研究说明目的:采用网状Meta分析这一新颖的统计学方法,评价针灸治疗阿尔茨海默病的患病人群的有效率、MMSE、ADL、HDS-R等指标,以更好地为临床实践提供更好的循证依据;同时采用聚类分析方法,研究针灸干预治疗阿尔茨海默病的选穴规律。方法:制定相关的文献检索公式:计算机检索数据库CNKI、CBM、VIP、Wangfang、Pubmed、Embase和Cochrane Library。检索日期从数据库建库开始截止至2019年8月。中文检索式为:（AB=针灸OR AB=针刺OR AB=电针OR AB=浮针OR AB=针OR AB=艾灸OR AB=温针OR AB=耳穴OR AB=耳针OR AB=穴位注射OR AB=火针OR AB=拔罐OR AB=温针灸）AND（AB=老年性痴呆OR AB=神经认知障碍OR AB=老年痴呆OR AB=阿尔茨海默病OR AB=老年痴呆症）AND（AB=随机OR AB=随机对照OR AB=分组OR AB=分组OR AB=对照）NOT（TI=大鼠OR TI=小鼠 OR TI=猴）（以CNKI 为例）;英文检索式为（以Pubmed为例）:Pharmacopuncture[Title/Abstract]OR Acupuncture Treatment[Title/Abstract]OR Acupuncture Treatments[Title/Abstract]OR Treatment,Acupuncture[Title/Abstract]OR Therapy,Acupuncture[Title/Abstract]OR Pharmacoacupuncture Treatment[Title/Abstract]OR Treatment,Pharmacoacupuncture[Title/Abstract]OR Pharmacoacupuncture Therapy[Title/Abstract]OR Therapy,Pharmacoacupuncture[Title/Abstract]OR Acupotomy[Title/Abstract]OR Acupotomies[Title/Abstract]OR Moxibustion[Title/Abstract]OR Warm Needle[Title/Abstract]OR Temperature Needle[Title/Abstract])OR Auricular Point Sticking[Title/Abstract]OR Points,Auricular Acupuncture[Title/Abstract])OR Fire-Needle Therapy[Title/Abstract]OR Needle Warming Therapy[Title/Abstract]AND Alzheimer disease[Title/Abstract]OR AD[Title/Abstract]OR Dementia,Senile[Title/Abstract]OR Senile Dementia[Title/Abstract]OR Dementia,Alzheimer Type[Title/Abstract]OR Alzheimer Type Senile Dementia[Title/Abstract]OR Primary Senile Degenerative Dementia[Title/Abstract]OR Alzheimer Sclerosis[Title/Abstract]OR Alzheimer Syndrome[Title/Abstract]OR Alzheimer Dementia[Title/Abstract]OR Senile Dementia,Alzheimer Type[Title/Abstract]OR Senile Dementia,Acute Confusional[Title/Abstract]OR Presenile Dementia[Title/Abstract]OR Alzheimer Disease,Late Onset[Title/Abstract]。根据纳入与排除标准进行资料的提取,统一制定数据资料提取表提取以下内容:论文题目、第一作者、发表年份、各臂样本量、干预措施、年龄、疗程、随访时间、文献质量评价的相关条目和临床疗效的相关结局指标以及相关的穴位。对被纳入研究的文献资料结局指标进行数据提取,采用STATA 14.0进行数据统计,本次网状 Meta 分析评价 Mini-Mental State Examination（MMSE）、activities of daily living（ADL）、Hasegawa Dementia Scale Revised（HDS-R）为连续性变量,采用相应指标治疗后的加权均数差（Weighted Mean Difference,WMD）为效应量,并计算 WMD 的 95%可信区间（confidence interval,CI）;有效率为计数资料,计数类数据将使用优势比（odds ratio,OR）作为统计数据的效应尺度,并计算OR的95%可信区间（confidence interval,CI）。本研究将采用Cochrane Handbook 5.1.0风险偏倚方法进行文献质量评价。采用STATA 14.0软件进行网络证据关系图、森林图、等级概率图、漏斗图的绘制以及相应的统计,采用节点劈裂法（node-splitting method）进行一致性检验,若差异无统计学意义（P>0.05）,提示直接比较和间接比较结果一致,并且使用STATA14.0对各个闭环进行一致检验。本研究采用SUCRA计算每种治疗方案的累积排序概率,SUCRA的数值越大,说明该干预措施效果越好。关于文献取穴规律的研究,研究方法为计算机检索数据库CNKI、CBM、VIP、Wangfang、Pubmed、Embase和Cochrane Library,按本研究中提及纳入标准和排除标准进行筛选,将最终纳入文献的相关信息进行提取并行预处理,建立阿尔茨海默病穴位处方数据库,运用SPSS 17.0进行聚类分析,以得出针灸治疗阿尔茨海默病的临床取穴规律。结果:初检共获得相关文献 1629 篇,其中 Pubmed（n=45）、Embase（n=64）、Cochrane Library（n=375）、CNKI（n=263）、CBM（n=403）、WanFang Data（n=299）、VIP（n=180）,手工检索来源（n=20）,阅读标题和摘要剔除无关文献后共有310篇,经过排除重复文献以及严格遵照纳入标准以及排除标准,本研究最终纳入67篇RCTs,共计纳入4806例患者。纳入本网状Meta分析67项RCTs研究总体质量尚可,英文文献5篇。23篇研究详细描述了随机序列的产生方式并且随机化的方式正确,2篇文献未进行盲法,为高风险,其余研究仅提及随机,但并未对随机方法进行描述;1篇文献均详细描述了实施盲法及测量盲法的使用,其余研究均未提及;1文献描述了对病人实施盲法,其余未描述;在是否存在选择性报道评价方面,2篇文献研究设计中提及需报道ADL指标,但在文献报道中未进行报道,存在选择性报道的风险,其余均为低风险;对于是否存在不完整的数据和其他偏倚风险而言,67篇RCTs偏倚风险均较低。网状Meta分析结果显示,在提高治疗阿尔茨海默病有效率方面,SUCRA值排序:温针灸（86.1%）>温针灸+西药（82.5%）>电针+中药（75.9%）>针刺+西药（75.7%）>耳穴+中药（70.5%）>针刺+中药（60.3%）>针刺+中药+西药（59.6%）>电针+中药+西药（55%）>火针+西药（53.2%）>电针（33.3%）>艾灸+中药+西药（28.5%）>电针+西药（27.8%）>中药（21.4%）>针刺（12%）>西药（8.2%）;在提升阿尔茨海默病MMSE评分方面,SUCRA值排序:电针+中药（93.4%）>火针+西药（90.9%）>温针灸+西药（74.2%）>针刺+中药+西药（66%）>电针+西药（65.8%）>针刺+西药（60.4%）>针刺+中药（47.3%）>耳穴+中药（46.2%）>电针（39.6%）>艾灸+中药+西药（35%）>西药（17.6%）>针刺（9.4%）>中药（4.3%）;在提升阿尔茨海默病ADL评分方面:中药（94%）>电针+中药（73.8%）>针刺+中药（59.9%）>西药（58.5%）>针刺（58.2%）>针刺+西药（56.3%）>针刺十中药+西药（50.3%）>电针（47.7%）>火针+西药（41.3%）>耳穴+中药（33.9%）>电针+中药+西药（33.3%）>电针+西药（32.5%）>温针灸（10.3%）;在提升阿尔茨海默病HDS-R评分方面:温针灸（92.4%）>电针+中药+西药（82.4%）>针刺+西药（69.6%）>电针+西药（69.0%）>针刺+中药（38.9%）>西药（37.5%）>电针（33.8%）>针刺（26.0%）>中药（0.3%）。使用SPSS 17.0统计软件对使用频次大于或等于4的穴位进行聚类分析,将25个腧穴分为4大类,其中百会、足三里、四神聪各成一类,第四类分为5个小类,分别为“内关—三阴交”、“大钟—悬钟—太溪”、“颞三针—脑三针—智三针—人中—印堂—风池—血海—中脘—合谷—丰隆—风府—风池—命门—涌泉—神庭—肾俞”、神门以及大椎各成一类。结论:1.根据网状Meta分析的1)SUCRA概率排序结果,在提高治疗阿尔茨海默病有效率针灸治疗组合比较有效的前5位治疗组合为温针灸、温针灸+西药、电针+中药、针刺+西药、耳穴+中药;2)在提高治疗阿尔茨海默病MMSE评分针灸治疗组合比较有效的前5位治疗组合为电针+中药、火针+西药、温针灸+西药、针刺+中药+西药、电针+西药;3)在提高治疗阿尔茨海默病ADL评分针灸治疗组合比较有效的前5位治疗组合为中药、电针+中药、针刺+中药、西药、针刺;4)在提高治疗阿尔茨海默病HDS-R评分针灸治疗组合比较有效的前5位治疗措施分别为温针灸、电针+中药+西药、针刺+西药、电针+西药、针刺+中药。2.根据相关的频次分析及聚类分析结果可知,针灸治疗阿尔茨海默病的主要穴位为百会、四神聪、足三里、太溪、内关、三阴交等,穴位单一应用或组合为百会、四神聪、足三里、“颞三针—脑三针—智三针”、“血海—中脘”等。
二、雌激素与阿尔茨海默病（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、雌激素与阿尔茨海默病（论文提纲范文）
（1）雌激素与阿尔茨海默病（论文提纲范文）
| 1 雌激素及其受体与AD |
| 2 雌激素治疗AD的作用机制 |
| 2.1 雌激素对APP的调节 |
| 2.2 雌激素对tau蛋白磷酸化的调节 |
| 2.3 雌激素对细胞凋亡的调节 |
| 2.4 雌激素的神经元保护作用 |
| 3 雌激素替代治疗 |
| 4 植物雌激素对AD的治疗 |
| 5 小结 |
（2）槲皮素对Aβ25-35诱导的PC12细胞线粒体途径凋亡的保护作用及机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩写 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 植物雌激素介导线粒体途径对阿尔茨海默病神经保护作用的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（3）骨碎补对去势诱导AD模型大鼠学习记忆障碍的治疗作用及可能机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 第1章 理论探讨 |
| 1 中医学对痴呆的认识 |
| 2 现代医学对 AD 的研究 |
| 3 骨碎补与 AD 的相关研究 |
| 第2章 实验部分 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.3 Morris 水迷宫实验 |
| 2.4 Nissl 染色法、Golgi 染色法 |
| 2.5 Western Blot 实验 |
| 2.6 统计学分析 |
| 第3章 实验结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 基于网络药理学分析结合相关文献探讨骨碎补防治AD的可行性研究 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间的研究成果、参加的学术会议及获奖 |
| 致谢 |
（4）有氧运动调控雌激素对阿尔茨海默病的神经保护作用（论文提纲范文）
| 1 AD的发生与雌激素的作用 |
| 2 雌激素-胆碱能平衡体系失衡与AD的发生关系 |
| 3 雌激素对AD脑神经的保护作用 |
| 4 有氧运动与AD的临床研究 |
| 5 运动对雌激素缺乏所致的AD症状的干预作用 |
（5）雌激素对血管性痴呆大鼠认知功能及凋亡自噬相关蛋白和Wnt/β-catenin信号通路的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩写 |
| 引言 |
| 第一部分 去卵巢血管性痴呆大鼠模型的建立及雌激素对去卵巢血管性痴呆大鼠认知功能的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 雌激素对血管性痴呆大鼠海马组织形态学的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第三部分 雌激素对血管性痴呆大鼠海马神经元细胞凋亡和自噬相关蛋白表达的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第四部分 雌激素对血管性痴呆大鼠海马组织Wnt/β-catenin信号通路的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第五部分 雌激素替代治疗对手术绝经患者术后认知功能的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 综述 雌激素对女性认知功能的影响 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（6）复方苁蓉益智胶囊治疗阿尔茨海默病作用机制的网络药理学研究（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 数据库与软件 |
| 1.2 复方苁蓉益智胶囊化学成分收集及活性成分的筛选 |
| 1.3 复方苁蓉益智胶囊治疗阿尔茨海默病的靶点预测 |
| 1.4 潜在靶点蛋白质-蛋白质互作（protein-protein interaction,PPI）网络的构建 |
| 1.5 潜在靶点gene ontology(GO）分析与kyoto encyclopedia of genes and genomes(KEGG）通路富集分析 |
| 1.6 单味药-关键成分-潜在靶点-通路网络的构建 |
| 2 结果 |
| 2.1 复方苁蓉益智胶囊化学成分及活性成分 |
| 2.2 复方苁蓉益智胶囊治疗阿尔茨海默病的潜在靶点 |
| 2.3 潜在靶点PPI网络分析 |
| 2.4 潜在靶点GO分析与KEGG通路富集分析 |
| 2.5 单味药-关键成分-潜在靶点-通路网络 |
| 3 讨论 |
（7）内蒙古蒙、汉族人群阿尔茨海默病相关因素的病例-对照研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 一、内蒙古自治区蒙、汉族人群AD危险因素的探索性研究 |
| 二、内蒙古自治区蒙古族SAD遗传机制研究 |
| 结果 |
| 一、内蒙古自治区蒙、汉族65岁及以上社区人群AD危险因素的病例-对照研究 |
| 二、内蒙古自治区蒙古族人群AD的遗传机制研究 |
| 讨论 |
| 一、内蒙古自治区社区蒙、汉族人群AD危险因素的相关性研究 |
| 二、Aβ及脂代谢相关基因与阿尔茨海默病相关性研究 |
| 三、阿尔茨海默病基因-环境交互作用研究 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 文献综述 迟发性阿尔茨海默病的遗传学发现及进展 |
| 参考文献 |
| 中英文对照缩略词表 |
| 攻读学位期间成果 |
| 致谢 |
（8）芝麻素对雌性APP/PS1阿尔兹海默症小鼠认知功能障碍的改善作用与机制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 芝麻素的研究进展 |
| 1.1.1 芝麻素的结构与性质和来源 |
| 1.1.2 芝麻素的生理活性 |
| 1.2 阿尔兹海默症 |
| 1.2.1 阿尔兹海默症病理特征 |
| 1.2.2 阿尔兹海默症发病机制 |
| 1.2.3 阿尔兹海默症的性别差异 |
| 1.3 神经炎症 |
| 1.3.1 小胶质细胞与神经炎症 |
| 1.3.2 星形胶质细胞与神经炎症 |
| 1.4 研究意义与内容 |
| 1.4.1 研究意义 |
| 1.4.2 研究内容 |
| 1.4.3 技术路线 |
| 第二章 芝麻素对阿尔兹海默症模型小鼠学习记忆能力影响和神经保护作用 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 实验动物 |
| 2.2.2 材料与试剂 |
| 2.2.3 仪器和设备 |
| 2.2.4 试验方法 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.3.1 新物体识别测试 |
| 2.3.2 芝麻素对APP/PS1转基因小鼠脑内神经元形态结构影响 |
| 2.3.3 芝麻素对APP/PS1转基因小鼠脑内突触功能的影响 |
| 2.4 小结 |
| 第三章 芝麻素改善阿尔兹海默症小鼠脑部淀粉样蛋白积累和神经炎症 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 材料与试剂 |
| 3.2.2 仪器与设备 |
| 3.2.3 实验方法 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 芝麻素对APP/PS1转基因小鼠脑内淀粉样蛋白水平的影响。 |
| 3.3.2 芝麻素对APP/PS1转基因小鼠脑内淀粉样前体蛋白表达的影响 |
| 3.3.3 芝麻素对APP/PS1转基因小鼠脑内胰岛素降解酶的促进作用和相关信号通路的激活 |
| 3.3.4 芝麻素对APP/PS1转基因小鼠脑内小胶质细胞和炎症因子表达的影响 |
| 3.4 小结 |
| 第四章 芝麻素通过ERβ-AKT-PI3K信号通路抑制Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞毒性 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料与方法 |
| 4.2.1 细胞株 |
| 4.2.2 材料与试剂 |
| 4.2.3 仪器与设备 |
| 4.2.4 实验方法 |
| 4.3 结果与分析 |
| 4.3.1 芝麻素对Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞活力的影响。 |
| 4.3.2 雌激素受体ERβ抗结剂对芝麻素诱导的ERβ-AKT-PI3K信号通路的抑制作用 |
| 4.3.3 雌激素受体ERβ抗结剂对芝麻素诱导神经保护作用的抑制 |
| 4.4 小结 |
| 第五章 结论、创新点与展望 |
| 5.1 结论 |
| 5.2 讨论 |
| 5.3 创新点 |
| 5.4 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（9）P38MAPK抑制剂、雌二醇和TPX2对痴呆鼠模型海马神经细胞损害的保护作用及认知功能的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 符号说明 |
| 中文部分 |
| 第一部分 雌二醇治疗对小鼠阿尔茨海默病模型海马神经元发生及认知功能障碍的早期保护作用 |
| 前言 |
| 资料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 附图 |
| 参考文献 |
| 第二部分 P38MAPK抑制剂对血管性痴呆大鼠海马细胞凋亡的保护作用及学习记忆能力的影响 |
| 前言 |
| 资料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 附图 |
| 参考文献 |
| 第三部分 TPX2对阿尔茨海默病模型大鼠神经细胞凋亡的保护作用机制的研究 |
| 前言 |
| 资料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 附图 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 |
| 英文部分 |
| Chronic estradiol administration during the early stage ofAlzheimer's disease pathology rescues adult hippocampalneurogenesis and ameliorates cognitive deficits in Ap"2 mice |
| Introduction |
| Materials and Methods |
| Results |
| Discussion |
| Summary |
| Reference |
| Figure legends |
| The Effect of P38MAPK Inhibitors on Hippocampus Apoptosisand Learning Memory Ability in Vascular Dementia Rat |
| 1. Introduction |
| 2. Materials and Methods |
| 3. Results |
| 4. Discussion |
| Conflict of Interests |
| Authors, Contribution |
| Reference |
| Figure legend |
| Protective Effects and Mechanism Researches of TPX2 onNeurocytes Apoptosis of Rats with Alzheimer's Disease Model |
| Introduction |
| Materials and methods |
| Results |
| Discussion |
| References |
（10）针灸治疗老年性痴呆（AD）的网状Meta分析及取穴规律探讨（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 国内以及国外阿尔茨海默病文献研究 |
| 1.1 西方医学对于阿尔茨海默病的认识及相关研究进展 |
| 1.1.1 阿尔茨海默病的流行病学研究 |
| 1.1.2 AD的病因研究 |
| 1.1.3 AD的发病机制研究 |
| 1.1.4 AD的临床诊断标准研究进展 |
| 1.1.5 西方医学对AD的治疗手段 |
| 1.2 AD的中医学研究进展 |
| 1.2.1 AD的中医学溯源 |
| 1.2.2 AD的病因 |
| 1.2.3 AD的病机研究 |
| 1.2.4 中医关于AD的中医诊断分型 |
| 1.2.5 中医治疗AD的措施 |
| 第二章 针灸治疗阿尔茨海默病的文献系统评价和网状META分析 |
| 2.1 资料与方法 |
| 2.1.1 纳入标准 |
| 2.1.2 排除标准 |
| 2.1.3 检索文献策略及来源 |
| 2.1.4 文献筛选与数据提取、结局指标 |
| 2.1.5 文献质量评价 |
| 2.1.6 统计学方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 文献的检索结果及纳入结果 |
| 2.2.2 纳入文献的质量评价 |
| 2.2.3 绘制证据网络图 |
| 2.2.4 闭合环的不一致性检验 |
| 2.2.5 针灸治疗阿尔茨海默病的网状meta分析 |
| 2.2.6 发表偏倚的分析 |
| 2.3 讨论 |
| 第三章 针灸治疗阿尔茨海默病的配穴规律分析 |
| 3.1 文献纳入 |
| 3.1.1 文献检索 |
| 3.1.2 文献纳入标准 |
| 3.1.3 文献排除标准 |
| 3.1.4 文献检索结果 |
| 3.2 数据库的建立 |
| 3.3 取穴规律探讨 |
| 3.3.1 分析类目 |
| 3.3.2 分析方法 |
| 3.3.3 研究结果 |
| 3.3.4 分析与总结 |
| 结论 |
| 研究生在学期间发表论文情况 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 附件1:统计学处理合格证明 |
四、雌激素与阿尔茨海默病（论文参考文献）
- [1]雌激素与阿尔茨海默病[J]. 陈超,郭清,李红,商亚珍. 承德医学院学报, 2021(04)
- [2]槲皮素对Aβ25-35诱导的PC12细胞线粒体途径凋亡的保护作用及机制研究[D]. 甄艳杰. 河北北方学院, 2021(01)
- [3]骨碎补对去势诱导AD模型大鼠学习记忆障碍的治疗作用及可能机制研究[D]. 杨梦. 湖北民族大学, 2021(12)
- [4]有氧运动调控雌激素对阿尔茨海默病的神经保护作用[J]. 邱璇. 中国老年学杂志, 2021(08)
- [5]雌激素对血管性痴呆大鼠认知功能及凋亡自噬相关蛋白和Wnt/β-catenin信号通路的影响[D]. 杨艳艳. 河北医科大学, 2021(02)
- [6]复方苁蓉益智胶囊治疗阿尔茨海默病作用机制的网络药理学研究[J]. 王旭,姚璇,马素亚,时晶. 中药新药与临床药理, 2021(02)
- [7]内蒙古蒙、汉族人群阿尔茨海默病相关因素的病例-对照研究[D]. 张春雨. 南方医科大学, 2020(06)
- [8]芝麻素对雌性APP/PS1阿尔兹海默症小鼠认知功能障碍的改善作用与机制[D]. 马少博. 西北农林科技大学, 2020(02)
- [9]P38MAPK抑制剂、雌二醇和TPX2对痴呆鼠模型海马神经细胞损害的保护作用及认知功能的影响[D]. 梁克山. 山东大学, 2019(02)
- [10]针灸治疗老年性痴呆（AD）的网状Meta分析及取穴规律探讨[D]. 白钰如（Rebecca Yuk-Yu）. 广州中医药大学, 2019(08)